尹永召，李朝軍，諶彪，王偉，康鵬通訊作者）

（烏魯木齊市第一人民醫(yī)院 外一科，新疆 烏魯木齊 830011）

0 引言

對外科疾病來講，膽囊結(jié)石最為常見，近些年來發(fā)病率不斷提升。對比男性，女性的發(fā)病率更高，其中影響出現(xiàn)膽囊結(jié)石的原因有很多，比如肥胖、生活習(xí)慣等，會對病人的生活質(zhì)量造成影響。從臨床表現(xiàn)上來看，發(fā)熱、寒顫、持續(xù)性的疼痛、黃疸等。一旦病人有膽囊結(jié)石的情況，治療就需要借助外科手術(shù)，隨著科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，微創(chuàng)手術(shù)得以廣泛的應(yīng)用，因此治療方式也有所改變，可以在把結(jié)石取出的同時還能把膽囊最大程度的保持完整，因此具有良好的優(yōu)點。

新疆地區(qū)是膽囊結(jié)石的高發(fā)區(qū)域，與漢族膽囊結(jié)石相比，維吾爾族膽囊結(jié)石的患病率高，發(fā)病年齡早，嚴(yán)重影響生活質(zhì)量[1]。特此，本研究從具有調(diào)節(jié)膽囊收縮功能的膽囊收縮素A受體入手，通過手術(shù)切取組織和分離提取標(biāo)本，采用RT-PCR法對膽囊標(biāo)本CCK-A受體分子mRNA轉(zhuǎn)錄水平進(jìn)行測定，進(jìn)行組間和組內(nèi)系統(tǒng)分析對比，對維吾爾族高發(fā)膽囊結(jié)石的分子機(jī)制進(jìn)行探索，為預(yù)防和治療奠定堅實的基礎(chǔ)。

1 資料與方法

1.1 一般資料。選取我院2016年6月至2018年6月期間收治的維、漢膽囊結(jié)石患者各100例。男94例，女106例，年齡34-75歲，平均（51.8±5.3）歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：無嚴(yán)重其他臟器功能障礙和合并癥，在新疆地區(qū)居住滿10年以上者。全部病例為漢族和維吾爾族患者，可以完成膽囊切除手術(shù)切除者。最近一段時間沒有使用對膽囊收縮有影響的藥物。非膽囊結(jié)石組：來源于醫(yī)院肝膽外科（肝移植組）維吾爾族非膽囊結(jié)石肝移植供體膽囊[2]。

1.2 方法。維、漢膽囊結(jié)石病人收縮膽囊收縮功能的情況：研究病人在12個小時內(nèi)禁食，然后通過B超進(jìn)行測量，對病人的空腹膽囊容積、膽囊壁厚度等進(jìn)行測量，先測出長徑L，然后測出長徑中點相互垂直之兩橫徑W及H，根據(jù)Dodds公式（V=0.52×L×W×H）計算，囑咐患者進(jìn)食兩個煎蛋，測量30 min、60 min、90 min膽囊餐后殘余容積，取最小殘余容積（RV），分別計算膽囊排空容積EV=（FV-RV）、膽囊殘余指數(shù)RF=（RV／FVx100%）和膽囊排空率E=（1-RE）。判斷膽囊收縮功能標(biāo)準(zhǔn)為E大于50%提示收縮功能良好，30-50%欠佳，＜30%不良。收縮良好功能為“正?！苯M，收縮功能欠佳和不良為“減弱”組。維、漢膽囊結(jié)石患者及非膽囊結(jié)石組膽囊組織中CCK-A受體mRNA基因表達(dá)水平情況：CCK-A受體的檢測：①從組織中提取mRNA并測定濃度[3]；②設(shè)計探針及引物；③按照樣本數(shù)制備反應(yīng)液（每次實驗設(shè)置和內(nèi)參基因β-actin的陰性對照，陰性對照加去離子水）；④分裝到0.2 mLPCR管后加入反轉(zhuǎn)錄液；⑤上機(jī)進(jìn)行RT-PCR反應(yīng)；⑥分析結(jié)果。

1.3 統(tǒng)計學(xué)分析。維吾爾族和漢族膽囊結(jié)石患者膽囊收縮功能的比較采用卡方檢驗，維吾爾族和漢族膽囊結(jié)石患者CCK-A受體mRNA表達(dá)和蛋白表達(dá)水平采用t檢驗，以α＝0.05作為檢驗水準(zhǔn)，全部資料均采用SPSS 17.0統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行分析。

2 結(jié)果

維吾爾族、漢族膽囊結(jié)石患者的CK-AR mRNA的表達(dá)水平低于非膽囊結(jié)石組（P＜0.05）。維、漢族膽囊收縮功能“減弱”組的CCK-AR mRNA的表達(dá)水平均低于維、漢族收縮功能“正常”組（P＜0.05），維吾爾族結(jié)石患者膽囊壁CCK-AR mRNA表達(dá)明顯低于漢族膽囊結(jié)石患者（P＜0.05），見表1。

表1 各組CCK—ARmRNA的表達(dá)情況

3 討論

膽囊是人體最重要的器官之一，其內(nèi)貯存的膽汁主要是進(jìn)行消化和免疫，一些不良的生活習(xí)慣、感染、肥胖等都會導(dǎo)致形成膽囊結(jié)石[4-6]。最近幾年，這種病癥出現(xiàn)的概率越來越高，在40以后的居民中比較高發(fā)，因此醫(yī)療界對膽囊結(jié)石的治療比較重視。目前最常見的治療膽囊結(jié)石的方法有兩種：其一是傳統(tǒng)手術(shù)，其二是取石保膽手術(shù)[7-9]。第一種方式就是把膽囊摘除，但是由于膽囊的重要性，所以一旦把膽囊拆除則會出現(xiàn)各種并發(fā)癥，更會增加各種癌癥的風(fēng)險。由于這種器官還具有一定的免疫能力，所以一旦把膽囊摘除，則會對病人的免疫系統(tǒng)造成影響。隨著科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，對膽囊結(jié)石病癥進(jìn)行治療的新型方式開始出現(xiàn)，確保在不摘除膽囊的同時把結(jié)石取出，大大降低了并發(fā)癥，實現(xiàn)病人生活水平的提升，對膽囊收縮進(jìn)行促進(jìn)的生理激素之一是CCK，CCK- A受體與膽囊結(jié)石形成有關(guān)，CCK-A受體基因水平在不同地區(qū)和不同人群表達(dá)不甚相同。維吾爾族和漢族是新疆兩大主要民族，除了種族不同外，兩個民族在社會文化、生活方式上存在差異，在膽囊結(jié)石發(fā)生的流行病學(xué)上也有不同的特點。通過分析維吾爾族與漢族之間CCK- AR mRNA的表達(dá)可知，兩個民族之間表達(dá)存在差異，與膽囊結(jié)石發(fā)生差異有關(guān)，表達(dá)的下降與膽囊收縮功能降低也存在關(guān)聯(lián)性，膽囊收縮功能的下降會增加膽囊結(jié)石的發(fā)生率?；颊逤CK-A mRNA的表達(dá)達(dá)到一定水平，膽囊的收縮功能較好，可以根據(jù)此來制定個體預(yù)防和個性化的治療措施[10-11]。

綜上所述，維吾爾族膽囊結(jié)石患者膽囊壁CCK-AR mRNA表達(dá)的下調(diào)與膽囊收縮功能、排空功能有關(guān)，起著重要的作用，值得臨床深入研究。