高研芬 鄭淏 王斐

摘 要：目的：建立利用核殼型色譜柱和高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法快速測定環(huán)境水樣中克百威的分析方法。方法：水樣經(jīng)過0.45μm微孔濾膜過濾，采用核殼型Waters Cortecs C18色譜柱（100×2.1mm，2.7μm）分離，以甲醇-水（0.1%甲酸）為流動相，在加熱電噴霧電離源、正離子模式下，采用選擇反應(yīng)監(jiān)測模式采集數(shù)據(jù)。結(jié)果：在0.2～100μg/L的范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)>0.999。方法的檢出限為0.02μg/L。在2.0和20.0μg/L2個添加水平下，方法的回收率在84.9%～89.8%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差在1.3%～3.3%。結(jié)論：該方法簡單、快速、靈敏度高，適合于環(huán)境水樣中克百威的測定。

關(guān)鍵詞：克百威;核殼型填料;水樣;高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜

中圖分類號 X832文獻標(biāo)識碼 A文章編號 1007-7731（2020）14-0142-02

Abstract： Purpose：A rapid method for the determination of carbofuran inenvironmentalwaters using a core-shell column and high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry was established. Method：The water samples filtered with 0.45μ mmillipore filter were analyzed by core-shellWaters Cortecs C18 column （100×2.1mm， 2.7μm） using methanol and 0.1% （v/v） formic acid aqueous solution as mobile phases. The analytes were detected using a heated electrospary ionization （HESI） source under the SRM mode. Result： The calibration curve for carbofuran was linear in the range of 0.2～10.0μg/L， with correlation coefficient greater than 0.999. The limit of detection was 0.02μg/L.The recoveries ranged from 86.0% to 94.7% and the relative standarddeviations （ RSDs） ranged from 1.4% to 2.9% when spiked levels were at 2.0， and 20.0μg/L. Conclusion：This method can be applied to the determination of carbofuranin environmental water samples with the advantage of simplicity， rapidity， and high sensitivity.

Key words： Carbofuran; Core-shell stationary phase; Water samples; High performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry （LC-MS/MS）

克百威，也稱呋喃丹，是一種氨基甲酸酯農(nóng)藥，為高毒殺蟲劑，廣泛使用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中。據(jù)研究，25℃時克百威在水中溶解度為0.7g/L，溶解度較大，易污染土壤和水體，具有潛在的污染環(huán)境水體的可能。當(dāng)前，克百威的測定方法有氣相色譜法，液相色譜-柱后衍生法[1-2]、液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法[3-4]。由于克百威熱穩(wěn)定性差，遇高溫易分解，因此不宜用氣相色譜分析。液相色譜-柱后衍生法需要額外的衍生裝置，前處理過程也比較花費時間，精密度和準(zhǔn)確度都較差。而液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法具有定性準(zhǔn)確、靈敏度高的優(yōu)點，適合于水體中克百威的測定。

受到系統(tǒng)壓力的限制，高效液相色譜多使用直徑為5μm或3μm的全多孔硅膠填料，不能通過使用更小粒徑的填料進來一步提高柱效。而核殼型填料[5-6]具有特殊的結(jié)構(gòu)，由1個實心核和包裹實心核的多孔殼層組成。與全多孔硅膠相比，溶質(zhì)在核殼型固定相的擴散路徑更短，因而填料柱效更高，檢出限更低。

本研究建立了用直徑2.7μm的核殼型填料填充的色譜柱和高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜快速測定環(huán)境水樣中克百威的分析方法，優(yōu)化了固定相、流動相等參數(shù)，考察了方法的線性范圍、檢出限、精密度和準(zhǔn)確度。該方法具有簡單、快速、準(zhǔn)確的優(yōu)點，適合于分析環(huán)境水樣中的克百威。

1 材料與方法

1.1 儀器和試劑 Thermo TSQ Quantum Access高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀?？税偻ㄟ秽ぃ?biāo)準(zhǔn)貯備液：ρ=100μg/mL（農(nóng)業(yè)農(nóng)村部環(huán)境保護科研監(jiān)測所），貯備液于4℃以下冷藏密封避光保存;色譜純甲酸;色譜純甲醇;試驗用水為超純水;0.45μm孔徑的玻璃纖維濾膜。

1.2 儀器條件

1.2.1 色譜條件 液相色譜柱：Waters Cortecs C18column（100×2.1mm，2.7μm）;流動相：流動相A：甲酸溶液（1‰），流動相B：甲醇;流速：300μL/min;柱溫：35℃;進樣體積：5.0μL;梯度洗脫程序：5%B保持1min，2～6min線性增加到90%B，90%B保持1min。

1.2.2 質(zhì)譜條件 加熱電噴霧離子源（H-ESI）：正離子掃描;多反應(yīng)監(jiān)測（SRM）;噴霧電壓3000V;毛細管溫度320℃;蒸發(fā)器溫度300℃;鞘氣35arb;輔助氣5arb;碰撞氣1.5mTorr;掃描時間0.4s;管透鏡電壓86V;碰撞能量22V（123.2），6V（165.1）;克百威定性離子對為m/z222.1/123.2，定量離子對為222.1/165.1。

1.3 樣品采集和處理 用干凈磨口棕色玻璃瓶（100 mL）采集水樣，采樣瓶要完全注滿不留氣泡。調(diào)節(jié)其為中性，4℃以下冷藏避光保存，3d內(nèi)完成分析。待水樣恢復(fù)至室溫，過孔徑為0.45μm濾膜過濾，上機測定。

2 結(jié)果與分析

2.1 質(zhì)譜條件的優(yōu)化 對克百威標(biāo)準(zhǔn)品進行母離子掃描，確定母離子質(zhì)荷比（m/z）為221.1，優(yōu)化管透鏡電壓后繼續(xù)進行子離子掃描，根據(jù)特征離子的豐度確定子離子m/z分別165.1、123.2。對選定離子對的碰撞能量進行優(yōu)化，使質(zhì)譜性能達到最佳。

2.2 色譜條件優(yōu)化 首先，考察Kromasil Eternity-5-C18柱（10×2.1mm，5μm）、HypersilGOLDC18柱（10×2.1mm，3μm）和Waters Cortecs C18柱（10×2.1mm，2.7μm）3種色譜柱的性能。用這3種色譜柱分別分析了10μg/L克百威標(biāo)準(zhǔn)溶液，Waters Cortecs C18柱產(chǎn)生的色譜峰峰高最高、Hypersil GOLD C18柱次之、Kromasil Eternity-5-C18柱最低。原因是Waters Cortecs C18柱的填料的粒徑最小，更重要的是核殼填料的特殊結(jié)構(gòu)，極大地增強了色譜柱的柱效。色譜峰越高，方法的檢出限就越低，因此，選擇Waters Cortecs C18柱進行下一步的優(yōu)化。同時，優(yōu)化流動相?？疾霤H3OH-H2O、CH3OH-0.1% HCOOH、CH3OH-10mmol/L HCOONH4流動相體系對克百威色譜峰的影響。在CH3OH-0.1% HCOOH體系中，峰形對稱，峰高也明顯高于另外2個流動相體系。

2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線和檢出限 對0.2、2.0、5.0、10.0、20.0、100μg/L的標(biāo)準(zhǔn)系列進行測定，線性相關(guān)系數(shù)大于0.999。方法的檢出限按照公式MDL=t（n-1，0.99）×S計算，MDL是方法檢出限，t為統(tǒng)計值，S是n次平行測定的標(biāo)準(zhǔn)偏差。分別測定濃度為0.1μg/L的11份自制水樣，計算出克百威的檢出限是0.02μg/L。

2.4 精密度和回收率試驗 通過給地下水和地表水水樣中加入低、高2個濃度水平的標(biāo)準(zhǔn)溶液，考察方法的精密度和回收率，每份樣品測5次，結(jié)果如表1所示。由表1可知，該方法的精密度在1.3%～3.3%，準(zhǔn)確度在84.9%～89.8%。說明該方法適合于測定環(huán)境水樣中的克百威。

3 結(jié)論

本研究結(jié)果表明，利用核殼型色譜柱-高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法測定環(huán)境水樣中的克百威，具有簡單、快速、準(zhǔn)確的特點，適合于分析環(huán)境水樣中的克百威。

參考文獻

[1]高強，孫榕，高升成，等.高效液相色譜-柱后衍生法測定蔬菜中克百威農(nóng)藥殘留量的不確定度評定[J].現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技，2019，19（7）：101-107.

[2]王艷，葉一，方曉燕，等.高效液相色譜柱后衍生化法檢測蔬菜中涕滅威和克百威殘留的方法研究[J].農(nóng)業(yè)科學(xué)與管理，2009，30（9）：37-40.

[3]王東霞，郭偉，張建國.高效液相色譜質(zhì)譜法直接測定地下水中痕量克百威的研究[J].北京水務(wù)，2018（5）：32-34.

[4]陳曉紅，魯偉，宋志軍，等.液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法確證分析環(huán)境水樣中痕量克百威[J].理化檢驗-化學(xué)分冊，2018，54（9）：993-997.

[5]湯丹，曹東敏，譚蘭芳，等.基于核殼色譜技術(shù)的黃芪中8 種異黃酮活性成分的快速定量分析[J].中國中藥雜志，2019，44（7）：1410-1415.

[6]倪贊，張崇生，謝循策.亞3μm填料核殼色譜柱結(jié)合HPLC-DAD 法快速測定降壓類中成藥及保健食品中添加的34種化學(xué)藥物[J].藥物分析雜志，2019，39（5）：895-903.

（責(zé)編：張宏民）