李國(guó)龍，李微

（中國(guó)藥科大學(xué)藥學(xué)院藥物化學(xué)系，江蘇 南京 211198）

肥胖是威脅人類健康的危險(xiǎn)因素之一，可引起糖尿病、心血管疾病及血脂異常等多種嚴(yán)重的疾病。進(jìn)入21 世紀(jì)以來，隨著世界上超重和肥胖人口比例的不斷攀升，肥胖的預(yù)防、控制和治療已經(jīng)成為各國(guó)醫(yī)療健康的研究重點(diǎn)。除了通過日常飲食控制和加強(qiáng)運(yùn)動(dòng)外，口服食欲抑制劑等減肥產(chǎn)品或藥物也是控制體質(zhì)量的有效途徑?；鸬貋啠℉oodia gordonii）是一類生長(zhǎng)在非洲南部沙漠地區(qū)的仙人掌類植物，作為一種天然的食欲抑制劑被當(dāng)?shù)赝林诼L(zhǎng)的狩獵過程中食用已有上千年歷史[1]，其功效和安全性都有所保障。實(shí)際上，火地亞提取物曾是風(fēng)靡西方國(guó)家的減肥藥，被認(rèn)為能夠用于治療超重、肥胖等相關(guān)疾病[2-6]。然而火地亞的產(chǎn)量不足與成分過于復(fù)雜等因素，限制了相關(guān)產(chǎn)品開發(fā)的后續(xù)進(jìn)展。研究表明，孕甾烷型皂苷是火地亞提取物的主要成分[7-12]，而其中的孕甾皂苷P57（1）則被認(rèn)為是抑制食欲的有效成份，作為候選藥物被研究多年[1,3,7]。2014年，Zhang 等[13]報(bào)道指出，從火地亞中分離得到的果同尼皂苷（gordonoside）F（2）也是食欲抑制的活性成分。果同尼皂苷F 與P57 結(jié)構(gòu)類似，具有相同的苷元hoodigogenin A（3）和相似的磁麻糖（cymarose）糖鏈，區(qū)別僅在于磁麻糖個(gè)數(shù)和末端糖基的不同。但令人感到意外的是，果同尼皂苷F作用的靶蛋白卻與P57 不同，提示火地亞食欲抑制活性存在著多種不同的機(jī)制[13]。由于火地亞中的皂苷種類繁多，且在植物體內(nèi)含量過低，依靠天然提取來進(jìn)行分離純化十分困難。為了明確火地亞仙人掌中皂苷類食欲抑制成分，以求得到相應(yīng)的藥物先導(dǎo)化合物，人們對(duì)P57 和果同尼皂苷F 進(jìn)行了相關(guān)的化學(xué)合成，以及開展了生物活性和作用機(jī)制方面的研究。本文就上述研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。

1 P57 的合成研究

1.1 Van Heerden 等利用氟代糖給體合成P57

P57 的苷元hoodigogenin A 具有少見的C/D 環(huán)順式結(jié)構(gòu)，在12 位和14 位都連有β-OH，且12-OH被惕格?；苌?；而其糖鏈由2 個(gè)酸敏感的高脫氧糖磁麻糖（cymarose）與1 個(gè)黃夾竹桃糖（thevetose）通過非熱力學(xué)穩(wěn)定的β-(1 →4)-糖苷鍵連接而成，合成有很大難度。類似的糖鏈結(jié)構(gòu)在多種天然藥物或活性化合物中都能找到，例如地高辛、洋地黃毒苷和杠柳苷periploside A 等。

1998年，Van Heerden 等[3]在一篇專利上報(bào)道了P57 的合成研究（見圖1）。他們首先通過微生物發(fā)酵的方法，利用鏈霉菌Alonectria decora（ATCC 14767）在黃體酮（4）上引入12β-OH 和15α-OH，得到關(guān)鍵中間體雙羥基黃體酮（5）。在經(jīng)2 步反應(yīng)消除15-OH 而得到Δ14,15-黃體酮（6）后，他們利用乙酰氯和乙酸酐反應(yīng)體系，成功地將3 位酮羰基烯醇化，從而構(gòu)建出5、6 位雙鍵，隨后用乙二醇保護(hù)所得雙乙?；孜锏?0 位酮羰基，以53%的產(chǎn)率得到甾體7。接下來，使用硼氫化鈉還原甾體7 上的3 位烯酯成醇，再與對(duì)甲苯磺酰氯反應(yīng)得到甾體8。以甾體8 為底物，利用乙酸鉀試劑構(gòu)建了三元環(huán)保護(hù)結(jié)構(gòu)，接著利用四氫鋁鋰脫去乙?；?，得到二醇甾體9。隨后，使用N-溴代乙酰胺和吡啶將14、15 位的雙鍵氧化成β構(gòu)型的環(huán)氧，然后經(jīng)四氫鋁鋰區(qū)域選擇性開環(huán)，以達(dá)到在14 位引入β-OH的目的。然而，在接下來用鹽酸脫除20 位縮酮保護(hù)基的時(shí)候，Van Heerden 等發(fā)現(xiàn)17 位乙?；臉?gòu)型發(fā)生了異構(gòu)化，只能以約15%的產(chǎn)率得到目標(biāo)產(chǎn)物10。盡管甾體10 的14-OH 和12-OH 的大位阻使得選擇性對(duì)3-OH 進(jìn)行糖苷化成為可能，然而Van Heerden 等利用氟代糖給體11 與甾體10 進(jìn)行氯化亞錫催化的糖苷化時(shí)，卻只能以15%的產(chǎn)率得到所需的糖苷12。再經(jīng)過苷元12-OH 的惕格酰化和磁麻糖4-O-苯甲?；拿摮玫交衔?3 后，他們將其與二糖給體14 進(jìn)行糖苷化，后續(xù)脫除保護(hù)基得到P57。這些后期步驟的具體實(shí)驗(yàn)條件和相應(yīng)的產(chǎn)率在專利中并未被明確報(bào)道。

圖1 Van Heerden 等報(bào)道的P57 合成路線Figure 1 Synthetic route of P57 reported by Van Heerden et al

1.2 Miesch 課題組合成苷元hoodigogenin

2011年，Miesch 課題組的Geoffroy 等[14]以孕甾烷衍生物15 為原料，經(jīng)11 步以0.04%的收率得到了P57 的苷元（見圖2）。首先，選擇性脫去甾體15 的3 位乙?；?，然后經(jīng)氧化得到二酮16。接下來，使用溴/乙酸條件在4 位引入溴后，所得溴化物在氯化鋰作用下可以轉(zhuǎn)化成α，β-不飽和酮17。利用與Van Heerden 等類似的策略，Geoffroy 等在成功地將3 位酮羰基烯醇化以構(gòu)建出5、6 位雙鍵后，選擇用乙二醇保護(hù)所得雙乙酰底物的20 位酮羰基，從而得到甾體18。接著他們先利用硼氫化鈉還原得到3α-OH，然后再用氫氧化鉀水解12 位乙?；玫界摅w二醇19。利用3β-OH 與12α-OH 的位阻差異，Geoffroy等首先成功地用乙?；x擇性地保護(hù)了3β-OH，然后用戴斯-馬丁試劑將裸露的12α-OH 氧化成羰基。以所得到的甾體20 為底物，課題組借助Norrish Type I-Prins 反應(yīng)在14 位引入β-OH 而得到甾體21，遺憾的是此關(guān)鍵步驟副產(chǎn)物較多，產(chǎn)率只有25%。最后在12 位引入惕格?；⒂幂^為溫和的碳酸鉀脫除3位乙酰基后，即可得到苷元hoodigogenin A。

圖2 Geoffroy 等報(bào)道的hoodigogenin A 合成路線Figure 2 Synthetic route of hoodigogenin A reported by Geoffroy et al

1.3 俞飚課題組基于金催化的糖苷化策略合成P57

2012年，俞飚課題組的Zhang 等[15]利用金催化的糖基鄰己炔基苯甲酸酯給體糖苷化方法完成了P57 的化學(xué)合成。常規(guī)的糖苷化反應(yīng)多使用強(qiáng)酸性催化劑，并且伴隨著親核性副產(chǎn)物生成，導(dǎo)致反應(yīng)效率不高，底物耐受性不好。而以一價(jià)金復(fù)合物為催化劑的糖苷化反應(yīng)具有條件中性溫和、無親核物種、產(chǎn)率高、實(shí)用性廣等優(yōu)點(diǎn)[16-22]。按照?qǐng)D3 所示的逆合成分析，鑒于P57 的糖苷鍵構(gòu)建的難度，該課題組將P57 逆向斷裂成糖苷22 和二糖鄰己炔基苯甲酸酯給體23。其中糖苷22 可進(jìn)一步逆向斷裂成苷元3 和單糖鄰己炔基苯甲酸酯給體24，給體22和23都可以從商業(yè)易得的原料葡萄糖轉(zhuǎn)化而得，而苷元3 則可以由洋地黃毒苷（25）獲得?，F(xiàn)就上述工作進(jìn)行詳細(xì)介紹。

1.3.1 苷元hoodigogenin A 的合成從Van Heerden和Geoffroy 等的工作中可以發(fā)現(xiàn)，對(duì)苷元14β-OH的引入存在著步驟過長(zhǎng)或者產(chǎn)率不佳等缺點(diǎn)，因此Zhang 等選擇具有12α，14β-OH 結(jié)構(gòu)的洋地黃毒苷（25）為原料來進(jìn)行苷元hoodigogenin A 的合成。如圖4 所示，他們依次通過選擇性乙?；⑻擎溗峤夂褪宥』交杌═BDPS）保護(hù)反應(yīng)得到甾體26，隨后用臭氧裂解和鋅粉/乙酸還原得到所期望的甲基酮27[23]。在完成20 位羰基的保護(hù)和3 位羥基的去保護(hù)以及氧化后，課題組利用雙（三甲基硅基）胺基鋰/三甲基氯硅烷/三乙胺條件，將底物28 的3 位羰基烯醇化，然后通過乙酸鈀氧化成功地以2 步79%的產(chǎn)率完成了4、5 位雙鍵的引入。所得產(chǎn)物29 可以在叔丁醇鉀存在的條件下再次發(fā)生烯醇化，促使雙鍵遷移到需要的5、6 位，然后再借助四氫鋁鋰還原烯醇，得到具有Δ5,6-3β-OH 結(jié)構(gòu)的產(chǎn)物30。值得注意的是，這個(gè)過程中的烯醇中間體對(duì)氧氣極為敏感，因此反應(yīng)需要在無氧環(huán)境中才能順利進(jìn)行。課題組通過3β-OH 的選擇性保護(hù)、惕格酸與12β-OH 的酯化反應(yīng)得到31，最后脫除相關(guān)保護(hù)基，合成得到了苷元hoodigogenin A。

圖3 Zhang 等對(duì)P57 的逆合成分析Figure 3 Retro-synthetic plan for P57 by Zhang et al

圖4 Zhang 等報(bào)道的hoodigogenin A 合成路線Figure 4 Synthetic route of hoodigogenin A reported by Zhang et al

1.3.2 糖基鄰己炔基苯甲酸酯給體的合成糖基給體24 的合成是以α-D-葡萄糖甲苷（32）作為原料進(jìn)行的[15]。經(jīng)過多步反應(yīng)得到磁麻糖甲苷（33）。隨后將4 位羥基乙?；缓笤?0%乙酸、加熱的條件下，水解甲苷得到相應(yīng)的半縮醛34，最后與鄰己炔基苯甲酸縮合成酯得到給體24（見圖5）。

圖5 磁麻糖鄰己炔基苯甲酸酯給體的合成Figure 5 Synthesis of cymarosyl o-hexynylbenzoate donor

在二糖給體23 的合成方面，Zhang 等[15]以雙丙酮-D-葡萄糖（35）作為原料。如圖6 所示，多步反應(yīng)后得到半縮醛36。隨后通過相應(yīng)的條件，分別制得了Schmidt 給體（37）和鄰己炔基苯甲酸酯給體（38）。然后，他們將Schmidt 給體與α-D-磁麻糖甲苷在三氟甲磺酸三甲基硅酯（TMSOTf）催化下進(jìn)行糖苷化反應(yīng)，以85%的總產(chǎn)率生成二糖39。盡管此反應(yīng)是在－40 ℃的低溫下進(jìn)行，卻能夠觀察到產(chǎn)物39 的異頭位甲氧基有顯著的異構(gòu)化現(xiàn)象，所得到的β-構(gòu)型比α-構(gòu)型更多。而將鄰己炔基苯甲酸酯給體38 應(yīng)用于此糖苷化時(shí)，在室溫下用三苯基膦金（Ⅰ）三氟甲磺酸鹽（Ph3PAuOTf）進(jìn)行催化，產(chǎn)物39 也同樣發(fā)生了異構(gòu)化。但是此條件更為溫和，所以導(dǎo)致的異構(gòu)化程度明顯小于Schmidt給體，所得到的α-構(gòu)型比β-構(gòu)型更多，產(chǎn)率也有一定提升。接下來，課題組將苯甲?；鎿Q為乙酰基，以確保在合成的最后能選擇性脫除而不影響12 位的惕格酸酯。隨后水解甲苷40，并與鄰己炔基苯甲酸反應(yīng)得到相應(yīng)的二糖給體23（見圖7）。

圖6 黃夾竹桃糖給體的合成Figure 6 Synthesis of thevetosyl donor

圖7 二糖給體23 的合成Figure 7 Synthesis of disaccharide donor 23

1.3.3 通過金催化糖苷化合成P57由于磁麻糖缺失2位羥基，因此無法利用經(jīng)典的鄰基參與來控制P57分子中糖苷鍵的β-構(gòu)型。以鄰己炔基苯甲酸酯為給體的金催化糖苷化，由于在反應(yīng)過程中存在一種相對(duì)穩(wěn)定的α-構(gòu)型中間體41（見圖8），因此有可能通過類SN2 反應(yīng)接受受體的進(jìn)攻而表現(xiàn)出β-選擇性[24-26]。如圖9 所示，Zhang 等以Ph3PAuOTf 為催化劑，二氯甲烷為溶劑，發(fā)現(xiàn)在室溫下hoodigogenin A 與鄰己炔基苯甲酸酯給體（24）的糖苷化的確表現(xiàn)出了良好的β-選擇性，所得產(chǎn)物的β-構(gòu)型/α-構(gòu)型為3.5∶1，以58%的產(chǎn)率得到糖苷42。隨后用弱堿碳酸鈉有效脫除糖苷42 非還原端的乙酰基，所得醇22 再與二糖給體23 在Ph3PAuOTf 促進(jìn)下完成糖苷化。遺憾的是此處并未表現(xiàn)出明顯的β-選擇性，所得產(chǎn)物的β-構(gòu)型/α-構(gòu)型為1∶1。最后他們選擇性脫除了43β的乙酰保護(hù)基制得糖苷P57。

圖8 具有β-選擇性的金催化糖苷化路徑Figure 8 Route of gold-catalyzed glycosylation with β-selectivity

圖9 通過金催化糖苷化合成P57Figure 9 Synthesis of P57 by gold-catalyzed glycosylation

1.3.4 通過三糖糖烯合成P57盡管上述路線利用金催化糖苷化策略通過20 步反應(yīng)合成了P57，但在最后的糖苷化中并沒有表現(xiàn)出β-選擇性，在很大程度上影響了合成效率。2018年，Liu 等[27]報(bào)道了利用三苯基膦氫溴酸鹽（TPHB）催化糖烯給體合成P57的方法，在最后的糖苷化中表現(xiàn)出了令人滿意的β-選擇性（β-構(gòu)型/α-構(gòu)型= 6∶1）。如圖10 所示，給體44 上的2 個(gè)大位阻TBDPS 能夠有效屏蔽糖環(huán)的α面，從而以高β-選擇性和高產(chǎn)率完成二糖45 的制備[28-30]。通過二丁基氧化錫對(duì)二糖45 的4'-位平伏羥基進(jìn)行芐基保護(hù)，所得化合物46 可以通過幾步反應(yīng)轉(zhuǎn)化成磁麻二糖47，隨后在三苯基膦金雙三氟甲磺酰亞胺（PPh3AuNTf2）催化下與黃夾竹桃糖鄰己炔基苯甲酸酯給體38 反應(yīng)，生成三糖48。接下來，該課題組使用溫和的吡啶甲酸銀試劑脫去異頭位的對(duì)甲氧基酚（MP）保護(hù)基，然后通過三氟甲磺酸酐/N，N-二異丙基乙胺條件（iPrNEt）消除異頭位羥基，得到三糖糖烯給體49。在關(guān)鍵的糖鏈與苷元hoodigogenin A 的拼接上，他們使用TPHB 在室溫下反應(yīng)18 h，以70%的總得率和較高的立體選擇性（β-構(gòu)型/α-構(gòu)型= 6∶1）完成骨架拼接。最后選擇性脫除50β乙?；俅瓮瓿闪薖57 的合成。

2 果同尼皂苷F 的合成研究

果同尼皂苷F 也是從火地亞中分離出的一種四糖皂苷[8]，與P57 有著相同的苷元hoodigogenin A。其糖鏈由一個(gè)D-齊墩果糖和3 個(gè)D-磁麻糖通過β-(1 →4)-糖苷鍵連接而成。2013年，馬玉勇[31]首次報(bào)道了果同尼皂苷F 的全合成。這一合成路線效率較高，能夠以克級(jí)規(guī)模合成目標(biāo)化合物，但最后的四糖片段和hoodigogenin A 的糖苷化立體構(gòu)型仍然難以控制。

圖10 通過三糖糖烯給體合成P57Figure 10 Synthesis of the P57 via trisaccharide glycal donor

2.1 三糖糖鏈的合成

果同尼皂苷F 的四糖糖鏈部分可通過磁麻糖三糖片段51（見圖11）和2-碘代齊墩果糖給體52（見圖12）通過糖苷化拼接而成。如圖11 所示，P57 合成路線中的中間體45 經(jīng)由原乙酸三甲酯保護(hù)和區(qū)域選擇性開環(huán)，可以實(shí)現(xiàn)對(duì)3 位直立羥基的選擇性乙?；?。所得化合物53 作為受體，可以順利地與TBDPS 位阻控制的炔酸給體44 在Ph3PAuOTf 的催化下進(jìn)行立體專一的β-選擇性糖苷化，以95%的高產(chǎn)率轉(zhuǎn)變成三糖54。隨后馬玉勇將TBDPS 保護(hù)基脫除得到55，然后經(jīng)由選擇性芐基保護(hù)、甲基化和芐基脫除得到三糖受體51。

圖11 三糖受體57 的合成Figure 11 Synthesis of trisaccharide acceptor 57

2.2 果同尼皂苷F 的合成

如圖12 所示，果同尼皂苷F 末端齊墩果糖的合成首先是以三乙酰葡萄糖糖烯（56）為原料，經(jīng)由8 步反應(yīng)制備成糖烯57。利用N-碘代丁二酰亞胺/乙酸條件，馬玉勇分別在糖烯的1 位和2 位引入乙酰氧基和碘原子，以54%的產(chǎn)率得到碘代物58。然后選擇性脫去異頭位乙?；c三氟乙酰亞胺氯反應(yīng)得到給體52。利用碘原子的鄰基參與作用，給體51 與三糖片段50 在叔丁基二甲硅基三氟甲磺酸酯（TBSOTf）作用下，以97%的高產(chǎn)率專一性地生成β-構(gòu)型的四糖59。接下來再用自由基還原脫除齊墩果糖殘基的2 位碘原子，用吡啶甲酸銀試劑脫除異頭位的MP 保護(hù)基，然后與鄰己炔基苯甲酸進(jìn)行縮合得到四糖給體60。最終苷元hoodigogenin A與四糖給體60 的糖苷化，依然是在Ph3PAuOTf 的催化下進(jìn)行，以高產(chǎn)率生成四糖皂苷61（β-構(gòu)型：50%，α-構(gòu)型：48%）。遺憾的是由于缺乏有力的β-構(gòu)型導(dǎo)向性基團(tuán)，此反應(yīng)幾乎沒有立體選擇性（β-構(gòu)型/α-構(gòu)型= 1∶1）。脫除61β末端的乙?；赐瓿闪斯嵩碥誇 的合成。

圖12 果同尼皂苷F 的合成Figure 12 Synthesis of Gordonoside F

3 P57 和果同尼皂苷F 的活性研究進(jìn)展

由于火地亞中的皂苷種類繁多，在植物體內(nèi)含量很低，分離純化十分困難，所以對(duì)其減肥活性的作用機(jī)制研究大都淺嘗輒止。其中P57 由于被發(fā)現(xiàn)較早，其作用機(jī)制研究相對(duì)較多，但是目前依然沒有統(tǒng)一的結(jié)論。MacLean 等[32]對(duì)大鼠下丘腦神經(jīng)元原代細(xì)胞給予P57 后，觀察到下丘腦神經(jīng)元中ATP含量升高50%～150%。在對(duì)大鼠腦第三腦室給藥后，他們發(fā)現(xiàn)大鼠24 h 內(nèi)食物攝入量下降40%～60%，從而推斷P57 可以增加下丘腦神經(jīng)元的ATP 含量，降低食欲，從而達(dá)到減肥的目的。Van Heerden 等[7]對(duì)大鼠灌胃給予P57（劑量為6.25～50 mg · kg-1），發(fā)現(xiàn)與對(duì)照組相比，接受P57 的大鼠其食物攝入量均明顯減少，體質(zhì)量亦減少。在與陽(yáng)性藥芬氟拉明（一種減肥藥）對(duì)比時(shí)發(fā)現(xiàn)，P57 能使大鼠食欲降低從而引起體質(zhì)量減少，而芬氟拉明隨著大鼠食物攝入量的減少卻能引起大鼠體質(zhì)量的增加，表明P57 在抑制食欲和減肥方面有著優(yōu)越性。該課題組認(rèn)為P57 抑制食欲可能和MacLean 等所報(bào)道的通過增加下丘腦神經(jīng)元的ATP 含量降低食欲相關(guān)。

Le Neve 等[33]報(bào)道，在人胚胎腎HEK 293 細(xì)胞中，P57 能夠選擇性地激活苦味受體TAS2R7 和TAS2R14 的異源表達(dá)，導(dǎo)致HEK 293 細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度增加，促使膽囊收縮素（CCK）分泌[34]，繼而通過迷走神經(jīng)傳入腸壁，產(chǎn)生飽腹感，從而發(fā)揮抑制食欲的作用[35-37]。當(dāng)將P57 的糖基或惕格?；摮?，則此活性喪失。因此該課題組認(rèn)為P57 能通過激活苦味受體的表達(dá)促進(jìn)CCK 分泌，進(jìn)而發(fā)揮抑制食欲的作用。Smith 等[38]報(bào)道，對(duì)Wistar 大鼠灌胃給予火地亞提取物（每克火地亞含有21.3 mg 的P57），發(fā)現(xiàn)大鼠的體質(zhì)量均明顯下降，其脂肪細(xì)胞和肌纖維細(xì)胞均變小。課題組認(rèn)為P57 是通過減少脂肪和肌肉從而達(dá)到減肥效果。而Tsoukalas 等[39]則報(bào)道對(duì)小腸內(nèi)分泌STC-1 細(xì)胞給予100 μmol · L-1的P57 后，細(xì)胞胰高血糖素樣肽-1（GLP-1）的分泌量升高130%。GLP-1 除了具有降糖作用之外，還可以增加飽腹感，減少食物的攝入量。因此課題組認(rèn)為P57 可通過增加GLP-1 的分泌來增加飽腹感，從而達(dá)到減肥目的。

GPR119 是一種與代謝密切相關(guān)的G 蛋白偶聯(lián)受體[40-41]，主要在胰島β 細(xì)胞和胃腸道L 細(xì)胞表達(dá)。GPR119 激動(dòng)劑通過增加細(xì)胞內(nèi)環(huán)磷酸腺苷（cAMP）的水平刺激葡萄糖依賴性的胰島素和GLP-1 的釋放，降低血糖水平和保護(hù)胰島β 細(xì)胞活力，能夠有效地改善患者體內(nèi)的血糖平衡。因此GPR119 可作為靶點(diǎn)用于發(fā)現(xiàn)具有減肥活性的藥物[42]。2014年，Zhang 等[13]對(duì)火地亞中的皂苷進(jìn)行篩選，發(fā)現(xiàn)只有果同尼皂苷F 可以特異性激活GPR119，而其他化合物包括P57 則不能激活GPR119。在穩(wěn)定表達(dá)GPR119 的HEK293 細(xì)胞中，果同尼皂苷F 能激活GPR119 介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，表現(xiàn)為cAMP 的積累、細(xì)胞內(nèi)鈣離子的活動(dòng)、ERK 的磷酸化與受體的脫敏和內(nèi)化。通過激活GPR19，果同尼皂苷F 能刺激胰島素和GLP-1 的分泌。而在GPR119 敲除小鼠離體胰島中，果同尼皂苷F 則喪失了刺激胰島素分泌的能力。在小鼠的食物攝入量實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，當(dāng)給小鼠灌胃給予果同尼皂苷F 200 mg · kg-1后，小鼠24 h食物攝入量顯著降低；而在敲除GPR119 的小鼠中，果同尼皂苷F 并不能降低24 h 內(nèi)食物攝入量。因此，課題組認(rèn)為果同尼皂苷F 能通過激活GPR119 刺激GLP-1 和胰島素的分泌，降低食欲，進(jìn)而達(dá)到減肥的效果。另一方面，敲除GPR119 會(huì)部分降低天然火地亞提取物的功效，說明GPR119 是火地亞提取物活性的重要靶點(diǎn)之一。

4 結(jié)語

盡管火地亞提取物曾是風(fēng)靡西方的減肥藥，但市場(chǎng)銷售的各類火地亞提取物產(chǎn)品成分復(fù)雜，P57含量很低，甚至根本不含有P57。通過化學(xué)合成P57及其同系物雖然不失為一個(gè)好辦法，但是該類化合物的復(fù)雜結(jié)構(gòu)在合成上具有很大的挑戰(zhàn)性。盡管目前已經(jīng)有方法來合成得到克級(jí)的化合物，但是依然存在著路線過長(zhǎng)、某些反應(yīng)不夠高效等缺點(diǎn)。特別是最后的糖苷化，由于底物缺失相關(guān)官能團(tuán)的調(diào)控，無法利用經(jīng)典的方法得到滿意的β-選擇性，顯著降低了整體合成路線的效率。盡管利用TBHP 促進(jìn)的三糖糖烯糖苷化可以達(dá)到不錯(cuò)的選擇性（β-構(gòu)型/α-構(gòu)型= 6∶1），但因糖烯制備效率欠佳、穩(wěn)定性不高等缺點(diǎn)，這一方法是否能夠應(yīng)用于此類化合物的大規(guī)模制備還有待確認(rèn)。此類高度酸敏感的脫氧糖β-選擇性糖苷化，依然有待開發(fā)一些新的合成策略，例如新型離去基、添加劑、調(diào)控基團(tuán)，甚至酶法合成來提升效率。

果同尼皂苷F 能通過激活GPR119 來抑制小鼠食欲，而P57 則不能激活GPR119，表明火地亞提取物是通過多種機(jī)制來共同達(dá)到顯著的食欲抑制效果，可能還存在其他的有效成分和未知的作用機(jī)制。對(duì)于這些機(jī)制的研究有希望為新型肥胖治療藥物的開發(fā)提供更為安全有效的新靶點(diǎn)。目前有限的構(gòu)效關(guān)系數(shù)據(jù)表明，這一家族化合物的糖鏈，特別是末端糖基對(duì)化合物的活性和作用機(jī)制有著非常重要的影響。因此在后續(xù)的類似物合成和優(yōu)化研究中，可以考慮從替換末端糖基和縮減糖鏈長(zhǎng)度這2 個(gè)方面出發(fā)，同時(shí)輔以簡(jiǎn)化苷元部分（例如對(duì)合成造成很大困擾的4、5 位雙鍵和14 位羥基），進(jìn)行更為系統(tǒng)的構(gòu)效關(guān)系研究。