李文 羅莉丹 嚴(yán)飛 陳達(dá)林
摘 要:目的:觀察豬殃殃的抗炎作用。方法:通過(guò)冰醋酸致小鼠腹腔炎癥和角叉菜膠致小鼠足腫脹實(shí)驗(yàn),觀察豬殃殃的抗炎作用。結(jié)果:豬殃殃水提取物可以顯著降低小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性,抑制小鼠足腫脹,顯著降低MDA和NO,升高SOD水平。結(jié)論:豬殃殃水提取物具有較強(qiáng)的抗炎作用。
關(guān)鍵詞:豬殃殃;炎癥;抗炎
八仙草為茜草科拉拉藤屬一年生小草本,別名豬殃殃
等。傳說(shuō)豬食之則生病體弱,故名“八仙草”?!督鞑菟幨謨?cè)》等記載,八仙草性味辛、微涼,具有清熱、消炎、解毒和利膽等功效,尤其是苗藥和藏藥復(fù)方中的主要成分,被當(dāng)?shù)鼐用裼糜谥委煾忻鞍l(fā)熱、牙齦出血、傷口化膿、疥癬、腎癥、風(fēng)濕跌打疼痛、傷風(fēng)發(fā)熱、尿路感染、慢性白血病等疾病。大量研究表明八仙草可以抑制過(guò)氧化物酶,清除DPPH、ABTS、羥基、過(guò)氧化氫和超氧自由基等,具有體外抗氧化作用。
1 儀器、材料
儀器:R-201旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海百典儀器設(shè)備有限公司);JY系列藥物電子天平(上海精科實(shí)業(yè)有限公司);UV160型紫外可見(jiàn)光分光光度計(jì)(島津公司);材料:昆明種小鼠購(gòu)買(mǎi)于南昌大學(xué)動(dòng)物,SOD、MDA試劑盒購(gòu)于南京建成生物試劑公司。
2 方法
2.1 藥物的提取
八仙草水提物的制備:稱取一定量的八仙草干燥品,加入10倍量水提取3次,每次3h,16 層紗布濾過(guò)、合并濾液,濃縮,八仙草水提物生藥量為2.5g·mL-1,臨用時(shí)用蒸餾水稀釋成所需濃度的混懸液。八仙草乙醇提物的制備:稱取一定量的八仙草干燥品,加入10倍量乙醇提取3次,每次超聲1.5h,16層紗布濾過(guò)、合并濾液,濃縮,八仙草乙醇提物生藥量為2.5g·mL-1,臨用時(shí)用蒸餾水稀釋成所需濃度的混懸液。
2.2 動(dòng)物處理
取昆明種小鼠50只,雌雄各半,體重18~22g,隨機(jī)分成5組,每組10只,灌胃給藥,灌胃前小鼠禁食不禁水12h。第一組空白對(duì)照組給予蒸餾水(10mL.kg-1);第二組陽(yáng)性對(duì)照組給予Vc水溶液(100mg.kg-1);第三組高劑量組給八仙草水提物高、中、低劑量組(1、2、4g·kg-1),八仙草乙醇提物高、中、低劑量組(1、2、4g·kg-1)。
2.3 SOD和MADA的含量測(cè)定
每天灌胃給藥1次,連續(xù)灌胃14d,最后一次灌胃后30min 后摘眼球取血,4℃,3000r/min離心10min,制成血清,分別按照試劑盒方法測(cè)定SOD和MADA。將采完血的小鼠頸椎脫臼法處死,取出肝臟,用冰冷的生理鹽水洗滌數(shù)次,濾紙吸干水分,稱取1g放入小燒杯中剪碎,轉(zhuǎn)入玻璃勻漿器中,用0.9%生理鹽水配成10%肝組織勻漿,充分研磨數(shù)次后使組織勻漿化后以400r/min離心10min,收集上清液,分別按照試劑盒方法測(cè)定SOD和MADA。數(shù)據(jù)分析結(jié)果用x±s表示,采用SPSS20 統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)各組參數(shù)進(jìn)行方差分析檢驗(yàn)。
3 結(jié)果
豬殃殃水提取物和乙醇提取物對(duì)冰醋酸致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性增加的影響如表1、表2所示,與空白組相比,Vc組、八仙草水提取物組和乙醇提取物組小鼠血清中SOD活力均顯著高于空白組;小鼠血中MDA含量顯著低于空白組(P<0.01)。與八仙草乙醇提取物組相比,八仙草水提取物各劑量組中小鼠血清中MDA明顯降低,SOD明顯升高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。八仙草水提取物組與Vc組相比,血清中MDA和SOD無(wú)顯著性差異(P>0.05)。豬殃殃水提取物和乙醇提取物對(duì)角叉菜膠致小鼠足腫脹的影響如表2所示,與豬殃殃乙醇提取物組比較,豬殃殃水提取物各劑量組小鼠足腫脹度顯著升高,足腫脹抑制率顯著降低,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。豬殃殃乙醇提取物組比較,豬殃殃水提取物各劑量組小鼠顯著降低MDA和NO,升高SOD,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
4 討論
丙二醛(DMA)含量的高低可以反映體內(nèi)不飽和脂質(zhì)的過(guò)氧化程度,間接地反映出細(xì)胞膜的損傷程度;超氧化物歧化酶(SOD)是體內(nèi)一種重要的氧自由基清除劑,對(duì)機(jī)體的氧化與抗氧化平衡有著重要的作用,與衰老、腫瘤、炎癥等有著密切的關(guān)系。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示八仙草水提取物和乙醇提取物與空白組相比,能顯著降低血清和肝臟中MDA含量,增加SOD活力,表明八仙草水提取物和乙醇提取物均具有抗氧化能力;而八仙草水提取物組小鼠中MDA含量低于乙醇提取物組,SOD活力強(qiáng)于乙醇提取物組,表明八仙草水提取物組的抗氧化能力強(qiáng)于乙醇提取物組。八仙草水提取物高劑量組小鼠中MDA含量和SOD活力與Vc組相當(dāng)(P>0.05),表明高劑量的八仙草水提取物具有較強(qiáng)的抗氧化活性。下一步實(shí)驗(yàn)組將對(duì)八仙草水提取物進(jìn)行提取分離出單體物質(zhì)進(jìn)行抗氧化活性篩選,進(jìn)一步明確八仙草抗氧化活性物質(zhì),為八仙草的開(kāi)發(fā)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
參考文獻(xiàn):
[1]李潔,孫俊.八仙草的生藥研究[J].云南中醫(yī)中藥雜志, 2006(27):43-45.
[2]蔡小梅.豬殃殃化學(xué)成分的研究[D].貴陽(yáng):貴州大學(xué)碩士學(xué)位論文,2009.
作者簡(jiǎn)介:
李文(1983- ),男,碩士研究生,主管藥師。