杜慶偉,袁敏,梁瑞雪
(1.山東中醫(yī)藥大學(xué),山東 濟(jì)南 250355;2.山東省中醫(yī)藥研究院,山東 濟(jì)南 250014)
慢性前列腺炎(CP)是臨床上比較難治愈的慢性疾病之一,多發(fā)于青壯年男性,其患病率高,治愈率低,據(jù)國(guó)內(nèi)文獻(xiàn)報(bào)道其發(fā)病率為6.0%~32.9%[1-2]。目前,西藥對(duì)該病的治療多使用抗生素、物理療法等,療效不佳,且易于復(fù)發(fā)。而中醫(yī)藥治療慢性前列腺炎遵循辨證論治的原則,優(yōu)勢(shì)明顯,目前已經(jīng)成為臨床上治療的重要方法[3]。
淋必通顆粒的組方是臨床專家多年使用的臨床經(jīng)驗(yàn)方,由經(jīng)典方五味消毒飲、滋腎通關(guān)丸及程氏萆薢消毒飲化裁而來(lái)。該組方由蒲公英、益母草等十味中藥材組成,全方具有消炎抗菌、清熱利濕、散結(jié)通淋之功效,用于治療慢性前列腺炎引起的各種癥狀,療效顯著[4]。本研究前期已對(duì)該處方的提取工藝進(jìn)行了優(yōu)化,確定了穩(wěn)定可行的提取工藝[5]。在此基礎(chǔ)之上,本文采用星點(diǎn)設(shè)計(jì)-效應(yīng)面法優(yōu)選淋必通顆粒的成型工藝,為該復(fù)方制劑的工業(yè)化生產(chǎn)提供理論參考。
十萬(wàn)分之一電子天平(METTLER TOLEDO,型號(hào):MS105);萬(wàn)分之一電子天平(舜宇恒平儀器,型號(hào):AE224C);DHG-9076型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱(上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司);粉體綜合特性測(cè)試儀(成都精美新粉體測(cè)試設(shè)備有限公司,型號(hào):JL-A3型);14目尼龍篩;1號(hào)及5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)篩。
糊精、可溶性淀粉、乳糖、甘露醇(天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司);制劑中所用中藥材(山東百味堂中藥飲片有限公司);所用試劑乙醇、水等均為分析純。
稱取相當(dāng)于成人一日處方量20倍藥材共約2.24 kg,按照確定的提取工藝提取各味藥材,合并提取液,濃縮至相對(duì)密度為1.20~1.25(60 ℃),60 ℃下減壓干燥至干膏,然后粉碎,過(guò)80目尼龍篩,置于干燥器內(nèi)備用。
精密稱取干膏粉及相應(yīng)比例的輔料,充分混勻,用適合濃度的乙醇溶液制軟材,過(guò)14目尼龍篩制粒,至60 ℃烘箱中常壓干燥3 h,整粒,即得。
2.3.1 成型率
依據(jù)2015版《中國(guó)藥典》[6]顆粒劑項(xiàng)下的有關(guān)規(guī)定,使用1號(hào)篩和5號(hào)篩進(jìn)行整粒,能通過(guò)1號(hào)篩且不能通過(guò)5號(hào)篩的為合格顆粒,計(jì)算合格顆粒的得率。
2.3.2 吸濕率
取約2 g顆粒,精密稱定,置干燥至恒重的稱量瓶?jī)?nèi),將稱量瓶敞口放于盛有NaCl過(guò)飽和溶液且已飽和48 h的干燥器內(nèi),密封,72 h后稱定重量,吸濕率=(吸濕后顆粒重量-吸濕前顆粒重量)/吸濕前顆粒重量 × 100%[7]。
2.3.3 休止角
使用粉體綜合特性測(cè)試儀進(jìn)行休止角測(cè)定,使顆粒自漏斗上方均勻流下,漏斗最低端距離測(cè)量盤的高度H為1 cm,顆粒流下所形成圓錐體的底面半徑為R,休止角α=arctan(H/R)[8]。
2.3.4 溶化性
依據(jù)2015年版《中國(guó)藥典》四部[9]通則顆粒劑項(xiàng)下有關(guān)規(guī)定,精密稱取10 g顆粒,置于盛有200 mL熱水的燒杯內(nèi),玻璃棒攪拌,記錄全部溶化時(shí)間。
2.3.5 指標(biāo)分析
以成型率、休止角、吸濕率、溶化性為考察指標(biāo),考察上述4個(gè)不同的因素對(duì)淋必通顆粒成型工藝的影響,采用總評(píng)歸一值(OD值)作為評(píng)價(jià)指標(biāo)[10]。對(duì)于越大越好的指標(biāo)(如成型率),dn=(Yn-Ymin) / (Ymax-Ymin) ;對(duì)于越小越好的指標(biāo)(例如吸濕率、休止角、溶化性),dn= (Ymax-Yn) /(Ymax-Ymin)。由此,
總評(píng) 歸一值 = (d1×d2×d3×d4)1/4,n=1,2,3,4。
表1 不同輔料的篩選結(jié)果Table 1 Screening results of different excipients
由表1可知,糊精作為輔料時(shí)成型率最高,吸濕率、溶化性、休止角均較好,且相比于乳糖和甘露醇,糊精的價(jià)格低廉,適用于工業(yè)化生產(chǎn),綜合考慮選用糊精作為輔料。
在預(yù)試驗(yàn)基礎(chǔ)上,選擇輔料用量(倍)、乙醇體積分?jǐn)?shù)(%)和乙醇每10.0 g干膏使用量作為考察因素,因素水平見表2。
表2 因素水平表Table 2 Factor levels
精密稱取干膏粉20份,每份約20 g,按照表2中因素水平進(jìn)行20次實(shí)驗(yàn),按2.2項(xiàng)下方法制備顆粒,試驗(yàn)結(jié)果見表3。
表3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果Table 3 Test design and results
續(xù)表3
對(duì)試驗(yàn)結(jié)果(表3),采用 Design-Expert 8.0.6 軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析,以O(shè)D值對(duì)3個(gè)因素進(jìn)行二次多項(xiàng)式非線性擬合。所得擬合方程為:
Y=129.6-35.03A-2.234B-4.073C-0.451 3AB-0.994 9AC+0.2612BC-0.316 3A2+1.331×10-3B2-1.524C2,
擬合相關(guān)系數(shù)r為0.958 8,失擬項(xiàng)的P>0.05,表明該模型方程擬合度良好[11]。由方差分析結(jié)果可知,模型中一次項(xiàng)因素A和二次項(xiàng)BC、C2對(duì)顆粒劑成型工藝的制備有極顯著性影響,一次項(xiàng)因素C和二次項(xiàng)AB有非常顯著性影響,其他因素影響不顯著。
表4 效應(yīng)面二次模型的方差分析Table 4 Variance analysis of quadratic model
圖1 效應(yīng)面曲線圖Fig.1 Response surface curve
為驗(yàn)證模型的可靠性,按照確定的成型工藝進(jìn)行驗(yàn)證性試驗(yàn),平行做3批,試驗(yàn)結(jié)果見表5。由表5可知,3次驗(yàn)證性試驗(yàn)的歸一均值為0.740 1,與預(yù)測(cè)值0.766 3的相對(duì)誤差為3.42%,表明模型預(yù)測(cè)性良好,成型工藝穩(wěn)定可行。
表5 驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果Table 5 Results of verification test
本試驗(yàn)運(yùn)用星點(diǎn)設(shè)計(jì)-效應(yīng)面優(yōu)化法優(yōu)選淋必通顆粒的成型工藝,采用Design-Expert 8.0.6軟件分別進(jìn)行了多元線性擬合、二次多項(xiàng)式非線性擬合及雙因素模型擬合。
所得多元線性擬合方程為:
總評(píng)歸一值=-1.858-1.010A+0.025 26B+0.156 3C,
相關(guān)系數(shù)r為0.372 2,失擬項(xiàng)P<0.01,擬合效果差,且各因素均不具有顯著性差異。
所得二次多項(xiàng)式擬合方程為:
總評(píng)歸一值=129.6-35.03A-2.234B-4.073C-0.451 3AB-0.994 9AC+0.2612BC-0.316 3A2+1.331×10-3B2-1.524C2,
擬合相關(guān)系數(shù)r為0.958 8,失擬項(xiàng)的P>0.05,表明該模型方程擬合度良好。
所得雙因素模型方程為:
總評(píng)歸一值=173.9-35.66A-1.994B-22.36C+0.451 3AB-0.994 9AC+0.261 3BC,
相關(guān)系數(shù)r為0.544 8,失擬項(xiàng)P<0.01,各因素也均不具有顯著性差異。經(jīng)三種模擬方程結(jié)果可知,二次多項(xiàng)式非線性擬合效果最好,預(yù)測(cè)性強(qiáng),歸一值的測(cè)得值接近于預(yù)測(cè)值,表明該模型方程適于本試驗(yàn)的結(jié)果分析,且成型工藝穩(wěn)定可靠,重復(fù)性良好,進(jìn)一步證實(shí)了該方法用于優(yōu)化淋必通顆粒成型工藝的可行性。
濕法制粒分為兩種:一是清膏和輔料直接混勻制粒;二是干膏與輔料混勻制粒。本研究根據(jù)預(yù)試驗(yàn)結(jié)果,前者需要加入3倍以上輔料,而后者只需要加入1倍左右輔料,可以明顯減少患者的服藥量,故本研究選用了將干膏與輔料相混勻進(jìn)行制粒。