郝會民，衛(wèi)海燕

［鄭州大學(xué)附屬兒童醫(yī)院（河南省兒童醫(yī)院，鄭州兒童醫(yī)院） 內(nèi)分泌遺傳代謝科，河南 鄭州 450000］

乙基丙二酸腦病是一種罕見的遺傳代謝病，為常染色體隱性遺傳，于1991 年BURLINA 等［1］首次對其進行了描述，直到2004 年TIRANTI 等［2］確定了相關(guān)基因ETHE1。我國則于2008 年首次報道1 例伴有聽神經(jīng)損害的兒童乙基丙二酸尿癥［3］，于2009 年該基因功能得以驗證，該病除少數(shù)例外，多發(fā)生在地中?；虬⒗貐^(qū)［4］，截至目前為止僅 100 余例報道［5］。

乙基丙二酸腦病臨床表現(xiàn)較相似，典型臨床表現(xiàn)主要為頑固性腹瀉、運動發(fā)育遲滯、智力落后、皮膚瘀點瘀斑、直立性手足發(fā)紺及大腦損害等癥狀，發(fā)病晚期則為嚴重的精神運動遲緩伴痙攣性四肢癱瘓，并可伴有并發(fā)疾病的昏迷發(fā)作，罕見的中樞神經(jīng)系統(tǒng)畸形，關(guān)節(jié)過度松弛、屈曲性視網(wǎng)膜血管擴張和腎小球腎炎急性壞死。生化特征為乙基丙二酸升高，丁酰肉堿、異戊酰肉堿增高，頭顱MRI：雙側(cè)基底節(jié)對稱性異常信號，腦干壞死性病變類似于線粒體腦病。該病病死率極高，多于1 歲以內(nèi)甚至半歲以內(nèi)發(fā)病，然后臨床進行性惡化，2 歲以內(nèi)多因代謝紊亂死亡，據(jù)統(tǒng)計死亡年齡一般在1 歲半至3 歲之間［6］。由于本病無特效治療方法，到目前為止，國內(nèi)甚至國外報道病例少有存活，本研究通過報道1 例篩查為乙基丙二酸腦病患兒因延誤診治在病程中逐步出現(xiàn)的不同臨床表現(xiàn)，從而讓臨床醫(yī)生能更加深入認識該病，同時查閱國內(nèi)外相關(guān)文獻，了解目前國外針對乙基丙二酸腦病診治現(xiàn)狀，以期提高對該病的診治水平。本研究經(jīng)倫理審查委員會審查批準，患兒父母簽署知情同意書。

1 臨床資料

患兒，男，行新生兒篩查提示乙基丙二酸尿癥，建議復(fù)查，家長未予重視。出生后1 個月出現(xiàn)頑固性腹瀉，7～8 次/日，為稀糊或稀水樣便，體重增長緩慢，并伴有運動智力發(fā)育落后。出生后4 個月時復(fù)查血氨基酸和?；鈮A譜顯示丁酰肉堿、異戊酰肉堿增高；尿氣相色譜質(zhì)譜有機酸示乙基丙二酸-2 增高；頭顱CT 示兩側(cè)小腦白質(zhì)對稱性密度減低，兩側(cè)大腦腦白質(zhì)密度略低。進一步行基因檢查示ETHE1 基因c.295C＞T 位點純合突變，確診為乙基丙二酸腦病。建議予以免乳糖飲食，同時口服左卡尼汀口服液0.5 g/d、維生素B1片30 mg/d、維生素B12 片10 mg/d、輔酶Q10 20 mg、葉酸片5 mg/d 進行治療，但家長未給予免乳糖飲食，僅口服藥物1 個月，在腹瀉癥狀好轉(zhuǎn)、智力運動發(fā)育較之前有所好轉(zhuǎn)后自行停藥。出生后6 個月患兒面部開始出現(xiàn)散在出血點，逐漸全身出現(xiàn)大量出血點、大片瘀斑，腹瀉加重，智力運動發(fā)育倒退，建議擇期行肝移植手術(shù)，實際未予進行。

患兒本次因嘔吐、腹瀉4 d，發(fā)熱、嗜睡3 d入院就診，年齡為1 歲4 個月?；純簽榈谝惶サ谝划a(chǎn)，足月剖宮產(chǎn)，孕38 周，出生體重2.7 kg，生后母乳喂養(yǎng)，6 月添加輔食，6 月會抬頭；現(xiàn)不會獨坐，不會爬，不會獨站，不會走，不會說話，現(xiàn)運動、智力發(fā)育落后于同齡兒。患兒父母均身體健康，無遺傳或先天性疾病史?；純喝朐簳r體溫 36.7℃，脈搏 135 次/min，呼吸 33 次/min，血壓 119/82 mmHg （1 mmHg=0.133 kPa），血氧飽和度（SPO2） 90%，體重 9 kg，頭圍 44 cm，身長76.5 cm，神志清醒。全身皮膚蒼白，可見大量“ 米粒樣” 瘀點， 左上肢可見大片瘀斑， 約10 cm×10 cm，頸軟，呼吸稍促，雙肺呼吸音粗，心音有力，腹軟，肝右肋下2 cm，質(zhì)軟，脾肋下未觸及。四肢肌力正常，肌張力低，四肢末梢涼，毛細血管充盈時間3 s。實驗室檢查：血氣分析示酸堿度7.38，堿剩余-15.3 mmol/L （正常值為-3～3 mmol/L）， 乳酸 3.1 mmol/L （正常值為 0.5～2.2 mmol/L），電解質(zhì)：鉀2.65 mmol/L （正常值為3.5～5.5 mmol/L）；血尿常規(guī)大致正常，凝血時間正常，免疫球蛋白、淋巴細胞亞群正常，乙肝六項、感染四項均為陰性，呼吸道病原學(xué)示柯薩奇病毒抗體-IgM 陽性（+），細菌毒素、淀粉酶正常；糞便輪狀病毒陽性（+）；甲狀腺激素正常，腹部彩超、心臟彩超未見明顯異常。復(fù)查血氨基酸和?；鈮A譜示丁酰肉堿1.79 μmol/L （正常值為0.05～0.60 μmol/L） 升高，尿氣相色譜質(zhì)譜有機酸結(jié)果分析示：①乙基丙二酸47.8 μmol/L （正常值為0.0～7.0 μmol/L），②乳酸，2-羥基丁酸，3-羥基丙酸、丙酮酸、3-羥基丁酸、3-羥基異丁酸增高，提示酮尿。入院后給予無乳糖飲食，補充中鏈脂肪酸的特殊配方奶粉（小百肽），補充高糖液體、靜脈滴注左卡尼汀注射液100 mg/(kg·d)及口服甲鈷胺片0.5 mg，1 次/d，維生素 B1 片 10 mg，3 次/d，維生素 B2 片 10 mg，1 次/d，輔酶 Q10 10 mg，2 次/d，葉酸片 5 mg，1 次/d，維生素 AD 2 000IU，1 次/d，N-乙酰半胱氨酸300 mg，2 次/d。治療后患兒精神好轉(zhuǎn)，腹瀉好轉(zhuǎn)，皮膚瘀點瘀斑較治療前有所消退。見圖1-2。

圖1 治療前

圖2 治療后

患兒病情穩(wěn)定2 d 后突然出現(xiàn)嘆氣樣呼吸，面部及四肢末端發(fā)紺。查體：體溫36.5℃，脈搏152 次/min，呼吸 40 次/min，血壓 111/75 mmHg，復(fù)蘇囊加壓給氧下SPO280%，淺昏迷，反應(yīng)差，全身皮膚蒼白，再次出現(xiàn)大量散在瘀點及瘀斑且部分融合成片，以面部、右上肢、右下肢上部較為明顯，面色蒼黃，雙側(cè)瞳孔對光反射遲鈍，口唇干裂，口周發(fā)紺，頸軟，呼吸促，呼吸節(jié)律不規(guī)則，嘆氣樣呼吸，雙肺呼吸音粗，心音尚有力，腹軟，肝右肋下2 cm，質(zhì)軟，脾肋下未觸及。腸鳴音存在，四肢肌力、肌張力低，布氏征陰性，雙側(cè)巴氏征、克氏征陰性，四肢末梢涼，有發(fā)紺，毛細血管充盈時間大于3 s，遂轉(zhuǎn)入兒科重癥監(jiān)護病房（PICU）進一步搶救治療。行機械通氣，呼吸模式：壓力控制；呼吸參數(shù)：呼吸頻率35 次/min，吸氣末正壓23 cmH2O，呼氣末正壓5 cmH2O，吸氣上升時間0.61 s，吸入氧濃度40%。同時復(fù)測血氣分析示酸堿度7.10，碳酸氫根4.8 mmol/L，實際堿 剩 余 -22.7 mmol/L， 糖 22.1 mmol/L， 乳 酸8.7 mmol/L，鈉131 mmol/L，給予補堿糾酸、補充高糖液體等對癥支持治療，效果較差，患兒出現(xiàn)頑固性代謝酸中毒且逐漸加重，乳酸持續(xù)升高。復(fù)查血氣分析示酸堿度6.95，碳酸氫根7.6 mmol/L，實際堿剩余-22.1 mmol/L，乳酸21 mmol/L，末梢循環(huán)差，心率、血壓逐漸下降，持續(xù)血管活性藥物應(yīng)用，血壓、心率不能維持，無咳嗽反射，無自主呼吸，最終家長放棄治療。

2 討論

乙基丙二酸腦病是由ETHE1 基因突變引起的，該基因位于19q13.31，由7 個外顯子組成，目前人類基因突變數(shù)據(jù)庫（Human Gene Mutation Database, HGMD） 收錄了 34 個 ETHE1 突變，大部分為錯義突變，絕大部分突變集中于第1、2、4外顯子［7］。目前基因型與表型的相關(guān)性尚不明確，PIGEON 等［8］的報道顯示，即使在雙胞胎中，也是異質(zhì)性的，表型也不盡相同，可以是典型的，也可以是非典型的，更有早期死亡的嚴重型。該基因編碼硫化物解毒線粒體蛋白，又稱為線粒體硫雙加氧酶，它催化谷胱甘肽過硫化物（GSSH）的氧化，生成谷胱甘肽和過亞硫酸鹽，ETHE1 基因突變將引起線粒體硫雙加氧酶缺陷，而線粒體硫雙加氧酶對硫化氫（H2S） 的解毒至關(guān)重要，其缺陷將導(dǎo)致體內(nèi)出現(xiàn)高水平的H2S，目前被認為是該病的發(fā)病機制［9］。

H2S 是一種微量的無色、水溶性的氣體介質(zhì)，不穩(wěn)定且難于測定，參與血管張力的調(diào)節(jié)。當(dāng)H2S濃度較高時，毒性極高，可直接損傷細胞膜，包括血管內(nèi)皮細胞和大腸粘膜細胞。其對體內(nèi)多種酶有毒性作用，能夠抑制細胞色素C 氧化酶，阻止線粒體呼吸和增加乳酸，抑制環(huán)氧化酶及短鏈?；o酶A 脫氫酶，從而導(dǎo)致丙二酸乙酯和丁酰肉堿、異戊酰肉堿升高；也被證明會損害其他酰基輔酶A 脫氫酶，異丁基輔酶A 脫氫酶、2-甲基丁酰輔酶A 脫氫酶和異戊基輔酶A 脫氫酶，這些酶的缺少會導(dǎo)致丁酰肉堿、異戊酰肉堿進一步增加，異丁基輔酶A 和異戊基甘氨酸升高［2］。因此這也解釋了乙基丙二酸腦病的發(fā)病機制主要是由H2S 介導(dǎo)的，結(jié)合本研究患兒疾病初期出現(xiàn)的頑固性腹瀉、皮膚大量出血點、瘀斑，后期四肢末梢發(fā)紺、淺昏迷、肌張力低下、頑固性乳酸酸中毒，可能就是由于代謝產(chǎn)物H2S 在大腦與全身肌肉中大量積聚導(dǎo)致。

乙基丙二酸腦病發(fā)病率較低，目前尚無統(tǒng)計學(xué)數(shù)據(jù)，但可能比預(yù)期要高，因為該病與其他疾病存在許多重疊的臨床和實驗室發(fā)現(xiàn)，應(yīng)注意與以下疾病相鑒別：腸道過敏性疾病、血液系統(tǒng)疾病、腦膜炎球菌感染、感染性休克、結(jié)締組織病等；乙基丙二酸尿癥應(yīng)與短鏈?；o酶A 脫氫酶缺乏癥、戊二酸血癥Ⅱ型、牙買加嘔吐病、多態(tài)性短鏈酰基輔酶A 脫氫酶，基因和線粒體呼吸鏈功能障礙區(qū)分，診斷該病應(yīng)依據(jù)臨床特點和生化特征［10］。尿液乙基丙二酸升高可見于線粒體脂肪酸代謝疾病，血液丁酰肉堿、異戊酰肉堿濃度升高是乙基丙二酸腦病的常見生化表現(xiàn)之一，但并非特異性表現(xiàn)［7］。

隨著對乙基丙二酸腦病基因功能及致病性的不斷認識，發(fā)現(xiàn)對本病的治療應(yīng)著重于降低患兒體內(nèi)H2S 的含量，提高H2S 的清除速率和去毒性水平。目前國外已有多篇文獻報道，對于確診為乙基丙二酸腦病的患兒給予早期積極治療后的隨訪中發(fā)現(xiàn)患兒體重、腹瀉、皮膚表現(xiàn)和神經(jīng)學(xué)結(jié)果均有改善。因此，早期給予積極治療可能對疾病的表現(xiàn)及預(yù)后會產(chǎn)生更大的影響。

對于新生兒篩查中發(fā)現(xiàn)的乙基丙二酸腦病患者中，飲食中應(yīng)限制含硫氨基酸，除了可以治療本病以外，還能夠進一步改善臨床結(jié)果和生化指標(biāo)［4］。嬰幼兒患者早期應(yīng)給予無乳糖飲食，之后逐漸開始添加輔食：水果泥、山藥泥、土豆泥以及各種菜泥，7～8 月時可逐漸加米粉、米粥、蛋黃， 9～10 月加全蛋、 魚、 蝦、 肉泥。 BOYER等［11］報道了一種新的飲食療法：低蛋氨酸和半胱氨酸飲食，該療法在新生兒篩查發(fā)現(xiàn)的乙基丙二酸腦病患者在8 個月時開始使用，期間為改善口感也可加用水果泥、蔬菜泥，長期隨訪證實了臨床和生化改善。McGOWAN 等［12］也報道了飲食限制蛋氨酸水平可降低乙基丙二酸水平，但由于患者在實施治療后不久死亡，不能進行長期隨訪。因此，對于飲食控制，建議早期給予干預(yù)，并定期監(jiān)測血漿氨基酸水平，以便根據(jù)需要修改營養(yǎng)成份，預(yù)防蛋氨酸缺乏。

除傳統(tǒng)的飲食治療以外，YOON 等［13］報道了對患兒進行核黃素試驗性治療，臨床表現(xiàn)及生化指標(biāo)略有改善。還有文獻報道［14］在一項動物試驗中，抗壞血酸可降低H2S 對細胞色素C 氧化酶活性的抑制作用， 以提高硫化物氧化的速率。BOYER 等［11］也報道了 1 例患兒于 6 個月后加用了抗壞血酸100 mg，2 次/d，治療后臨床表現(xiàn)及生化指標(biāo)均有改善。國外目前可用于減少患者H2S積累的藥物有甲硝唑和N-乙酰半胱氨酸，哺乳動物H2S 主要來源是大腸的厭氧菌群，甲硝唑是一種對厭氧菌有效的抗生素，其可通過降低腸道厭氧菌數(shù)目，抑制H2S 的生成來降低體內(nèi)H2S 的含量，用法用量為靜脈滴注，30 mg/(kg·d)，長期治療可引起白細胞降低、周圍神經(jīng)性病變、假膜性結(jié)腸炎等相關(guān)并發(fā)癥；為預(yù)防相關(guān)并發(fā)癥可應(yīng)用新霉素，50 mg/(kg·d)，每 2 周交替應(yīng)用；N-乙酰半胱氨酸是谷胱甘肽的細胞滲透前體，它能從H2S中吸收硫原子，形成無毒的谷胱甘肽過硫化物，從而中和有毒的H2S，100 mg/(kg·d)，可應(yīng)用于昏迷的患者；對于新生兒篩查發(fā)現(xiàn)的乙基丙二酸腦病，給予甲硝唑和N-乙酰半胱氨酸聯(lián)合治療后，臨床表現(xiàn)及生化較前好轉(zhuǎn)，但目前缺乏對該治療反應(yīng)的長期隨訪，應(yīng)擴大新生兒篩查，在臨床癥狀出現(xiàn)之前識別出乙基丙二酸腦病患者，并盡早開始治療，以最小化H2S 的毒性，改善患者預(yù)后［12，15-16］。國內(nèi)目前暫無應(yīng)用甲硝唑及N-乙酰半胱氨酸治療報道，本研究為國內(nèi)報道的首例應(yīng)用乙酰半胱氨酸治療乙基丙二酸腦病，但由于應(yīng)用時間短，患兒感染后體內(nèi)嚴重代謝紊亂，家長放棄治療，不能長期追蹤治療效果。

針對急性發(fā)作的乙基丙二酸腦病患者，目前治療策略有限，HERNANDEZ 等［17］報道了在急性代謝紊亂期使用持續(xù)腎臟透析替代療法（CRRT），成功地使一例19 歲非典型患者在24 h 內(nèi)臨床表現(xiàn)及生化改善。CRRT 主要降低體內(nèi)硫代硫酸鹽水平，但值得注意的是由于硫代硫酸鹽的體積較小，這些陰離子很容易通過血液濾過的對流或透析擴散而被去除，且CRRT 能夠去除N-乙酰半胱氨酸，但對甲硝唑沒有明顯去除影響，建議透析過程中，靜脈注射N-乙酰半胱氨酸的劑量應(yīng)增加一倍［18-19］。綜上，CRRT 能有助于在長期接受甲硝唑和N-乙酰半胱氨酸治療后出現(xiàn)急性代謝紊亂時恢復(fù)代謝平衡。

雖然報道飲食和藥物治療可使乙基丙二酸腦病情況改善。最近，肝移植已被報道稱為一種被倫理委員會批準的新的治療策略。文獻［5，19］報道了肝移植術(shù)后患兒的精神運動發(fā)育方面的顯著改善，以及生化指標(biāo)顯著逆轉(zhuǎn)，腦MRI 顯示基底神經(jīng)節(jié)病變沒有進一步增加。但肝移植存在局限性：①器官的可獲得性；②患兒在移植之前可能就出現(xiàn)早期臨床和MRI 表現(xiàn)；③肝移植的最佳年齡和體重標(biāo)準的選擇。肝移植的術(shù)后并發(fā)癥包括巨細胞病毒感染及腺病毒感染菌血癥，腦MRI 無顯著變化等。

除此之外，建議將乙基丙二酸腦病視為國家規(guī)定的新生兒篩查的候選疾病，特別是在致病等位基因頻率相對較高的人群中，此外還需要進一步的工作開確定丁酰基肉堿（C4）、異戊酰肉堿（C5） 升高在已證實的乙基丙二酸腦病中的頻譜［5］，目前國外的一些學(xué)者也提出，建議加大陽性標(biāo)本做出實驗室切值（cutoff 值） 才能在血尿質(zhì)譜檢測中準確鑒別。同時對于新生兒篩查陽性患兒，應(yīng)進一步復(fù)查同時行基因檢測明確診斷，盡早治療，可能會有效地改變病程，改善臨床結(jié)果。對于父母攜帶有EHTH1 致病基因者，應(yīng)孕期行產(chǎn)前診斷。

綜上所述，遺傳代謝病起病癥狀不典型，應(yīng)注意與其他疾病鑒別，對于新生兒篩查有異常的應(yīng)給予足夠重視，以免延誤治療時機。血尿遺傳代謝篩查有助于診斷，基因分析可予以確診，對于確診患兒，應(yīng)盡早給予飲食指導(dǎo)，同時可嘗試應(yīng)用甲硝唑和N-乙酰半胱氨酸聯(lián)合治療，必要時進行肝移植手術(shù)。