于哲，張洛英，潘大歡，王靜

鄭州頤和醫(yī)院婦產(chǎn)科，鄭州 450018

子宮內(nèi)膜癌（endometrial carcinoma，EC）是女性常見(jiàn)的三大惡性腫瘤之一，是發(fā)生于子宮內(nèi)膜的一組上皮性惡性腫瘤[1]。部分極早期EC患者癥狀隱匿，一旦出現(xiàn)癥狀多表現(xiàn)為陰道膿性分泌物、不規(guī)則陰道出血、陣發(fā)性下腹疼痛及腹部包塊，晚期患者因腫瘤組織擴(kuò)散和浸潤(rùn)，可出現(xiàn)下肢水腫疼痛、多器官衰竭、繼發(fā)性貧血、惡病質(zhì)、發(fā)熱等，最終導(dǎo)致患者死亡[2]。目前關(guān)于EC發(fā)生和發(fā)展的機(jī)制尚不清楚，但相關(guān)研究顯示，血小板增多癥是腫瘤的不良預(yù)后因素[3]。血小板計(jì)數(shù)（platelet count，PLT）、血小板分布寬度（platelet distribution width，PDW）、平均血小板體積（mean platelet volume，MPV）及 血小 板 壓積（platelet hematocrit，PCT）是公認(rèn)的血小板參數(shù)，對(duì)評(píng)價(jià)機(jī)體內(nèi)血小板性能、炎癥反應(yīng)及腫瘤疾病具有重要意義，隨著血小板檢測(cè)儀器的不斷改進(jìn)，其對(duì)于EC患者病情發(fā)展及預(yù)后的指導(dǎo)意義也引起了廣泛關(guān)注[4]。此外，T淋巴瘤侵襲轉(zhuǎn)移誘導(dǎo)因子1（T lymphoma invasion and metastasis inducing factor 1，TIAM1）是新發(fā)現(xiàn)的腫瘤轉(zhuǎn)移促進(jìn)基因之一，具有活化Rho樣蛋白酶的功能，被國(guó)內(nèi)外許多學(xué)者證實(shí)可在多種腫瘤細(xì)胞系中表達(dá)，與腫瘤細(xì)胞的浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移有著密切關(guān)系[5]。本研究通過(guò)分析EC患者中血小板參數(shù)及TIAM1的表達(dá)情況，旨在為預(yù)測(cè)EC患者的病情發(fā)展及預(yù)后提供依據(jù)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象

選取2015年12月至2018年12月鄭州頤和醫(yī)院收治的EC患者。納入標(biāo)準(zhǔn)：①經(jīng)病理學(xué)檢查確診為EC[6]；②近1個(gè)月內(nèi)未服用過(guò)影響血小板或凝血功能的藥物。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并其他臟器惡性腫瘤；②合并免疫系統(tǒng)、血液系統(tǒng)及代謝系統(tǒng)疾?。虎酆喜⒕窦膊』虬V呆等無(wú)法配合研究的疾??；④合并感染性疾病或慢性炎癥；⑤未進(jìn)行化療或放療。依據(jù)納入和排除標(biāo)準(zhǔn)，本研究共納入100例EC患者，作為EC組。選取同期接受子宮內(nèi)膜活檢且結(jié)果正常者106例，作為對(duì)照組。EC組患者的年齡為26～70歲，平均年齡為（57.98±3.61）歲；已絕經(jīng)68例，未絕經(jīng)32例；平均分娩次數(shù)為（1.97±0.13）次。對(duì)照組的年齡為25～72歲，平均年齡為（58.51±3.55）歲；已絕經(jīng)69例，未絕經(jīng)37例；平均分娩次數(shù)為（1.99±0.11）次。兩組研究對(duì)象的年齡、絕經(jīng)情況、分娩次數(shù)比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，所有研究對(duì)象及家屬均對(duì)本研究知情并簽署知情同意書(shū)。

1.2 觀察指標(biāo)及評(píng)價(jià)方法

抽取兩組研究對(duì)象的外周靜脈血5 ml，采用全自動(dòng)五分類(lèi)血液分析儀XS-500i檢測(cè)血小板參數(shù)，包括PLT、PDW、MPV及PCT。鉗取兩組研究對(duì)象的宮頸組織，經(jīng)10%甲醛溶液固定后常規(guī)石蠟包埋，制成4 μm厚切片用于免疫組織化學(xué)染色。TIAM1鼠抗人單克隆抗體購(gòu)自美國(guó)Santa Cruz公司，免疫組織化學(xué)檢測(cè)試劑盒購(gòu)自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司，嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。TIAM1陽(yáng)性表達(dá)主要定位于細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)中，呈棕黃色或棕褐色顆粒。根據(jù)染色強(qiáng)度評(píng)分：無(wú)色為0分，淡黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分。根據(jù)陽(yáng)性細(xì)胞百分比評(píng)分：≤5%為0分，6%～25%為1分，26%～50%為2分，51%～75%為3分，＞75%為4分。染色強(qiáng)度評(píng)分與陽(yáng)性細(xì)胞百分比評(píng)分相乘，0分為（-），1～4分為（+），5～8分為（++），9～12分為（+++），其中“-”為陰性，“+”為弱陽(yáng)性，“++”為中等陽(yáng)性，“+++”為強(qiáng)陽(yáng)性。比較兩組研究對(duì)象中TIAM1蛋白的表達(dá)情況及不同臨床分期的EC患者中TIAM1蛋白的表達(dá)情況。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS 18.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以例數(shù)和率（%）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組研究對(duì)象血小板參數(shù)的比較

EC組患者的PLT、PDW、MPV、PCT水平均明顯高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。（表1）

表1 兩組研究對(duì)象血小板參數(shù)的比較（±s）

表1 兩組研究對(duì)象血小板參數(shù)的比較（±s）

組別E C組（n=1 0 0）對(duì)照組（n=1 0 6）t值P值2 7 9.2 3±3 6.1 1 2 1 5.4 5±3 2.3 7 1 3.3 6 4 0.0 0 1 1 7.9 6±1.4 5 1 0.7 1±1.3 2 3 7.5 6 0 0.0 0 1 1 2.3 6±1.1 3 8.1 1±1.0 5 2 7.9 8 1 0.0 0 1 0.3 5±0.1 7 0.2 2±0.0 9 6.9 1 4 0.0 0 1 P L T（×1 0 9/L）P D W（%）M P V（f l）P C T（%）

2.2 兩組研究對(duì)象中TIAM1表達(dá)情況的比較

EC組患者中TIAM1的陽(yáng)性表達(dá)率為94.0%（94/100），明顯高于對(duì)照組的6.6%（7/106），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=157.271，P＜0.01）。（表2）

2.3 不同臨床分期EC患者血小板參數(shù)的比較

100例EC患者中，Ⅰ～Ⅱ期58例，Ⅲ～Ⅳ期42例。Ⅰ～Ⅱ期EC患者的PLT、PDW、MPV、PCT水平均低于Ⅲ～Ⅳ期患者，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。（表3）

表3 不同臨床分期EC患者血小板參數(shù)的比較（±s）

表3 不同臨床分期EC患者血小板參數(shù)的比較（±s）

臨床分期Ⅰ～Ⅱ期（n=5 8）Ⅲ～Ⅳ期（n=4 2）t值P值2 3 3.1 1±3 2.2 5 2 8 2.3 1±3 5.6 5 7.2 0 3 0.0 0 1 1 6.8 7±1.3 3 1 8.9 1±1.4 5 7.2 8 8 0.0 0 1 1 1.5 3±1.2 1 1 3.8 7±1.3 9 8.9 6 4 0.0 0 1 0.3 1±0.1 3 0.3 9±0.1 8 2.5 8 2 0.0 1 1 P L T（×1 0 9/L）P D W（%）M P V（f l）P C T（%）

2.4 不同臨床分期EC患者中TIAM1表達(dá)情況的比較

Ⅰ～Ⅱ期EC患者中TIAM1的中等-強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)率為68.97%（40/58），明顯低于Ⅲ～Ⅳ期患者的92.86%（39/42），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=8.382，P＜0.01）。（表 4）

表4 不同臨床分期EC患者中TIAM1的表達(dá)情況

3 討論

EC是僅次于卵巢癌及宮頸癌的一類(lèi)具有極高發(fā)病率和病死率的惡性腫瘤，其發(fā)病率在世界范圍內(nèi)呈逐漸上升趨勢(shì)。EC可分為彌漫性和局限性兩類(lèi)，主要的危害是晚期病變對(duì)膀胱、腎臟等器官造成的影響，可導(dǎo)致患者不孕，重癥者甚至出現(xiàn)全身衰竭，危及生命[7]。目前的研究認(rèn)為腫瘤分期及肌層浸潤(rùn)深度是EC患者預(yù)后的主要影響因素，早期診斷作為延緩病情發(fā)展的關(guān)鍵，可幫助臨床治療期間判斷具體的臨床分期及浸潤(rùn)程度[8]。部分EC患者缺乏特異性臨床表現(xiàn)，常用的B超無(wú)法發(fā)現(xiàn)早期小病灶，而磁共振成像（MRI）價(jià)格高昂，在人群中的接受度普遍較低，因此尋求一種無(wú)創(chuàng)、經(jīng)濟(jì)、準(zhǔn)確的指標(biāo)用以預(yù)測(cè)EC患者病情的發(fā)展程度顯得尤為重要[9-10]。

血小板與腫瘤轉(zhuǎn)移的關(guān)系是目前廣大學(xué)者普遍關(guān)注的問(wèn)題。在對(duì)腫瘤的研究中，趙國(guó)鋒等[11]研究發(fā)現(xiàn)，與健康人群相比，喉癌患者的PLT、MPV及PDW水平發(fā)生顯著變化，說(shuō)明血小板參數(shù)對(duì)喉癌的診斷具有一定的價(jià)值。本研究結(jié)果顯示，EC組患者的PLT、PDW、MPV、PCT水平均明顯高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），表明血小板參數(shù)在EC患者中也具有一定的診斷價(jià)值。研究顯示，晚期惡性腫瘤患者血小板參數(shù)異常與功能活化最為明顯，因此可采用相關(guān)藥物降低血小板的數(shù)量和活性，從而延緩腫瘤細(xì)胞的浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移[12]。本研究結(jié)果顯示Ⅰ～Ⅱ期EC患者的PLT、PDW、MPV、PCT水平均低于Ⅲ～Ⅳ期患者，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。EC患者中血小板參數(shù)異常的原因可能如下：①血小板與腫瘤細(xì)胞結(jié)合形成微血栓，削弱了血流與血管內(nèi)皮間的摩擦力對(duì)腫瘤組織的損傷，并分泌轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β以減輕自然殺傷細(xì)胞的活性，逃避免疫監(jiān)視；②血小板能夠促進(jìn)腫瘤組織的血管生成并保護(hù)血管免受炎癥損傷，以穩(wěn)定腫瘤細(xì)胞的繁殖環(huán)境[13-14]。

TIAM1是近年來(lái)發(fā)現(xiàn)的一種重要的腫瘤轉(zhuǎn)移促進(jìn)基因，最初在小鼠T淋巴瘤細(xì)胞高侵襲變異株中分離鑒定。相關(guān)研究顯示，正常情況下在女性體內(nèi)，TIAM1基因僅在腦部組織中呈現(xiàn)高表達(dá)，而在各種惡性腫瘤，如肝癌、大腸癌、膀胱癌、肺癌和淋巴瘤中，其表達(dá)水平顯著上升，且與腫瘤細(xì)胞的浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移程度具有密切關(guān)系[15]。研究表明，該現(xiàn)象出現(xiàn)的原因主要有3個(gè)方面：①TIAM1蛋白中的Dbl同源功能區(qū)可促進(jìn)鳥(niǎo)苷二磷酸（guanosine diphosphate，GDP）的釋放和鳥(niǎo)苷三磷酸（guanosine triphosphate，GTP）的結(jié)合，進(jìn)而誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移，并且TIAM1蛋白還能促進(jìn)腫瘤細(xì)胞運(yùn)動(dòng)形成細(xì)胞膜褶皺；②TIAM1能夠調(diào)節(jié)細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)，促進(jìn)片足和絲狀偽足的產(chǎn)生，進(jìn)而誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞發(fā)生轉(zhuǎn)移；③TIAM1與多種在腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移中發(fā)揮重要作用的信號(hào)分子之間有密切關(guān)系[16]。本研究結(jié)果顯示，EC組患者中TIAM1的陽(yáng)性表達(dá)率為94.0%，明顯高于對(duì)照組的6.6%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。表明TIAM1的表達(dá)情況與EC密切相關(guān)，其在EC的診斷中具有一定價(jià)值。而在不同臨床分期的EC患者中，Ⅰ～Ⅱ期患者的TIAM1中等-強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)率為68.97%，明顯低于Ⅲ～Ⅳ期患者的92.86%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。進(jìn)一步提示，EC的臨床分期越晚，TIAM1的表達(dá)越趨向于強(qiáng)陽(yáng)性。

綜上所述，EC患者中血小板參數(shù)PLT、PDW、MPV、PCT水平較高，TIAM1在EC組織中的陽(yáng)性表達(dá)率較高，血小板參數(shù)與TIAM1可作為預(yù)測(cè)EC發(fā)生與發(fā)展的新指標(biāo)，對(duì)協(xié)助病情評(píng)估及預(yù)后判斷具有一定價(jià)值。