趙寶祥，李華，張亞君，王雪輝，尹志永

秦皇島市第二醫(yī)院檢驗科，河北 秦皇島0666000

小細胞肺癌是肺癌中惡性程度最高的一類，具有病程進展快、易轉(zhuǎn)移、臨床預(yù)后差等特點[1]。目前，對小細胞肺癌患者盡早進行放療和化療能夠顯著改善患者的預(yù)后情況，因此對其早期診斷具有較為重要的臨床意義[2]。然而，在無創(chuàng)診斷中，影像學(xué)診斷對小細胞肺癌的診斷效果較差。研究指出，血清腫瘤標(biāo)志物在惡性腫瘤的診斷中靈敏度更高，具有費用低、創(chuàng)傷小等優(yōu)點，癌胚抗原（carcinoembryonic antigen，CEA）、神經(jīng)元特異性烯醇化酶（neuron specific enolase，NSE）、胃泌素釋放前體（pro-gastrinreleasing peptide，ProGRP）等都是臨床中常用的血清腫瘤標(biāo)志物[3-4]。本研究旨在通過對比分析，探究血清ProGRP、NSE和CEA水平在小細胞肺癌診斷中的應(yīng)用效果，并對臨床價值進行分析，現(xiàn)報道如下。

1 對象與方法

1.1 研究對象

選取2016年1月至2018年12月秦皇島市第二醫(yī)院收治的100例小細胞肺癌患者為研究對象。納入標(biāo)準(zhǔn)：①均經(jīng)病理學(xué)檢查，符合小細胞肺癌的診斷標(biāo)準(zhǔn)；②確診后未進行任何治療；③簽署治療研究知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①同時存在其他系統(tǒng)原發(fā)性惡性腫瘤或轉(zhuǎn)移瘤；②肝、腎功能不全；③無法配合完成所需檢查。100例小細胞肺癌患者中，男性82例，女性18例，平均年齡（61.27±6.52）歲，局限期51例，廣泛期49例。同時選取同期于秦皇島市第二醫(yī)院進行體檢的健康人100例作為對照，其中男性61例，女性39例，平均年齡（56.36±6.58）歲。兩組研究對象的年齡、性別比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會審批通過。

1.2 檢測方法

1.2.1 血清ProGRP、NSE和CEA的檢測方法 抽取小細胞肺癌患者開始治療前以及對照人群晨起空腹靜脈血5 ml，以4000 r/min低溫離心15 min，收集上層血清，于-20℃冰箱保存，待所有樣本收齊后進行統(tǒng)一檢測。其中，血清NSE和CEA采用德國羅氏公司全自動電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀進行檢測，血清需要在凍存后進行復(fù)融，采用美國BioTek公司通用酶標(biāo)儀進行檢測。參考正常值：ProGRP＜37.7 pg/ml、NSE＜16.3 ng/ml、CEA＜5.0 ng/ml。

1.2.2 免疫組織化學(xué)檢測方法[5]所有組織標(biāo)本首先使用福爾馬林進行固定，進行酒精、二甲苯脫水后石蠟包埋，5 mm切片連續(xù)切片6張。后取一張片進行蘇木精-伊紅（hematoxylin-eosin staining，HE）染色，作為病理學(xué)診斷依據(jù)。其余切片進行免疫組化染色，按照說明書進行，完成染色后由兩位病理科醫(yī)師進行視野觀察，隨機選取具有代表性的10個高倍視野，陽性標(biāo)記為棕黃色顆粒，出現(xiàn)棕黃色顆粒沉淀為陽性（+），未染成棕黃色為陰性（-），免疫組化Syn的標(biāo)記部位均位于細胞質(zhì)內(nèi)。

1.3 觀察指標(biāo)

①比較正常人群和小細胞肺癌患者血清腫瘤標(biāo)志物水平。②比較血清ProGRP、NSE和CEA單項檢測及三項聯(lián)合檢測對小細胞肺癌的診斷效能，以臨床病理學(xué)檢查為診斷金標(biāo)準(zhǔn)[6]，血清ProGRP、NSE和CEA以各項檢測參考值為標(biāo)準(zhǔn)，超過正常參考值的患者為陽性（+），其余為陰性（-），三項聯(lián)合檢測中任意一項為陽性（+）即為陽性（+），計算單項檢測和聯(lián)合檢測的靈敏度、特異度、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值、總符合率以及Kappa值。其中靈敏度=真陽性例數(shù)（/真陽性+假陰性）例數(shù)×100%，特異度=真陰性例數(shù)（/真陰性+假陽性）例數(shù)×100%，陽性預(yù)測值=真陽性例數(shù)（/真陽性+假陽性）例數(shù)×100%，陰性預(yù)測值=真陰性例數(shù)/（真陰性+假陰性）例數(shù)×100%。③比較小細胞肺癌免疫組化指標(biāo)Syn與血清ProGRP、NSE和CEA檢測的診斷情況。④分析比較局限期與廣泛期小細胞肺癌患者血清ProGRP、NSE和CEA水平。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 25.0軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，計數(shù)資料以例數(shù)及率（%）表示，組間比較采用χ2檢驗；計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組間比較采用t檢驗。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 健康人群和小細胞肺癌患者血清腫瘤標(biāo)志物水平的比較

小細胞肺癌患者的血清ProGRP、NSE和CEA水平均明顯高于健康人群，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）。（表1）

表1 健康人群和小細胞肺癌患者血清腫瘤標(biāo)志物水平的比較（±s）

表1 健康人群和小細胞肺癌患者血清腫瘤標(biāo)志物水平的比較（±s）

組別健康人群組（n=100）小細胞肺癌組（n=100）t值ProGRP（pg/ml）29.57±8.46 975.37±638.25 14.817 NSE（ng/ml）11.12±6.46 38.93±26.47 10.207 CEA（ng/ml）1.85±1.29 13.58±24.62 4.758P值0.0000.0000.000

2.2 血清ProGRP、NSE和CEA單項檢測及三項聯(lián)合檢測對小細胞肺癌的診斷效果

血清ProGRP和三項聯(lián)合檢測與實際檢查結(jié)果一致性較好（Kappa值=0.818、0.827），三項聯(lián)合檢測與實際檢測結(jié)果的總符合率最高，單項檢測中，血清ProGRP的診斷靈敏度和總符合率最高。（表2）

表2 血清ProGRP、NSE和CEA單項檢測及三項聯(lián)合檢測對小細胞肺癌的診斷效能

2.3 小細胞肺癌免疫組化指標(biāo)Syn與血清ProGRP、NSE和CEA檢測的診斷情況比較

以小細胞肺癌免疫組化Syn指標(biāo)為參照，分別比較血清ProGRP、NSE和CEA指標(biāo)的診斷效能。血清ProGRP檢測與免疫組化Syn的符合率和一致性最高（符合率=94.00%，Kappa值=0.938）。（表3）

表3 血清ProGRP、NSE和CEA檢測對小細胞肺癌的診斷結(jié)果與免疫組化指標(biāo)Syn結(jié)果的對照

2.4 局限期與廣泛期小細胞肺癌患者血清ProGRP、NSE和CEA水平的比較

廣泛期小細胞肺癌患者血清ProGRP和NSE水平均明顯高于局限期患者，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）；廣泛期和局限期小細胞肺癌患者血清CEA水平比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。（表4）

表4 局限期與廣泛期小細胞肺癌患者血清ProGRP、NSE和CEA水平的比較（±s）

表4 局限期與廣泛期小細胞肺癌患者血清ProGRP、NSE和CEA水平的比較（±s）

分期局限期（n=51）廣泛期（n=49）t值P值513.38±427.43 1146.26±737.62 5.275 0.000 25.68±15.63 42.24±36.41 2.976 0.004 13.81±23.27 13.14±27.72 0.131 0.896 ProGRP（pg/ml）NSE（ng/ml）CEA（ng/ml）

3 討論

隨著環(huán)境的惡化以及人們生活方式的改變，肺癌的發(fā)病率逐年升高，其中，小細胞肺癌占所有肺癌的比例也呈升高趨勢[7]。由于小細胞肺癌是肺癌中惡性程度最高的一類，使得對其進行早期診斷顯得尤為重要，而目前臨床對小細胞肺癌的主要診斷方法仍舊是病理學(xué)檢查，無創(chuàng)早期診斷中影像學(xué)診斷效果并不理想，找尋一種可靠的早期診斷方式是目前臨床中的研究重點[8-9]。在惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展中，腫瘤標(biāo)志物是腫瘤細胞在生長過程中，機體分泌出的具有一定特異性的物質(zhì)，與腫瘤的生長發(fā)育密切相關(guān)[10]。ProGRP、NSE和CEA都是臨床中應(yīng)用較多的腫瘤標(biāo)志物，但其在小細胞肺癌中的診斷價值具有一定的爭議[11]，本研究旨在通過對比分析，探究血清ProGRP、NSE和CEA檢測診斷小細胞肺癌的效果，并分析臨床價值。

本研究對比了健康人群和小細胞肺癌患者的ProGRP、NSE和CEA水平，結(jié)果顯示，小細胞肺癌患者的血清ProGRP、NSE和CEA水平均明顯高于健康人群，血清ProGRP、NSE和CEA是能夠反映小細胞肺癌患者機體內(nèi)腫瘤生長水平的指標(biāo)，具有基礎(chǔ)的診斷價值。對比病理檢查結(jié)果發(fā)現(xiàn)，血清ProGRP和三項聯(lián)合檢測與病理檢查結(jié)果一致性較好（Kappa=0.818、0.827），三項聯(lián)合檢測的診斷總符合率最高，單項檢測中，血清ProGRP的診斷靈敏度和總符合率最高；與免疫組化結(jié)果比較發(fā)現(xiàn)，血清ProGRP指標(biāo)與免疫組化指標(biāo)Syn結(jié)果效能接近（總符合率=94.00%，Kappa值=0.938）。同時研究發(fā)現(xiàn)，廣泛期小細胞肺癌患者血清ProGRP和NSE水平明顯高于局限期患者，提示血清ProGRP和NSE指標(biāo)對確定臨床分期具有一定的參考價值。

本研究中，血清ProGRP是診斷價值最高的一個腫瘤標(biāo)志物，其診斷小細胞肺癌的靈敏度和特異度均較高。既往研究也肯定了血清ProGRP檢測在小細胞肺癌診斷中的作用，胃泌素釋放肽（gastrin-releasing peptide，GRP）是參與腫瘤細胞生長的重要因子，其通過腫瘤細胞的自分泌或細胞間的旁分泌發(fā)揮作用，但既往研究發(fā)現(xiàn)，GRP的結(jié)構(gòu)較不穩(wěn)定，臨床中難以檢測其血清濃度[12-13]，但其前體ProGRP在血液中有穩(wěn)定結(jié)構(gòu)，能夠反映GRP的濃度，是一個有效的檢測指標(biāo)，同時研究證實，小細胞肺癌中，GRP發(fā)揮著重要作用[14]。NSE是神經(jīng)內(nèi)分泌起源腫瘤中重要的作用因子，其在小細胞肺癌中的表達顯著升高，也是既往臨床中具有一定應(yīng)用價值的檢測因子[15]。而CEA作為非特異性腫瘤標(biāo)志物，在多種腫瘤中的表達均有顯著升高，同時，其在其他類型肺癌中的檢測效果較好，但本研究發(fā)現(xiàn)，CEA對小細胞肺癌的診斷價值并不理想，這可能與其特異性有一定關(guān)系，與既往研究結(jié)果存在差異。

綜上所述，血清ProGRP、NSE的檢測效果優(yōu)于CEA檢測，三項指標(biāo)聯(lián)合檢測能提高對小細胞肺癌的診斷效能。血清ProGRP在小細胞肺癌診斷中的效能與免疫組化Syn結(jié)果的檢測效能一致，同時血清ProGRP、NSE的檢測對臨床分期具有一定診斷意義。