孟秀娟,董海霞,張曼紅,甄愛華,劉建洋

( 山東紳聯(lián)藥業(yè)有限公司濟(jì)南分公司，山東 濟(jì)南 250101)

二甲氨基氯乙烷鹽酸是一種重要的精細(xì)化學(xué)品，用途極為廣泛，用于有機(jī)合成、醫(yī)藥中間體。作為醫(yī)藥中間體，可用于合成促胃腸動力藥鹽酸伊托必利[1-2]，二甲氨基氯乙烷鹽酸與4-羥基二苯甲酮反應(yīng)生產(chǎn)抗乳腺癌藥枸櫞酸托瑞米芬[3]，2-吡啶基苯基甲基甲醇與二甲氨基氯乙烷鹽酸反應(yīng)生產(chǎn)琥珀酸多西拉敏[4]，等等。國家藥審中心審評五部凌霄曾報道[5]，起始原料、關(guān)鍵原料的合理控制，可以最大限度地降低可能引入的雜質(zhì)，質(zhì)量研究存在問題最突出的是有關(guān)物質(zhì)。醫(yī)藥中間體的有關(guān)物質(zhì)檢查是一項(xiàng)非常重要的質(zhì)量控制指標(biāo)，而二甲氨基氯乙烷鹽酸的有關(guān)物質(zhì)研究目前鮮有報道，本文對二甲氨基氯乙烷鹽酸的有關(guān)物質(zhì)檢查方法進(jìn)行系統(tǒng)的方法學(xué)驗(yàn)證，證明了所用的有關(guān)物質(zhì)檢測方法確實(shí)有效地檢出二甲氨基氯乙烷鹽酸的有關(guān)物質(zhì)。

1 儀器與試劑

1.1 儀器

電子天平 Quintix 125D-1CN(賽多利斯)，Waters e2695高效液相色譜儀(配二極管陣列、紫外檢測器)。

1.2 試劑

二甲氨基氯乙烷鹽酸(濟(jì)南健豐化工有限公司，批號：20190715)；乙腈(ASTOON，色譜純，批號：A19T1008，A19T1115)；乙酸銨(默克，分析純，批號：A0963116636)。

2 方法與結(jié)果

2.1 方法

2.1.1 色譜條件

用親水硅膠為填充劑(Waters XBridge HILIC 4.6mm×250mm，5μm)；流動相為10mM乙酸銨-乙腈(15∶85)；流速為每分鐘0.8mL；柱溫30℃；檢測波長為205nm。

2.1.2 溶液配制

溶劑配制量取0.01mol/L乙酸銨(稱取乙酸銨0.77g，加入1000mL水，溶解)150mL和乙腈850mL，混合均勻。

供試品溶液：取二甲氨基氯乙烷鹽酸約50mg，精密稱定，置25mL量瓶中，加溶劑溶解并稀釋至刻度，制成每1mL中約含二甲氨基氯乙烷2.0mg的溶液，臨用現(xiàn)制。

對照溶液：精密量取供試品溶液1mL，置100mL量瓶中，加溶劑稀釋至刻度，搖勻，制成每1mL中約含二甲氨基氯乙烷鹽酸0.02mg的溶液。

2.2 結(jié)果

2.2.1 專屬性

2.2.1.1 空白干擾試驗(yàn)

精密量取空白溶劑、對照溶液和供試品溶液各20μL，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖，空白溶劑不干擾本品有關(guān)物質(zhì)的檢查。

2.2.1.2 強(qiáng)制降解試驗(yàn)

按照“2.1.2”項(xiàng)下供試品溶液的配置濃度，分別按要求配置酸破壞供試品溶液、堿破壞供試品溶液、氧化破壞供試品溶液、高溫破壞供試品溶液、光照破壞溶液，進(jìn)行測定，結(jié)果見表1。

表1 強(qiáng)制降解試驗(yàn)結(jié)果

試驗(yàn)結(jié)果表明，本品在氧化條件下雜質(zhì)個數(shù)及雜質(zhì)含量增加明顯，說明本品在氧化條件下有明顯的降解，其他降解條件下均較穩(wěn)定；在DAD作檢測的條件下，本品經(jīng)酸、堿、氧化、高溫、光照降解試驗(yàn)，主峰的純度角均小于純度閾值，表明主峰內(nèi)不包含降解產(chǎn)物峰，各個降解條件下峰純度符合要求，主峰與降解產(chǎn)物峰的分離度以及各降解雜質(zhì)峰間的分離度均符合要求，表明本品有關(guān)物質(zhì)檢查方法專屬性良好。

2.2.1.3 檢測限與定量限

精密稱取二甲氨基氯乙烷鹽酸適量，加溶劑溶解并稀釋至信噪比約為10∶1，作為定量限溶液，連續(xù)進(jìn)樣6針；精密稱取二甲氨基氯乙烷鹽酸適量，加溶劑溶解并稀釋至信噪比約為3∶1，作為檢測限溶液，連續(xù)進(jìn)樣3針，分別精密量取各20μL，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，結(jié)果見表2。

表2 定量限與檢測限試驗(yàn)結(jié)果

由試驗(yàn)結(jié)果可知，定量限溶液連續(xù)進(jìn)樣6次，信噪比平均值為10，表明在本色譜條件下二甲氨基氯乙烷鹽酸的定量限為0.03μg。檢測限溶液連續(xù)進(jìn)樣3次，信噪比平均值為3，表明該在本色譜條件下二甲氨基氯乙烷鹽酸的檢測限為0.02μg。

2.2.1.4 線性與范圍

按照“2.1”項(xiàng)下分析方法進(jìn)行測定，記錄色譜圖。以峰面積(A)對濃度(C)進(jìn)行線性回歸。結(jié)果見表3。

表3 線性關(guān)系試驗(yàn)結(jié)果

結(jié)果表明，二甲氨基氯乙烷鹽酸在8.00μg/mL～28.00μg/mL，其濃度與峰面積成良好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)為0.997。

2.2.1.5 系統(tǒng)精密度試驗(yàn)

精密量取對照溶液20μL，注入液相色譜儀，連續(xù)進(jìn)樣6次，記錄色譜圖，結(jié)果見表4。

表4 系統(tǒng)精密度試驗(yàn)結(jié)果

結(jié)果表明，連續(xù)進(jìn)樣6針，二甲氨基氯乙烷鹽酸保留時間的RSD為0.05%，主峰峰面積的RSD為2.30%，表明本品有關(guān)物質(zhì)檢查方法的系統(tǒng)精密度良好。

2.2.1.6 中間精密度試驗(yàn)

由不同人員在不同時間、不同儀器，分別進(jìn)行重復(fù)性試驗(yàn)，按自身對照法進(jìn)行計算，不同人員在不同時間、不同儀器上檢出的雜質(zhì)個數(shù)一致。

2.2.1.7 耐用性試驗(yàn)

為考察本方法對條件發(fā)生微小變化的耐受程度，分別調(diào)節(jié)流速為0.7與0.9 mL·min-1、柱溫25℃與35℃、波長204與206nm、乙酸銨濃度0.0095與0.0105 mol·L-1、流動相比例乙酸銨-乙腈(14-86)與(16-84)進(jìn)行考察，分別精密量取對照溶液、供試品溶液20μL，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。試驗(yàn)結(jié)果表明雜質(zhì)個數(shù)和雜質(zhì)含量基本一致，本方法耐用性良好。

2.2.1.8 本品有關(guān)物質(zhì)測定

取本品3批，按照“2.1.2”項(xiàng)下供試品配制方法，按照“2.1.1”項(xiàng)下進(jìn)行測定，結(jié)果見表5。

表5 二甲氨基氯乙烷鹽酸有關(guān)物質(zhì)測定結(jié)果

結(jié)果表明，3批二甲氨基氯乙烷鹽酸有關(guān)物質(zhì)檢測結(jié)果均符合要求。

3 討論

目前文獻(xiàn)鮮有報道二甲氨基氯乙烷鹽酸的有關(guān)物質(zhì)檢測，本文從醫(yī)藥中間體質(zhì)量控制的實(shí)際需求出發(fā)，建立了高效液相色譜法測定二甲氨基氯乙烷鹽酸有關(guān)物質(zhì)的方法，通過方法學(xué)試驗(yàn)，驗(yàn)證表明該方法可用于二甲氨基氯乙烷鹽酸有關(guān)物質(zhì)檢查，為本品質(zhì)量控制奠定了基礎(chǔ)。