郭成瑾 張麗榮 王喜剛

摘要：為探明肥料的種類對馬鈴薯黑痣病的影響，采用田間調查、平板計數、Biolog-ECO微平板培養(yǎng)等方法，研究不同肥料對馬鈴薯黑痣病的控制作用和對土壤微生物群落的影響。結果表明，與不施肥對照（CK）相比，碳酸氫銨處理（AB）、生化黃腐酸鉀處理（BFAP）、羊糞處理（SM）能有效保證馬鈴薯出苗，降低馬鈴薯黑痣病的發(fā)生率，其中BFAP處理對馬鈴薯黑痣病控制作用最明顯，處理后地上莖病情指數為9.95，比CK減少30.85%，薯塊病情指數為31.23，比CK減少49.87%。平板計數分析結果表明，U處理馬鈴薯根際土壤真菌數量相對其他處理多，BFAP處理馬鈴薯根際土壤細菌數量增多且變化明顯。Biolog-ECO微平板測定結果表明，BFAP處理的平均顏色變化率（AWCD）增長率高于CK，并且它的豐富度（S）、多樣性指數（H′）和均勻度（J）均最高，分別為20.00、2.70、0.91。由主成分分析（principal component analysis，簡稱PCA）結果可知，BFAP處理土壤微生物對碳源的利用率相對最高。施用BFAP后，土壤微生物數量明顯增加，土壤微生物多樣性明顯提高，土壤微環(huán)境得到了改善，在生態(tài)水平上降低了馬鈴薯黑痣病的發(fā)生情況。

關鍵詞：馬鈴薯黑痣病;肥料;病害控制;土壤微生態(tài);Biolog-ECO

中圖分類號： S435.32;S154.3 ?文獻標志碼： A ?文章編號：1002-1302（2020）11-0082-07

收稿日期：2019-07-09

基金項目：國家公益性行業(yè)（農業(yè)）科研專項（編號：201503112+7）;全產業(yè)鏈創(chuàng)新示范項目（編號：NKYZ16-0104）;寧夏自然科學基金（編號：NZ16104）。

作者簡介：郭成瑾（1978—），女，陜西寶雞人，碩士，副研究員，主要從事馬鈴薯病害防治研究。Tel：（0951）6882370;E-mail：chj.guo@163.com。

通信作者：沈瑞清，博士，研究員，主要從事農作物病害防治及植物病原研究。Tel：（0951）6886817;E-mail：srqzh@sina.com。 ?馬鈴薯黑痣病（Rhizoctonia solani Kühn）別稱立枯絲核菌病，是以帶病種薯和土壤為主要傳播途徑的真菌性病害，主要危害馬鈴薯幼芽、莖基部、薯塊，引起芽腐、莖潰瘍、塊莖黑痣，嚴重影響馬鈴薯出苗、品質及產量[1-2]。在寧夏南部干旱半干旱區(qū)，隨著馬鈴薯種植面積的擴大，重茬現象日益嚴重，這一病害由零星發(fā)生發(fā)展成普遍發(fā)生，已成為寧夏馬鈴薯病蟲害防治的瓶頸，嚴重制約了寧夏馬鈴薯產業(yè)的發(fā)展[3]。目前，馬鈴薯黑痣病的防治通常采用農藝措施[4-5]、化學藥劑[6-7]、生物防治[8]等。但馬鈴薯黑痣病作為一種土傳病害很難控制，缺乏有效的方法去控制病害的傳播和發(fā)展[9]。

肥料是作物生長發(fā)育的重要影響因素，不僅影響作物病害的發(fā)生[10-11]，還能改變土壤的理化性質和生物性狀[12]，影響地上植被的生長，間接影響土壤微生物群落結構[13]。有關肥料對馬鈴薯病害的研究表明，腐殖質的施用可有效提高馬鈴薯的抗病能力[14]，施用有機肥對馬鈴薯早疫病有顯著的防治作用[15]，通過控制施氮水平能減輕馬鈴薯晚疫病的發(fā)生程度[16]，單施硫酸銨可抑制馬鈴薯瘡痂病的發(fā)生[17]，含硫肥料能降低馬鈴薯立枯絲核菌的侵染率[18]。這些研究主要依據馬鈴薯病害調查指標，對于肥料是否對馬鈴薯黑痣病發(fā)生具有影響，以及是否對馬鈴薯土壤微生物群落結構有所影響尚未見報道。寧夏馬鈴薯種植區(qū)施用肥料主要包括化肥和有機肥，其中化肥施用較多的是磷酸二銨、碳酸氫銨、尿素，有機肥以羊糞、牛糞、豬糞等為主[19]。在長期的調查研究中，筆者發(fā)現不同肥料的施用會對馬鈴薯黑痣病的發(fā)病程度產生影響。因此，本研究通過施入常見肥料作為基肥后種植馬鈴薯，探究肥料對馬鈴薯黑痣病發(fā)生控制作用，以及對馬鈴薯根際土壤微生物種類、數量和功能多樣性的影響，探明肥料的種類對馬鈴薯黑痣病發(fā)生程度的影響，以期為合理施肥減緩馬鈴薯黑痣病病害的發(fā)生，提高馬鈴薯產量，科學有效指導生產提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 供試材料與試驗設計

試驗設在寧夏同心縣下馬關鎮(zhèn)馬鈴薯試驗基地，在連續(xù)多年種植馬鈴薯的田塊進行，該地馬鈴薯黑痣病發(fā)生嚴重。土壤理化性質：有機質含量為 4.75 g/kg，全氮（N）含量為0.59 g/kg，全磷（P）含量為 0.51 g/kg，全鉀（K）含量為18.4 g/kg，速效氮含量為 38 mg/kg，速效磷含量為6.4 mg/kg，速效鉀含量為156 mg/kg，pH值為8.56。供試馬鈴薯品種為克新1號。供試肥料選用當地馬鈴薯種植常用肥，分別為尿素（urea，簡稱U）（N有效含量為46%）、碳酸氫銨（ammonium bicarbonate簡稱AB）（N有效含量為17%）、生化黃腐酸鉀（BFAP）（N、P、K含量≥5%;生化黃腐酸含量≥12%;有機質含量≥46%）、羊糞（SM）（N有效含量為0.8%;P有效含量為0.3%;K有效含量為0.55%;有機質有效含量為30.56%）等。

1.2 試驗設計

試驗設置375 kg/hm2尿素，750 kg/hm2碳酸氫銨，1 800 kg/hm2生化黃腐酸鉀，2 250 kg/hm2羊糞和不施肥對照（CK）5個處理，每個處理3次重復，隨機區(qū)組排列，共15個小區(qū)，小區(qū)面積為4.5 m×25 m。供試肥料于播種馬鈴薯前作為基肥施入，并于封壟前追肥1次。試驗從播種到收獲整個生育期栽培措施與大田一致。試驗開始于2014年，連續(xù)實施3年，在2017年，即試驗第4年分別在馬鈴薯苗期（播后42 d）、成株期（播后71 d）、盛花期（播后100 d）以及收獲期（播后133 d）取根際土壤。采用5點取樣法，每點取10株，采集馬鈴薯根系及根系周圍5 cm處土壤的混合物，將土樣混勻，用無菌的封口袋包扎密封，置于冰盒中帶回實驗室，于4 ℃冰箱中保藏備用。

1.3 測定內容

1.3.1 馬鈴薯黑痣病病情調查 出苗期調查出苗率。播種時調查每個小區(qū)播種數，播種后42 d調查每個小區(qū)出苗數，計算出苗率。出苗率=出苗數/播種數×100%。

成株期調查病莖的病情指數。每個小區(qū)隨機取3點，每點取3 m調查植株，記錄總莖數、各級病莖數，計算病情指數。收獲期調查薯塊黑痣病發(fā)病情況。每個小區(qū)隨機取3點，每點取50塊莖，共計150塊，記錄薯塊病級數，計算病情指數。馬鈴薯黑痣病地上莖分級標準為0級：無病;1級：病斑小于莖圍的10%;2級：病斑為莖圍的10%～25%;3級：病斑為莖圍的26%～50%;4級：病斑為莖圍的50%以上至環(huán)剝脫皮。馬鈴薯黑痣病病薯分級標準為0級：薯塊上無病斑;1級：病斑小，病部面積占整個薯塊面積5%以下;3級：病斑較小，病部面積占整個薯塊面積5%～10%;5級：病斑較小或個別較大，病部面積占整個薯塊面積11%～25%;7級：病斑大小均有分布，病部面積占整個薯塊面積26%～50%;9級：病斑大小均有分布，病部相連面積占整個薯塊面積的50%以上。

病情指數=∑[各級病株數（病薯數）×相對級數值]×100/[調查總株數（總薯數）×最高級數值]。

1.3.2 馬鈴薯根際土壤微生物數量測定 采用稀釋平板法[20]測定土壤中真菌、細菌、放線菌的數量。真菌用孟加拉紅培養(yǎng)基（5 g蛋白胨，10 g葡萄糖，1 g KH2PO4，0.5 g MgSO4·7H2O，3 mL孟加拉紅，10 g瓊脂粉，1 000 mL蒸餾水）培養(yǎng)。使用時待培養(yǎng)基不燙手加入0.3 mL 1%鏈霉素;細菌用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基（3 g牛肉膏，5 g蛋白胨，10 g瓊脂粉，1 000 mL 蒸餾水）培養(yǎng);放線菌用高氏1號培養(yǎng)基（20 g可溶性淀粉，0.01 g FeSO4·7H2O，0.5 g MgSO4·7H2O，0.5 g NaCl，1.0 g KNO3，0.5 g K2HPO4·3H2O，10 g瓊脂粉，1 000 mL蒸餾水）培養(yǎng)。結果以1 g鮮土所含微生物菌落形成單位數量（CFU/g）表示。

1.3.3 馬鈴薯根際土壤微生物多樣性測定 利用Biolog-ECO微平板方法[21-22]測定土壤中微生物的多樣性。收獲期采集馬鈴薯根際土樣，稱取10 g鮮土（稱量前測量含水量），加入90 mL無菌生理鹽水中稀釋，在搖床里振搖30 min，靜止沉淀3～5 min，然后進行100倍稀釋，以每孔150 μL稀釋液加入微孔板中，將制備好的菌懸液倒入無菌移液槽中，使用8孔移液器將其接種于微平板的96孔中。接種好的微平板放到鋪有6層紗布的塑料飯盒中，為防止微平板鑒定孔中的菌懸液揮發(fā)，紗布要保持一定的濕度。塑料飯盒用保鮮膜包裹，保鮮膜上用注射針頭扎若干個小眼，以保證微生物的培養(yǎng)所需要的氧氣進入，將微平板避光培養(yǎng)。將Biolog-ECO微孔板置于30 ℃恒溫培養(yǎng)，分別于0、24、48、72、96、120、144、168 h在Biolog微孔板讀數儀上讀取數據（測定波長為590 nm）。

孔的平均顏色變化率（AWCD）計算公式如下：

AWCD=∑（Ci-R）/n。

式中：Ci為處理碳源孔的光密度;R為對照孔的光密度;n為培養(yǎng)基碳源種類數。

土壤微生物種群的多樣性水平通過豐富度、Shannon多樣性指數（H′）、Pielou均勻度指數（J）進行分析[22]。

豐富度指被利用的碳源總數目，為每孔中Ci-R的值大于0.25的孔數，以S表示。

Shannon多樣性指數：H′=-∑PilnPi（i=1，2，3，…，n）。

Pielou均勻度指數：J=H′/lnS。

式中，Pi為有培養(yǎng)基的孔和對照孔的光密度差與整板總差的比值，即Pi=（Ci-R）/∑（Ci-R），S為豐富度。

1.4 數據處理

利用Microsoft Excel 2003軟件對數據進行處理和繪圖，采用DPSv 3.11、CANOCO等軟件對數據進行統計分析。

2 結果與分析

2.1 施用不同肥料對馬鈴薯黑痣病發(fā)生情況的影響

由表1可知，在馬鈴薯播種后42 d調查出苗率，不同肥料對馬鈴薯出苗有一定的影響。生化黃腐酸鉀處理和羊糞處理的出苗率較高，分別為9495%、92.59%，而其他處理的出苗率均在90%以下;方差分析結果表明，各處理間差異顯著。開花后期調查地上莖發(fā)病情況，總體發(fā)病較輕，其中生化黃腐酸鉀處理地上莖病情指數最低，為9.95，比CK（不施肥對照）減少30.85%，其次為羊糞處理和碳酸氫銨處理，分別為10.24、10.37，分別比CK（不施肥對照）減少 28.84%、27.94%，而尿素處理地上莖病情指數為12.12，僅比CK（不施肥對照）減少15.77%;方差分析結果表明，碳酸氫銨處理、生化黃腐酸鉀處理和羊糞處理之間差異不顯著，而三者與尿素處理和CK（不施肥對照）之間差異顯著。收獲期調查馬鈴薯薯塊上黑痣病發(fā)生情況，其中生化黃腐酸鉀處理薯塊病情指數最低，為31.23，比CK（不施肥對照）減少 49.87%，其次為羊糞處理和碳酸氫銨處理，分別為36.64、37.88，比CK（不施肥對照）分別減少 41.19%、39.20%，而尿素處理薯塊病情指數為 55.16，僅比CK（不施肥對照）減少1146%;方差分析結果表明，生化黃腐酸鉀處理與其他處理之間差異顯著，羊糞處理和碳酸氫銨處理之間差異不顯著，而與尿素處理和CK（不施肥對照）之間差異顯著。綜合結果表明，碳酸氫銨、生化黃腐酸鉀、羊糞處理能保證馬鈴薯出苗，有效減輕馬鈴薯黑痣病的發(fā)生，其中生化黃腐酸鉀處理對馬鈴薯黑痣病的控制作用最明顯;尿素處理對馬鈴薯黑痣病的控制作用不明顯。

2.2 施用不同肥料對馬鈴薯根際土壤微生物數量的影響

2.2.1 施用不同肥料對馬鈴薯根際真菌數量的影響 由表2可知，隨著馬鈴薯的生長發(fā)育，5個處理馬鈴薯根際真菌數量均呈先上升后下降趨勢。從苗期開始，馬鈴薯根際土壤真菌數量逐漸增加，在成株期均達到最高值，然后緩慢下降。各處理中，尿素處理土壤真菌數量增長最快，在成株期真菌數量達到最高值，比CK（不施肥對照）增加262.23%，其次為羊糞處理、生化黃腐酸鉀處理和碳酸氫銨處理，分別比CK（不施肥對照）增加129.04%、10244%、7.94%。方差分析結果表明，在苗期，尿素處理與羊糞處理、CK（不施肥對照）之間差異顯著，與碳酸氫銨處理和生化黃腐酸鉀處理差異不顯著;在成株期，尿素處理與其他處理之間差異顯著，而生化黃腐酸鉀處理與羊糞處理之間差異不顯著，但兩者與碳酸氫銨處理和CK（不施肥對照）差異顯著;在盛花期，尿素處理與其他處理差異顯著，碳酸氫銨處理、生化黃腐酸鉀處理和CK（不施肥對照）之間差異不顯著，但三者與羊糞處理差異顯著;在收獲期，尿素處理與碳酸氫銨處理之間差異不顯著，與其他處理差異顯著，而生化黃腐酸鉀處理、羊糞處理尿素處理和CK（不施肥對照）之間差異不顯著?？傮w來看，在整個馬鈴薯生育期里，尿素處理土壤真菌數量相對其他處理多。

2.2.2 施用不同肥料對馬鈴薯根際細菌數量的影響 由表3可知，隨著馬鈴薯的生長發(fā)育，5個處理土壤細菌數量均呈現逐漸上升趨勢。從苗期開始，馬鈴薯根際土壤細菌數量逐漸增加，在收獲期均達到最高值。其中，生化黃腐酸鉀處理土壤細菌數量增長最快，在收獲期細菌數量達到最高值，比CK（不施肥對照）增加58.76%，其次為羊糞處理和碳酸氫銨處理，分別比CK（不施肥對照）增加3373%、28.70%，而尿素處理土壤細菌數量增加幅度小，僅比CK（不施肥對照）增加8.04%。方差分析結果表明，在苗期，生化黃腐酸鉀處理與其他處理之間差異顯著，碳酸氫銨處理與尿素處理和羊糞處理之間差異不顯著，但與CK（不施肥對照）之間差異顯著;在成株期，生化黃腐酸鉀處理與碳酸氫銨處理之間差異不顯著，兩者與其他處理之間差異顯著;在盛花期，生化黃腐酸鉀處理與其他處理之間差異顯著，碳酸氫銨處理與羊糞處理和CK（不施肥對照）之間差異不顯著，單著與尿素處理之間差異顯著;在收獲期，生化黃腐酸鉀處理與其他處理之間差異顯著，碳酸氫銨處理與羊糞處理之間差異不顯著，兩者與尿素處理和CK（不施肥對照）之間差異顯著。總體來看，在整個馬鈴薯生育期里，生化黃腐酸鉀處理、羊糞處理和碳酸氫銨處理土壤細菌數量相對其他處理多。

2.2.3 施用不同肥料對馬鈴薯根際放線菌數量的影響 由表4可知，隨著馬鈴薯的生長發(fā)育，5個處理土壤放線菌數量均呈現先上升后下降的趨勢。從苗期開始，各處理馬鈴薯根際土壤放線菌數量逐漸增加，在成株期達到最高值，之后緩慢下降。在成株期時，生化黃腐酸鉀處理土壤放線菌數量增長相對較快，比CK增加62.04%，其次為碳酸氫銨處理和羊糞處理，分別比CK增加32.97%、19.52%，而尿素處理土壤放線菌數量比CK（不施肥對照）低，減少21.04%。方差分析結果表明，從苗期到收獲期，各處理之間差異均不顯著?？傮w來看，在整個馬鈴薯生育期里，5個處理馬鈴薯根際土壤放線菌數量均較少，變化不明顯。

2.3 施用不同肥料對馬鈴薯根際土壤微生物群落功能多樣性的影響

2.3.1 施用不同肥料對土壤微生物群落碳源利用模式的影響 由圖1可知，4種肥料處理后，馬鈴薯根際土壤微生物利用全部碳源的平均顏色變化率（average well color development，簡稱AWCD）隨著培養(yǎng)時間的延長呈明顯的“S”形變化。在0～48 h之間，各處理的AWCD在0～0.25之間，變化不大。從48 h開始，各處理的AWCD不斷增加。生化黃腐酸鉀處理的AWCD從48 h開始上升最快，在72 h之后始終高于其他處理，其次為碳酸氫銨處理，即生化黃腐酸鉀處理和碳酸氫銨處理的AWCD增長率高于CK（不施肥對照），說明這2種肥料處理的

土壤微生物活性較強，對各類碳源的利用能力相對較高。羊糞處理和CK（不施肥對照）的AWCD較接近，增長趨勢一致。而尿素處理的AWCD最低，且明顯小于其他處理，說明尿素處理降低了土壤微生物的活性，影響了土壤微生物對各類碳源的利用能力。結合表1馬鈴薯黑痣病發(fā)病情況分析，AWCD高的生化黃腐酸鉀和碳酸氫銨處理馬鈴薯黑痣病病情指數相對低;而AWCD低的尿素肥料處理馬鈴薯黑痣病病情指數相對較高。

2.3.2 施用不同肥料對土壤微生物群落功能多樣性影響 由圖1可知，各處理土壤微生物培養(yǎng)72 h后AWCD增長趨勢已穩(wěn)定，因此采用培養(yǎng)72 h的馬鈴薯根際土壤微生物碳源利用能力進行多樣性分析。由表5可知，不同肥料處理土壤微生物群落多樣性水平存在差異。豐富度反映的是土壤微生物群落種類，生化黃腐酸鉀處理最多，為20種，表明生化黃腐酸鉀處理的土壤微生物種類豐富，而尿素處理的最少，僅為8.7種，表明尿素處理的土壤微生物種類少，其他處理豐富度在16.6～18.4種之間;方差分析結果表明，生化黃腐酸鉀處理與尿素處理之間差異顯著，與其他處理差異不顯著。Shannon多樣性指數反映的是群落物種豐富度，生化黃腐酸鉀處理的最高，為2.70，其次為碳酸氫銨處理，為250，其他處理多樣性指數在2.04～2.32之間;方差分析結果表明，生化黃腐酸鉀處理與碳酸氫銨處理之間差異不顯著，與其他處理差異顯著。均勻度反映的是群落中全部物種個體數目的分配狀況，反映了土壤微生物中各物種個體數目的均勻程度，生化黃腐酸鉀處理和碳酸氫銨處理均勻度較高，分別為0.91、0.89，表明兩者土壤微生物中各物種數量分布均勻，而CK（不施肥對照）均勻度最低，為074;方差分析結果表明，生化黃腐酸鉀處理與碳酸氫銨處理之間差異不顯著，與羊糞處理和CK（不施肥對照）之間差異顯著?？傮w來看，生化黃腐酸鉀處理在豐富度、多樣性指數、均勻度均高于其他處理。

根據培養(yǎng)72 h馬鈴薯根際土壤微生物碳源利用能力，應用Canoco for Windows 4.5進行主成分（PCA）分析，由圖2可知，第1主成分為56.5%，第2主成分為23.0%，共占79.5%。樣方間距離的大小表示樣方間的相似程度，距離越近相似程度越高。不同肥料處理（黑點）代表樣方，碳酸氫銨處理與生化黃腐酸鉀處理距離較近，尿素處理與CK（不施肥對照）距離較近，表明碳源利用能力相似，碳源利用能力差異性小。不同肥料處理（黑點）在不同碳源投影點的相對位置（箭頭）代表該碳源在該肥料處理，即順著箭頭方向表示重要程度越大，反之越小[23]。由圖2可知，除碳源C26（α-丁酮酸）外，其他30種碳源投影點均指向碳酸氫銨處理、生化黃腐酸鉀處理和羊糞處理，其中9種碳源指向羊糞處理，21種碳源指向碳酸氫銨處理和生化黃腐酸鉀處理，說明這2個處理的馬鈴薯根際土壤微生物碳源利用能力強且相關性高?？芍妓釟滗@處理和生化黃腐酸鉀處理土壤微生物種類和數量相對最多，其次為羊糞處理。而尿素處理和CK對碳源利用很低，這2個處理土壤微生物種類和數量都較少。

3 結論與討論

馬鈴薯土傳病害因土壤環(huán)境條件復雜，病原菌存在于土壤中難以控制，造成了防治上的困難[24]。采用化學藥劑雖在短期內能降低病害的發(fā)病情況，但也會無選擇地殺死許多土壤里的有益微生物，導致病害反彈并加重，很難控制病害的蔓延[25]。采用農業(yè)措施，雖不能徹底解決病害的發(fā)生，但可以有效地降低病原菌數量和減緩病害發(fā)生[26-27]。本研究表明，施用肥料后，可不同程度地減輕馬鈴薯黑痣病的發(fā)生，其控制效果與肥料種類相關。生化黃腐酸鉀處理對馬鈴薯黑痣病病害發(fā)生具有一定的控制作用，并且馬鈴薯根際土壤細菌的數量增多且變化明顯。結合Biolog-ECO微平板測定結果，生化黃腐酸鉀處理的馬鈴薯根際土壤微生物利用全部碳源能力最強，土壤微生物種類和數量相對較多，這與對馬鈴薯黑痣病的控制效果具有一致性。而尿素處理對馬鈴薯黑痣病病害發(fā)生控制率低，土壤中真菌數量增加明顯，處理后的馬鈴薯根際土壤微生物利用全部碳源能力較弱，土壤微生物種類和數量相對較少。

氮素是影響馬鈴薯生長發(fā)育的三大要素之一，氮素缺乏可導致馬鈴薯群體葉面積下降、減產，但過量施用氮素，也會導致馬鈴薯莖葉徒長、組織柔嫩，降低纖維素、木質素等細胞壁材料的含量，從而降低馬鈴薯的抗病性[28-29]，發(fā)病率增加，病害程度加重[30]。王德江研究表明，施用純氮量提高后，馬鈴薯黃萎病發(fā)病程度顯著增加，發(fā)病率升高[31]。本研究發(fā)現，隨著施入肥料中氮含量的增加，對馬鈴薯黑痣病的控制作用下降明顯，以尿素處理控制效果最差。施肥也是影響土壤微生物生態(tài)特征的重要農業(yè)措施。Lovell等研究表明，長期施用氮肥會降低土壤中細菌的數量和土壤微生物活性[32]。本研究表明，尿素處理的土壤中真菌數量增加，細菌數量相對較少，土壤微生物群落功能多樣性下降，從而影響土壤微生物的活性。因此，無機肥的施用，尤其是氮肥應控制施用劑量。

生化黃腐酸鉀是一種作物秸稈經生物發(fā)酵技術生產的腐殖酸類肥料[33]。據報道，腐殖酸類肥料能顯著促進植物根系生長，提高根系活力[34]，且與無機肥料合理配施可以顯著提高肥料利用率[35]。Mosa等的研究表明，施入腐殖酸類肥料能夠提高灌溉效率，增加營養(yǎng)吸收，增強馬鈴薯的抗病能力[14]。本研究表明，施用生化黃腐酸鉀減輕了馬鈴薯黑痣病的發(fā)生。畢軍等研究發(fā)現，腐殖酸類肥料能夠直接為土壤微生物提供有機能源，又能夠通過改善根際土壤環(huán)境促進微生物繁衍并延緩土壤微生物的衰減，從而促進作物的生長發(fā)育[36]。而且豐富的土壤微生物區(qū)系可以保持土壤健康狀況，控制植物病害發(fā)生[37]。本研究表明，施用生化黃腐酸鉀后，增加了土壤微生物的數量，尤其以土壤細菌的數量增加較明顯，提高了土壤微生物多樣性，與控制馬鈴薯黑痣病發(fā)生具有一致性，在生態(tài)水平上降低了馬鈴薯黑痣病的發(fā)生情況。這與畢軍等的研究結果[36]一致。

馬鈴薯現為寧夏第一種植作物，但種植區(qū)域多位于干旱缺水的坡地和山地，由于不易種植其他作物，因此馬鈴薯田多數連年種植，這增加了病原菌在土壤中的積累，使得馬鈴薯黑痣病這一土傳病害連年加重。有研究表明，常規(guī)肥料（N、P、K）平衡配施有機肥可提高土壤微生物數量、活性以及多樣性，并且能增強作物生長及產量[38]。根據本研究的結果，在農業(yè)防治馬鈴薯黑痣病方面，根據寧夏山區(qū)種植馬鈴薯施肥實際情況，可適當提高農家肥的施入，同時增加生物有機肥的比例。合理的肥料配比也將是接下來研究的重點。

參考文獻：

[1]Abdessamad M B，Martín M P. Black scurf of potato[J]. Mycologist，2006，20（4）：130-132.

[2]Sneh B，Jabaji-Hare S，Neate S，et al. Rhizoctonia species：taxonomy，molecular biology，ecology，pathology and disease control[M]. Berlin：Springer Netherlands，1996.

[3]郭成瑾，張華普，張麗榮，等. 寧夏中南部地區(qū)馬鈴薯病蟲害調查[J]. 中國蔬菜，2012（13）：30-32.

[4]Robert P L，Honeycutt C W，Timothy S G，et al. Effects of different potato cropping system approaches and water management on soilborne diseases and soil microbial communities[J]. Phytopathology，2011，101（1）：58-67.

[5]Larkin R P，Griffin T S. Control of soilborne potato diseases using Brassica green manures[J]. Crop Protection，2007，26（7）：1067-1077.

[6]Errampalli D，Johnston H W. Control of tuber-borne black scurf （Rhizoctonia solani） and common scab （Streptomyces scabies） of potatoes with a combination of sodium hypochlorite and thiophanate-methyl preplanting seed tuber treatment[J]. Canadian Journal of Plant Pathology，2001，23（1）：68-77.

[7]Kumar A，Raj K. Evaluation of different fungicides against black scurf of potato caused by Rhizoctonia solani[J]. Indian Journal of Plant Protection，2016，44（1）：110-115.

[8]Ikeda S，Shimizu A，Shimizu M，et al. Biocontrol of black scurf on potato by seed tuber treatment with Pythium oligandrum[J]. Biological Control，2012，60（3）：297-304.

[9]Wilson P S，Ahvenniemi P M，Lehtonen M J，et al. Biological and chemical control and their combined use to control different stages of the Rhizoctonia disease complex on potato through the growing season[J]. Annals of Applied Biology，2008，153（3）：307-320.

[10]楊衛(wèi)星，袁虹霞，孫炳劍，等. 不同施肥種類及施用量對小麥禾谷胞囊線蟲病發(fā)生的影響[J]. 植物病理學報，2008，38（6）：613-618.

[11]熊桂林，陳懷谷，李 偉，等. 不同施肥處理對小麥紋枯病發(fā)生及根際微生物的影響[J]. 江蘇農業(yè)學報，2008，24（4）：414-418.

[12]Pankhurst C，Doube B M，Gupta V R. Biological indicators of soil health[J]. Quarterly Review of Biology，1997，17（2）：368-369.

[13]徐永剛，宇萬太，馬 強，等. 不同施肥制度對土壤微生物生態(tài)影響的評價[J]. 土壤通報，2010，41（5）：1262-1269.

[14]Mosa A A. Effect of the spplication of humic substances on yield，quality，and nutrient content of potato tubers in egypt[M]. Berlin：Springer Netherlands，2012.

[15]張建平，程玉臣，哈 斯. 有機肥防治馬鈴薯早疫病試驗[J]. 中國馬鈴薯，2012，26（5）：291-294.

[16]楊 瑒. 施氮量對馬鈴薯根際土壤生物活性及晚疫病發(fā)生程度的影響[D]. 大慶：黑龍江八一農墾大學，2014.

[17]Mizuno N，Yoshida H，Toshiaki T. Efficacy of single application ammonium sulfate in suppressing potato common scab[J]. Soil Science and Plant Nutrition，2000，46（3）：611-616.

[18]Klikocka H，Haneklaus S，Bloem E，et al. Influence of sulfur fertilization on infection of potato tubers with Rhizoctonia solani and Streptomyces scabies[J]. Journal of Plant Nutrition，2005，28（5）：819-833.

[19]趙 營，郭鑫年，趙護兵，等. 寧夏南部山區(qū)馬鈴薯施肥現狀與評價[J]. 中國馬鈴薯，2013，27（5）：281-287.

[20]李阜棣，喻子牛，何紹江. 農業(yè)微生物學實驗技術[M]. 北京：中國農業(yè)出版社，1996：178-181.

[21]鄭 華，歐陽志云，方治國，等. BIOLOG在土壤微生物群落功能多樣性研究中的應用[J]. 土壤學報，2004，41（3）：456-461.

[22]胡 可，王利賓. BIOLOG微平板技術在土壤微生態(tài)研究中的應用[J]. 土壤通報，2007，38（4）：819-821.

[23]董立國，蔣 齊，蔡進軍，等. 基于Biolog-ECO技術不同退耕年限苜蓿地土壤微生物功能多樣性分析[J]. 干旱區(qū)研究，2011，28（4）：630-637.

[24]Jeger M J，Hide G A，Boogert P D，et al. Pathology and control of soil-borne fungal pathogens of potato[J]. Potato Research，1996，39（3）：437-469.

[25]Gamliel A，Austerweil M，Kritzman G. Non-chemical approach to soilborne pest management - organic amendments[J]. Crop Protection，2000，19（8/9/10）：847-853.

[26]Edward B，Robert P L，Stellos T，et al. Rapeseed rotation，compost and biocontrol amendments reduce soilborne diseases and increase tuber yield in organic and conventional potato production systems[J]. Plant and Soil，2014，374（1/2）：611-627.

[27]張智芳，楊海鷹，云 庭，等. 播期、芽長和覆土厚度對馬鈴薯黑痣病的規(guī)避效應及產量的影響[J]. 中國馬鈴薯，2014，28（1）：43-48.

[28]韋冬萍，韋劍鋒，熊建文，等. 馬鈴薯氮素營養(yǎng)研究進展[J]. 廣東農業(yè)科學，2011，38（22）：56-60.

[29]郭衍銀，徐 坤，王秀峰，等. 礦質營養(yǎng)與植物病害機理研究進展[J]. 甘肅農業(yè)大學學報，2003，38（4）：385-393.

[30]慕康國，趙秀琴，李健強，等. 礦質營養(yǎng)與植物病害關系研究進展[J]. 中國農業(yè)大學學報，2000，5（1）：84-90.

[31]王德江. 不同施氮水平對馬鈴薯生長、產量及黃萎病發(fā)病率的影響[D]. 哈爾濱：東北農業(yè)大學，2016.

[32]Lovell R D，Jarvis S C，Bardgett R D. Soil microbial biomass and activity in long-term grassland：effects of management changes[J]. Soil Biology and Biochemistry，1995，27（7）：969-975.

[33]黨祝慶，王娜娜，張亞飛，等. 不同施肥模式對桃幼樹根系生長與氮素吸收分配的影響[J]. 水土保持學報，2015，29（4）：171-176.

[34]Zandonadi D B，Canellas L P，Faξanha A R. Indolacetic and humic acids induce lateral root development through a concerted plasmalemma and tonoplast H+ pumps activation[J]. Planta，2007，225（6）：1583-1595.

[35]梁太波，王振林，王汝娟，等. 腐殖酸鉀對生姜根系生長發(fā)育及活性氧代謝的影響[J]. 應用生態(tài)學報，2007，18（4）：813-817.

[36]畢 軍，夏光利，畢研文，等. 腐殖酸生物活性肥料對冬小麥生長及土壤微生物活性的影響[J]. 植物營養(yǎng)與肥料學報，2005，11（1）：99-103.

[37]王書錦，胡江春，張憲武. 新世紀中國土壤微生物學的展望[J]. 微生物學雜志，2002，22（1）：36-39.

[38]Zhong W H，Gu T，Wang W，et al. The effects of mineral fertilizer and organic manure on soil microbial community and diversity[J]. Plant and Soil，2010，326（1/2）：511-522.魯海菊，李麗莎，謝欣悅，等. 木霉P3.9菌株對枇杷根際土著細菌數量的影響[J]. 江蘇農業(yè)科學，2020，48（11）：89-92.