王一鑫 賈淑琳 吳靜 王隨天 楊嘉裕 趙雅梅

【摘要】 目的 探討地榆洗劑冷濕敷對(duì)急性濕疹模型皮損組織降鈣素基因相關(guān)肽（CGRP）含量及組織炎癥的影響。方法 采取2， 4-二硝基氯苯法建立60只豚鼠急性濕疹模型， 根據(jù)用藥方案不同分為觀察組與對(duì)照組， 各30只。觀察組使用地榆洗劑冷濕敷治療， 對(duì)照組使用3%硼酸洗液濕敷。比較兩組的療效、皮損變化以及治療前后的炎性細(xì)胞計(jì)數(shù)變化、皮損組織CGRP含量變化。結(jié)果 觀察組治療總有效率為90.00%， 明顯高于對(duì)照組的66.67%， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。治療后， 觀察組紅斑、丘疹、表皮脫落、苔蘚化評(píng)分分別為（0.78±0.32）、（0.35±0.10）、（0.72±0.27）、（0.32±0.08）分， 明顯低于對(duì)照組的（1.75±0.39）、（1.67±0.41）、（1.42±0.33）、（1.50±0.27）分， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。治療后， 觀察組單核細(xì)胞計(jì)數(shù)、多形核細(xì)胞計(jì)數(shù)、淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)、嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)分別為（18.11±1.21）、（38.32±3.65）、（41.49±20.62）、（35.31±12.96）×109/L， 明顯低于對(duì)照組的（39.43±1.35）、（61.68±3.92）、（79.68±20.27）、（53.78±16.59）×109/L， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。治療后， 觀察組皮損組織CGRP含量為（141.36±9.87）ng/L， 對(duì)照組皮損組織CGRP含量為（197.28±10.37）ng/L， 兩組皮損組織CGRP含量均較治療前降低且觀察組低于對(duì)照組， 差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 地榆洗劑冷濕敷對(duì)急性濕疹模型有良好的治療效果， 能有效減輕皮損癥狀， 抑制皮損內(nèi)炎癥反應(yīng)， 提高皮損內(nèi)CGRP含量， 具有積極的臨床意義。

【關(guān)鍵詞】 急性濕疹模型;地榆洗劑;冷濕敷;皮損組織降鈣素基因相關(guān)肽含量;組織炎癥

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2020.21.092

濕疹是一種常見皮膚病， 其發(fā)病機(jī)制尚未明確， 發(fā)病與生活環(huán)境、遺傳、自身免疫、工作壓力等密切相關(guān)， 常反復(fù)發(fā)作， 較難治愈。急性濕疹皮損特點(diǎn)為明顯紅斑、不同程度水腫、丘疹、水皰、糜爛、滲出， 常以數(shù)種形態(tài)同時(shí)存在[1]。中醫(yī)認(rèn)為， 本病的發(fā)病有內(nèi)因、外因兩方面， 外感風(fēng)、濕、熱、毒等邪氣， 內(nèi)由稟賦不足、臟腑功能失衡， 內(nèi)外合邪導(dǎo)致發(fā)病。由于濕邪是發(fā)病的首要病因， 因此， 治療的關(guān)鍵在于祛濕。根據(jù)外用藥物使用原則， 西醫(yī)在急性濕疹的外治方面， 皮損滲出明顯的最常用硼酸洗液濕敷， 用藥相對(duì)局限， 紅斑、丘疹為主的可外用糖皮質(zhì)激素軟膏等。臨床研究顯示[2]， 炎癥反應(yīng)在本病的發(fā)生發(fā)展過程中有重要作用， 對(duì)病情的進(jìn)展其促進(jìn)作用。CGRP是一種感覺神經(jīng)元釋放肽類物質(zhì)， 有顯著抗炎效果， 能夠抑制T淋巴細(xì)胞的增殖， 并抑制炎性因子的釋放， 調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)[3]。本研究選用豚鼠急性濕疹模型， 給予地榆洗劑冷濕敷， 分析對(duì)皮損組織CGRP含量及組織炎癥的影響， 以此評(píng)估療效， 現(xiàn)具體匯報(bào)如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 采取2， 4-二硝基氯苯法建立60只豚鼠急性濕疹模型， 根據(jù)用藥方案不同分為觀察組與對(duì)照組， 各30只。觀察組雌雄比1∶1， 體重250～350 g;對(duì)照組雌雄比1∶1， 體重250～350 g。所有豚鼠均由動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供， 實(shí)驗(yàn)過程中嚴(yán)格遵守動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的3 R原則。

1. 2 方法

1. 2. 1 動(dòng)物模型建立方法 將60只豚鼠在實(shí)驗(yàn)前1天在腹部剃毛， 大小約2.5 cm×2.5 cm， 涂抹5%的2， 4-二硝基氯苯溶液50 μl， 第2天再?gòu)?qiáng)化涂抹1次， 第3天在右耳背部剪毛， 并涂抹5%的2， 4-二硝基氯苯溶液10 μl， 之后每隔3 d激發(fā)1次， 共激發(fā)4次， 使耳部皮膚出現(xiàn)彌漫性水腫性紅斑、伴散在丘疹， 有鱗屑、血痂等形成， 視為急性濕疹造模成功[4]。

1. 2. 2 治療方法 兩組均于末次激發(fā)1 d后進(jìn)行給藥治療， 連續(xù)治療20 d后處死豚鼠。對(duì)照組使用3%硼酸洗液濕敷， 30 min/次， 2 次/d。觀察組使用地榆洗劑， 藥物組成：地榆、馬齒覓、苦參、黃柏各30 g， 煎煮后濃縮備用， 用藥前用蒸餾水稀釋成3%濃度后用無菌紗布浸濕濕敷皮損處， 用膠帶固定， 冷濕敷30 min/次，?2 次/d。在停藥24 h內(nèi)用頸椎脫臼法處死豚鼠， 剪下右耳， 檢測(cè)各項(xiàng)指標(biāo)。

1. 3 觀察指標(biāo)及判定標(biāo)準(zhǔn) ①根據(jù)皮損評(píng)分減分率判斷療效：臨床痊愈：皮損完全消失， 皮損積分減分率≥95%;顯效：皮損大部分消失， 皮損積分減分率70%～94%;有效：皮損小部分消失， 皮損積分減分率40%～69%;無效：皮損無明顯改善， 皮損積分減分率<40%[5]?？傆行?（臨床痊愈+顯效+有效）/總例數(shù)×100%。②采用濕疹面積及嚴(yán)重度指數(shù)皮損評(píng)分法評(píng)估癥狀變化， 包括紅斑、丘疹、表皮脫落和苔蘚化4項(xiàng)， 每項(xiàng)0～3分， 共4個(gè)等級(jí)， 0分為無癥狀， 1分為輕度， 2分為中度， 3分為重度[6]。③測(cè)定皮損組織中炎癥因子水平， 取耳中部組織塊， 石蠟包埋切片， 常規(guī)蘇木素-伊紅染色， 在顯微鏡下用微尺以單盲法計(jì)算每平方毫米單核細(xì)胞計(jì)數(shù)、多形核細(xì)胞計(jì)數(shù)、淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)、嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)， 取平均值[7]。④測(cè)定皮損組織中CGRP含量， 取耳中部組織塊， 按比例加入冷冰醋酸液， 在100℃水浴中煮10 min， 之后制成勻漿， 離心后滴入酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）試劑盒， 使用酶標(biāo)儀測(cè)定。

1. 4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ x-±s）表示， 采用t檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2. 1 兩組臨床療效比較 觀察組治療總有效率為90.00%， 明顯高于對(duì)照組的66.67%， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表1。

2. 2 兩組治療前后皮損評(píng)分比較 治療前， 兩組紅斑、丘疹、表皮脫落、苔蘚化評(píng)分比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）;治療后， 觀察組紅斑、丘疹、表皮脫落、苔蘚化評(píng)分分別為（0.78±0.32）、（0.35±0.10）、（0.72±0.27）、（0.32±0.08）分， 明顯低于對(duì)照組的（1.75±0.39）、（1.67±0.41）、（1.42±0.33）、（1.50±0.27）分， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表2。

2. 3 兩組治療前后組織炎癥反應(yīng)比較 治療前， 兩組單核細(xì)胞計(jì)數(shù)、多形核細(xì)胞計(jì)數(shù)、淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)、嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）;治療后， 觀察組單核細(xì)胞計(jì)數(shù)、多形核細(xì)胞計(jì)數(shù)、淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)、嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)分別為（18.11±1.21）、（38.32±3.65）、（41.49±20.62）、（35.31±12.96）×109/L，?明顯低于對(duì)照組的（39.43±1.35）、（61.68±3.92）、（79.68±20.27）、（53.78±16.59）×109/L， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表3。

2. 4 兩組治療前后皮損組織CGRP含量比較 治療前， 兩組皮損組織CGRP含量比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）;治療后， 觀察組皮損組織CGRP含量為（141.36±9.87）ng/L， 對(duì)照組皮損組織CGRP含量為（197.28±10.37）ng/L， 兩組皮損組織CGRP含量均較治療前降低且觀察組低于對(duì)照組， 差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表4。

3 討論

中醫(yī)并無急性濕疹病名， 一般將其歸為“濕瘡”、“浸淫瘡”等范疇， 由素體稟賦不耐， 又感受濕熱外邪， 兩邪相搏于肌膚， 導(dǎo)致肌膚氣血不和、腠理不舒， 患處皮膚紅腫熱痛， 發(fā)為本病。又因濕性重濁黏滯， 若未得到及時(shí)治療， 可使病情纏綿不愈， 反復(fù)發(fā)作， 較難治愈[7， 8]。因此， 本病的主要病因病機(jī)為濕熱外侵， 治療當(dāng)以清熱利濕為主。

遵循中醫(yī)的“外治之理， 即內(nèi)治之理， 外治之藥， 即內(nèi)治之藥?！钡睦碚?， 本研究選用地榆洗劑進(jìn)行局部治療， 使用冷濕敷的方法， 增強(qiáng)清熱之力[9]。方中以地榆為君藥， 具有涼血止血、殺菌消炎、止痛止癢之效;現(xiàn)代藥理顯示， 其內(nèi)含有草酸鈣， 經(jīng)高溫煎煮后可形成可溶性鈣鹽， 抑制毛細(xì)血管滲出， 同時(shí)還含有鞣質(zhì)， 能在皮損表面形成保護(hù)膜， 促進(jìn)炎癥的吸收， 避免外界環(huán)境的影響， 加快皮損修復(fù)和愈合[10]。苦參、黃柏為臣藥， 能增強(qiáng)清熱解毒、燥濕止癢之力， 具有良好的消炎殺菌效果， 苦參堿能減少過敏介質(zhì)的釋放， 抑制皮膚的過敏反應(yīng)并減輕皮損處炎癥反應(yīng);馬齒覓為佐藥， 能清熱、解毒、消腫， 也有良好的抗菌消炎效果， 能抑制毛細(xì)血管通透性， 減少炎性滲出。全方共奏清熱、利濕、祛風(fēng)、止癢、消腫等功效。

西醫(yī)理論認(rèn)為本病是由體內(nèi)外激發(fā)因子引發(fā)的皮膚變態(tài)反應(yīng)。機(jī)體接觸過敏原后， 記憶T淋巴細(xì)胞促使機(jī)體發(fā)生致敏反應(yīng)， 當(dāng)再次接觸過敏源后， 毒性的記憶T淋巴細(xì)胞從體內(nèi)游走到體表， 導(dǎo)致皮膚局部發(fā)生炎癥反應(yīng)[11]。同時(shí)T淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)其他細(xì)胞發(fā)生炎癥反應(yīng)， 促使肥大細(xì)胞的增生分化。在多種炎癥細(xì)胞的作用下， 毛細(xì)血管擴(kuò)張， 局部發(fā)生紅腫熱痛和滲出。

CGRP在體內(nèi)廣泛存在， T淋巴細(xì)胞上存在CGRP受體， CGRP能增加細(xì)胞內(nèi)CAMP水平， 抑制自然殺傷細(xì)胞的活性， 同時(shí)可調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞對(duì)激活因子的反應(yīng)， 還可傳遞抗原， 具有潛在的免疫調(diào)控作用。臨床研究顯示[12]， 濕疹患者體內(nèi)的CGRP水平明顯低于健康人， 疾病加重期更低， 而疾病緩解期有所升高。這說明CGRP與機(jī)體炎癥反應(yīng)呈反比， 能夠抑制炎癥反應(yīng)， 調(diào)節(jié)機(jī)體免疫。

本研究結(jié)果顯示， 觀察組治療總有效率為90.00%，?明顯高于對(duì)照組的66.67%， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。

治療后， 觀察組紅斑、丘疹、表皮脫落、苔蘚化評(píng)分明顯低于對(duì)照組， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。觀察組單核細(xì)胞計(jì)數(shù)、多形核細(xì)胞計(jì)數(shù)、淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)、嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)明顯低于對(duì)照組， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。兩組皮損組織CGRP含量均較治療前降低且觀察組低于對(duì)照組， 差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。充分證明地榆洗劑冷濕敷對(duì)急性濕疹模型有確切的治療作用， 顯著降低了炎癥反應(yīng)程度， 升高了皮損組織CGRP含量。

綜上所述， 地榆洗劑冷濕敷對(duì)急性濕疹模型皮損組織CGRP含量及組織炎癥有積極的影響， 通過抑制炎癥、調(diào)節(jié)免疫達(dá)到提升療效、緩解癥狀的目的， 值得在臨床推廣使用。

參考文獻(xiàn)

[1] 劉貞富. 皮膚性病診斷與治療. 湖北：湖北科學(xué)技術(shù)出版社， 2016：89.

[2] 劉丹， 趙梓綱， 焦?jié)升垼?等. 慢性濕疹小鼠模型的建立. 軍事醫(yī)學(xué)， 2011， 35（4）：290-292.

[3] 田靜， 李忻紅， 朱卉雯， 等. 健脾養(yǎng)血祛風(fēng)方對(duì)脾虛慢性濕疹模型小鼠皮膚組織水通道蛋白3的影響. 中國(guó)中醫(yī)藥信息雜志， 2015， 22（7）：47-50.

[4] 樊薔薇. 他克莫司軟膏治療皮炎濕疹的療效及對(duì)外周血Th1、Th2細(xì)胞因子水平的影響. 醫(yī)學(xué)綜述， 2016， 12（3）：596-599.

[5] 周光， 尹斌. 華佗麻藥加減方對(duì)豚鼠局限性濕疹樣模型皮損及組織形態(tài)學(xué)的影響. 中藥新藥與臨床藥理， 2011， 22（3）：292-295.

[6] 高彥煒， 王貴濤， 錢中央， 等. 復(fù)方氟米松軟膏聯(lián)合鹽酸西替利嗪片治療慢性濕疹的臨床療效觀察. 中國(guó)醫(yī)院用藥評(píng)價(jià)與分析， 2013， 13（7）：644-646.

[7] 張玲， 林素財(cái)， 鄭永平， 等. 膚悅康洗劑對(duì)豚鼠急性濕疹模型皮損的病理學(xué)影響. 河南中醫(yī)， 2017， 37（10）：1738-1740.

[8] 張慶田， 賀迎霞， 趙敏， 等. 鹽酸西替利嗪片聯(lián)合溫經(jīng)燥濕湯對(duì)急性濕疹患者美膚效果及炎性因子影響的研究. 中國(guó)美容醫(yī)學(xué)， 2019， 28（2）：70-73.

[9] 肖美芳， 林樟萍， 陸喆， 等. 降鈣素相關(guān)基因肽在小鼠巨噬細(xì)胞炎癥調(diào)控中的作用研究. 中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志， 2019， 29（13）：

18-24.

[10] 朱卉雯， 田靜， 李忻紅， 等. 健脾養(yǎng)血祛風(fēng)方對(duì)慢性濕疹小鼠模型趨化因子CCL17和CCL18的影響. 中國(guó)皮膚性病學(xué)雜志， 2017， 31（2）：1364-1367.

[11] 馮常青. 清熱止癢湯對(duì)慢性濕疹模型小鼠皮損療效及炎癥反應(yīng)影響. 遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)， 2017， 19（5）：53-56.

[12] 唐蘇為， 謝韶瓊， 汪青良， 等. 中藥內(nèi)服外用治療急性濕疹療效觀察. 中國(guó)中醫(yī)急癥， 2015， 24（5）：884-886.

[收稿日期：2020-02-24]