王竹軍，劉 潤

（安徽省安慶市桐城市畜牧獸醫(yī)局 231404）

本研究分別從兩個時期對遼寧絨山羊的皮膚切片組織形態(tài)水平和細胞分子水平進行了描述： 其一是四月份絨山羊羊毛的毛被生長特點； 其二是絨山羊羊毛在八月份的毛被特點及其生長規(guī)律。 通過以上研究，對遼寧絨山羊羊毛的年周期性變化規(guī)律進行分析和總結， 為闡明遼寧絨山羊常年長絨的機理提供理論依據(jù)。

1 實驗方法： Sacpic 染色法

取材：生理鹽水+4%多聚甲醛灌流后取材

固定：4%多聚甲醛灌流或10%～15%福爾馬林浸泡24～48h

脫水：取出固定好的組織塊，用蒸餾水清洗三遍；70%的酒精浸泡12h；80%的酒精浸泡12h；90%的酒精浸泡12h；5.95%的酒精浸泡12h；無水酒精Ⅰ浸泡15～30min，根據(jù)材料大小而定；無水酒精Ⅱ浸泡15～30min， 根據(jù)材料大小而定； 二甲苯Ⅰ浸泡15～30min；二甲苯Ⅱ浸泡15～30min。

浸蠟：3h

包埋

切片：每片5～7μm 厚。

撈片：45℃～50℃溫水中待蠟片展開后撈片。

烤片：60℃烤箱中烤片4h 以上。

脫片：二甲苯Ⅰ浸泡10min；二甲苯Ⅱ浸泡10min；無水酒精Ⅰ浸泡10min； 無水酒精Ⅱ浸泡10min；95%的酒精浸泡5min；90%的酒精浸泡3～5min；80%的酒精浸泡30s；70%的酒精浸泡30s；3%雙氧水10min。

蒸餾水洗3 遍。

2 評定方法

為了詳細描述生長期和休眠期毛囊的結構變化，我們對皮膚進行了連續(xù)橫切和縱切。 其中橫切片是為了比較皮膚不同深度以及不同毛囊周期階段的毛囊結構。 毛囊及毛纖維的結構特點如下：有黑色素沉積，形成髓鞘，在充分生長的毛纖維末端存在一種刷狀結構，刷狀結構的纖維脫落，形成內根鞘，外根鞘細胞扁平；并有成形的次級毛囊毛基質、上皮細胞。

根據(jù)毛囊活性的判定標準，研究皮膚切片時，分別統(tǒng)計靜止期和生長期的毛囊數(shù)量。 每個樣品制作橫切片約50 片，片厚7μm，每隔5 片選出一片進行染色，記錄5～10 個完整的毛囊群，為了確保實驗的準確性，需要增加初級毛囊的計數(shù)量。 初級毛囊位于毛囊群的中間位置，且擁有皮脂腺和立毛肌。 根據(jù)毛囊所處階段的不同，將其進行分類，分別計數(shù)生長期和靜止期的毛囊，然后分別計算初級毛囊和次級毛囊的活性率。 此外，根據(jù)毛纖維髓鞘的有無，統(tǒng)計各種毛囊類型的具有髓鞘的比例。

假定毛囊的活性狀態(tài)可以作為其是否處于絨毛生長期的標志，則這種分類方法可以將有活性的毛囊分為3 個時期：毛發(fā)生長期、短暫的預生長期、毛囊退化期。 相反，休眠的毛囊則處于靜止期，此外還包括一些處于退化期晚期和預生長期早期的毛囊，它們與靜止期毛囊是難于區(qū)分的。 上述結構特點可以作為毛囊活性的判斷標準。

3 結果與分析

第一， 初級毛囊在經(jīng)歷一個毛囊周期以后， 舊的毛囊不消失，而是萎縮變小，并殘留在初級毛囊的近表皮處，還與旁邊新生的初級毛囊包圍在同一結締組織鞘內并同時存在。 研究發(fā)現(xiàn)，在不同的月份，新舊毛囊的直徑之比在發(fā)生變化，如圖1 左上角為5 月份時的初級毛囊橫切片，箭頭所示為兩處初級毛囊的“新舊并存”現(xiàn)象，其中左側為中央初級毛囊，右側為側生初級毛囊，在圖上可觀察到舊的初級毛囊直徑要比新生的初級毛囊大很多；而圖1 右上角為11 月份時的初級毛囊橫切片，此時新生的初級毛囊已經(jīng)進入生長期，新舊初級毛囊的直徑幾乎相等。 在圖1 左下角可以看到兩處次級毛囊“合并”現(xiàn)象（次級毛囊的“合并”現(xiàn)象，是指2 個及2 個以上的次級毛囊，隨著不斷地向表皮層延伸，這些毛囊依次發(fā)生結締組織鞘、外根鞘、內根鞘的合并，最終在表皮開口處，2 個及2 個以上絨纖維被一個直徑較大的囊形物包裹，這個囊形物也由三層結構構成，分別是結締組織鞘、外根鞘、內根鞘），每處都是三個次級毛囊發(fā)生合并。

圖1 遼寧絨山羊近表皮層的初級毛囊和次級毛囊

第二，4 月份次級毛囊較少，8 月份次級毛囊較多。說明從四月份到八月份是初級毛囊的一個生長時期。

第三，在8 月份有的初級毛囊的內根鞘融合、崩解了，而內根鞘是使毛根牢固的植于毛囊內， 所以在八月份有的粗毛脫落了，絨毛大量生長。