吳鳳明 王 輝 高曉磊 韓明寶

（1.天津市廣源畜禽養(yǎng)殖有限公司，天津 301800；2.瑞普（保定）生物藥業(yè)有限公司，河北保定 071000；3.天津瑞普生物技術股份有限公司，天津 300308）

傳染性喉氣管炎是由傳染性喉氣管炎?。╥nfectious laryngotracheitis virus，ILTV）引起的一種急性接觸性呼吸道雞的傳染病[1]，該病毒屬于皰疹病毒科，A型皰疹病毒屬，具有皰疹病毒潛伏感染特性[2]。該病1925年第一次發(fā)生于美國洛島，主要導致雞的死亡和產(chǎn)蛋量下降，目前已蔓延至全球各地，給養(yǎng)雞業(yè)造成很大的損失。該病發(fā)病率接近100%，死亡率10%～40%，產(chǎn)蛋雞群感染后產(chǎn)蛋下降可達35%，甚至完全停產(chǎn)。我國于1959年在貴州省貴陽市首次發(fā)現(xiàn) ILT，1992年首次分離到病毒。1992年以后該病在我國一些地區(qū)呈地方性流行，給我國的養(yǎng)雞業(yè)造成了很大損失。近年隨著ILTV弱毒疫苗的廣泛使用，使得該病得到一定控制。由于弱毒疫苗存在毒力返強的風險，從而導致免疫雞群和非免疫雞群一樣存在感染隱患。目前尚不清楚溫和型是否就是由疫苗毒毒力返強所導致的[3-4]，但疫苗毒和野毒都可以造成病毒的潛伏感染，病雞康復后長期帶毒和排毒會成為主要傳染源，給雞傳染性喉氣管炎的防控帶來了極大的困難[5-7]。因基因疫苗比傳統(tǒng)苗具有很多優(yōu)勢，王曉麗等[8]隨著分子生物學和基因工程的發(fā)展，使基因工程疫苗的研制日益受到重視。孫新峰[9]與之研制有關的質粒、啟動子、增強子、內(nèi)含子和免疫佐劑等的選擇多個目的基因插入同一載體后是否互相干擾以及經(jīng)不同方式接種后引起的免疫機理和效果等進一步加深了對基因工程疫苗的研究[10]，基因疫苗優(yōu)點是：生產(chǎn)工藝簡單、易于大量生產(chǎn)、造價低廉，不易變質、質量可控、免疫期長，運輸和儲存方便。且其表達產(chǎn)物雖然分子量較小，但由于在宿主細胞內(nèi)部，可刺激免疫系統(tǒng)即產(chǎn)生細胞免疫又產(chǎn)生體液免疫，免疫效果與弱毒活疫苗差不多，易于做成多聯(lián)苗，發(fā)展前景良好[11]。

目前該病防治的疫苗多為常規(guī)疫苗，但是存在諸多不足。為了解決這些問題和保障畜禽養(yǎng)殖業(yè)健康發(fā)展，瑞普生物依據(jù)哈爾濱獸醫(yī)研究所研制的“雞傳染性喉氣管炎重組雞痘病毒基因工程疫苗”進行糖基化，使疫苗在7日齡，甚至1日齡即可進行免疫，達到早期預防傳染性喉氣管炎的目的，從而滿足現(xiàn)今養(yǎng)殖預防傳喉疾病的需要。瑞普生物從SPF雞、蛋雞等不同品種、不同日齡采用不同免疫方法進行傳染性喉氣管炎攻毒試驗，小日齡頸部皮下注射對于雞傳染性喉氣管炎有很好的保護率。具體試驗如下：

1 試驗材料

1.1 疫苗

侯豆平--雞傳染性喉氣管炎重組雞痘病毒基因工程苗

1.2 試驗動物

1日齡SPF雞、1日齡蛋雞、7日齡蛋雞

2試驗方法

1日齡SPF雞40只，1日齡蛋雞35只、 7日齡蛋雞35 只。每個日齡雞只均隨機分成4組，均是1組頸部皮下注射0.1ml（1羽份）喉痘疫苗，1組翼下刺種喉痘疫苗1 羽份，1組陽性（攻毒）對照、1組陰性（空白）對照。

免疫28日后，連同條件相同的1日齡 SPF 雞 30 只、1日齡蛋雞30只、7日齡蛋雞30只，分別喉囊內(nèi)接種傳染性喉氣管炎流行株病毒0.4ml。具體分組情況和處理情況見表1、2、3，觀察 10日或20日齡，對所有雞只進行稱重、發(fā)病情況進行統(tǒng)計分析。

1日齡SPF雞傳喉攻毒保護試驗雞分組與試驗方法

1日齡蛋雞傳喉攻毒保護試驗雞分組與試驗方法

7日齡蛋雞傳喉攻毒保護試驗雞分組與試驗方法

3 試驗結果

3.1 SPF雞1日齡不同免疫途徑傳喉攻毒對比試驗結果

分組 只數(shù) 免疫日齡死亡數(shù) 保護率28d 39d 增重攻毒日齡攻毒前后體重g 發(fā)病數(shù)試驗1組 10 1 29 216.11 359.28 143.17 1 0 9/10試驗2組 10 1 29 203.55 336.13 132.58 2 0 8/10攻毒對照組 10 1 29 243.97 349.45 105.48 10 2 --空白對照組 10 -- -- 234.60 387.62 153.02 0 0 --

3.2 1日齡蛋雞不同免疫途徑傳喉攻毒對比試驗結果

攻毒前后體重g發(fā)病數(shù)死亡數(shù)保護率30d 50d 增重試驗1組 10 1 30 190.0 530.6 340.6 1 0 9/10試驗2組 10 1 30 201.0 493.2 292.2 2 1 8/10攻毒對照組 10 -- 30 261.7 527.9 266.2 9 1 --空白對照組 5 -- --255.0 559.0 304.0 0 0 --分組 只數(shù) 免疫日齡攻毒日齡

3.3 7日齡蛋雞不同免疫途徑傳喉攻毒對比試驗結果

攻毒前后體重g發(fā)病數(shù)死亡數(shù)保護率35d 55d 增重試驗1組 10 7 35 275.0 608.8 333.8 1 0 9/10試驗2組 10 7 35 264.0 572.3 308.3 2 0 8/10攻毒對照組 10 -- 35 310.8 602.7 291.9 10 0 --空白對照組 5 -- -- 299.0 649.0 350.0 0 0 --分組 只數(shù) 免疫日齡攻毒日齡

4 試驗結論

從以上3次試驗可以看出，1日齡和7日齡免疫侯豆平，均對傳染性喉氣管炎有很好的保護效果；同時在遼寧、福建、山西等地區(qū)田間實際使用情況來看，1日齡頸部皮下注射或10日齡刺種侯豆平后傳染性喉氣管炎均得到有效控制。

通過實驗室攻毒實驗和田間實際使用來看，對于高發(fā)地區(qū)且早日齡發(fā)生傳染性喉氣管炎的雞只完全可以在1日齡或7日齡頸部皮下注射（8～10日齡也可以翼膜刺種）進行首免，從而更好的避免早期發(fā)生傳染性喉氣管炎。

5 侯豆平使用注意事項

本品僅用于接種健康雞。體質瘦弱、接種過雞痘疫苗或自然感染過雞痘病毒 的雞不能使用，否則影響免疫效果。

接種疫苗后3～4日，刺種部位出現(xiàn)輕微紅腫，偶有結痂，14日恢復正常。

使用前應仔細檢查，如發(fā)現(xiàn)疫苗瓶破裂、無瓶簽、苗中混有雜質等，均不能使用。

疫苗應現(xiàn)用現(xiàn)配，稀釋后的疫苗限當日用完。

用過的器具應進行消毒。