陳 磊,常順利,*,張毓?jié)?張?jiān)圃?/p>

1 新疆大學(xué)資源與環(huán)境科學(xué)學(xué)院綠洲生態(tài)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室, 烏魯木齊 830046 2 新疆林科院森林生態(tài)研究所, 烏魯木齊 830063

土壤凍融通常是因季節(jié)或晝夜氣溫變化而出現(xiàn)土壤凍結(jié)和融化的現(xiàn)象[1],其實(shí)質(zhì)為土壤水的相態(tài)變化過程[2],凍融以多種方式影響著高緯度和高海拔區(qū)域的土壤氮素轉(zhuǎn)化過程[3]。氮礦化是森林土壤礦物氮的主要來源[4],其多受土壤pH值[5]、微生物量氮(Microbial biomass nitrogen, MBN)[6]、群落結(jié)構(gòu)[5]和土壤酶活性[6]等因子的影響。國內(nèi)外研究學(xué)者認(rèn)為凍融過程會(huì)顯著影響凈氮礦化、反硝化和硝化等作用[3,7],另外水、熱等環(huán)境因子及微生物量氮對氮礦化過程有重要的影響[8]。

天山林區(qū)是干旱區(qū)山地的主要組成部分,對全球氣候變化十分敏感[20]。林區(qū)所處緯度與海拔較高,凍融時(shí)期長達(dá)4—6個(gè)月,在秋冬與冬春交替期間溫度變化較大[20]。由于冬季雪被覆蓋,野外調(diào)查與取樣較為困難,該區(qū)冬季土壤氮礦化動(dòng)態(tài)及影響因素的研究仍相對缺乏。因此,本文在天山北坡林區(qū)設(shè)置不同類型植被樣地,根據(jù)測定數(shù)據(jù)分析土壤氮礦化動(dòng)態(tài)及與水、熱環(huán)境因子的關(guān)系,擬回答以下科學(xué)問題：(1)凍融期間天山林區(qū)不同群落類型土壤總氮礦化速率、累積量及季節(jié)貢獻(xiàn)率；(2)各氮素之間的相關(guān)關(guān)系以及溫度、含水率和MBN等因素對土壤總氮礦化速率的影響。以便深入了解凍融期天山林區(qū)土壤氮循環(huán)過程及凍融期土壤氮素轉(zhuǎn)化和遷移,以期為天山林區(qū)可持續(xù)經(jīng)營提供理論指導(dǎo),同時(shí)為該地區(qū)氮循環(huán)提供參考。

1 材料與方法

1.1 研究區(qū)概況

以中國森林生態(tài)系統(tǒng)研究網(wǎng)絡(luò)(China Forest Ecology Research Net, CFERN)天山森林生態(tài)系統(tǒng)定位研究站(43°24′48″—43°26′18″N, 87°27′29″—87°28′48″E)為依托進(jìn)行樣地布設(shè)及采樣,定位站海拔為1908 m。屬溫帶大陸性氣候,最熱月平均氣溫為 10—16℃,最冷月平均氣溫-11— -9℃,年降水量350—600 mm,雨季集中在6—8月,年蒸發(fā)量980—1150 mm,年均相對濕度65%,平均無霜期89 d,≥10℃積溫為1170.5℃,最大積雪深度為65 cm。土壤凍結(jié)期為11月初至次年4月底,持續(xù)6個(gè)月。天山云杉溫帶針葉林為該地植被類型的優(yōu)勢種,郁閉度約為0.4—0.8,林下土壤為山地灰褐色森林土[21]。

1.2 研究方法

1.2.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與采樣方法

于2017年9月植物生長季末期在定位站附近的喬木林地(woodland)、灌叢(bushland)和草地(grassland)3個(gè)群落結(jié)構(gòu)中,分別隨機(jī)布設(shè)3個(gè)20 m20 m的樣方(圖1)。在每個(gè)樣地內(nèi)布設(shè)40根不銹鋼管(鋼管直徑為11 cm、長度為20 cm、管壁厚度為2 mm),平行每隔約7 m設(shè)4排,每排10根土柱。因鋼管較為堅(jiān)固、管壁較薄,取用厚木板置于其上截面部分,垂直敲擊鋼管于土壤中(為防止部分根系被切斷后植物死亡,需要為每個(gè)土柱補(bǔ)充200 mL水)。為凍結(jié)期時(shí)方便取樣,在每個(gè)鋼管的外管壁套塑料薄膜,距上截面1.5 cm處對稱開孔(孔徑為0.5 mm)。其中每個(gè)樣地20根用于測定礦質(zhì)氮含量和凈氮礦化速率,另外20根用于測定總氮礦化速率,共布設(shè)360根。

圖1 樣地布設(shè)圖Fig.1 Sampling plot layout

為測定總氨化和總硝化速率,在每個(gè)樣地中隨機(jī)取出2個(gè)土柱,分別對土柱進(jìn)行K15NO3和(15NH4)2SO4同位素溶液標(biāo)記(選取30%豐度,上?；ぴ?,置于裝有冰袋的保溫箱中。另外,在每個(gè)樣地中隨機(jī)選取1個(gè)土柱(20個(gè)土柱按相鄰位置被分為10對),另一個(gè)土柱留待兩周的原位反應(yīng)后采取,用于測定凈氮礦化速率和MBN含量。

為測定表層土壤(-5 cm)的溫度和含水率連續(xù)變化數(shù)據(jù),在每種群落類型選取1個(gè)樣地布設(shè)便攜性溫度計(jì)(MicroLite 5032P-RH, Fourtec-Fourier Technologies, Israel)和FD探針(ECH2O- 5, Decagon Devices, Pullman, USA),設(shè)置每30 min采樣一次,每日分別產(chǎn)生48個(gè)溫、濕度數(shù)據(jù),便于形成連續(xù)數(shù)據(jù)(圖2)。在樣地中心位置挖取1個(gè)5 cm淺坑(坑底需平整),將溫度計(jì)和FD探針放入后,復(fù)原土壤環(huán)境。每兩個(gè)月將溫濕度探測器的數(shù)據(jù)導(dǎo)入筆記本電腦中,并為探測器更換電池。日均降水、日均氣溫等數(shù)據(jù)由定位站提供。分別在秋季凍融期(AFP, Autumn Freeze-thaw Period, 2017.11.01—2017.11.17),凍結(jié)期(CFP, Constantly Frozen Period, 2017.11.17—2018.3.12)和次年春季凍融期(SFP, Spring Freeze-thaw Period, 2018.3.12—2018.4.15)進(jìn)行采樣(每月的中旬或下旬各1次),共采10次。

1.2.2 實(shí)驗(yàn)室分析方法

利用15N稀釋技術(shù)確定總氨化和總硝化速率[22],將土柱置于恒溫恒濕培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(溫度設(shè)為樣地前三日平均土壤溫度)。標(biāo)記后的18小時(shí)(t1)和42小時(shí)后(t2),分別取出樣品置于冰箱冷凍室中(-20℃)存放,以便送往檢測機(jī)構(gòu)(ICAS英格爾檢測認(rèn)證集團(tuán), 上海)測得不同培養(yǎng)時(shí)間的15N豐度。另外,將采集的土壤樣品經(jīng)過自然風(fēng)干后過0.149 mm篩(100目)。土壤硝態(tài)N含量使用酚二磺酸比色法測定,銨態(tài)氮利用靛酚藍(lán)比色法測定,MBN用氯仿熏蒸-提取(FE)法測定。另外土壤含水率用稱重法測定(105℃, 12 h)。

1.2.3 氮礦化速率及氮轉(zhuǎn)化累積量計(jì)算方法

在查閱文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上,結(jié)合本實(shí)驗(yàn)研究現(xiàn)狀,采用Kirkham和Bartholomew給定的公式確定總氮礦化速率[23]：

(1)

(2)

凈氮礦化速率采用以下公式[24]計(jì)算：

(3)

(4)

Rm=Ramm+Rnit

(5)

Ramm、Rnit、Rm分別代表土壤氨化速率、硝化速率和礦化速率(mg N kg-1d-1)。

N0=∑N1

(6)

(7)

N0為整個(gè)時(shí)期(2017.11.01—2018.04.15)的氮素累積量(kg N hm2a-1),N1為單次氮素轉(zhuǎn)化量(kg N hm2a-1),N2為AFP、CFP和SFP不同時(shí)期的氮素轉(zhuǎn)化量占比(%),如公式(7)所示。

1.2.4 數(shù)據(jù)處理與分析方法

采用Excel 2016和SPSS 19.0軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,并利用Origin 8.5和Prism 7軟件作圖。通過雙因素方差分析(Two-Way ANOVA)來確定凍融時(shí)期及3種群落類型對總氮礦化、凈氮礦化和MBN的影響。用Pearson相關(guān)分析法分析土壤總氮礦化、凈氮礦化和微生物量氮之間相關(guān)性。用線性回歸模型來分析土壤溫度和含水率對總氮礦化、凈氮礦化和MBN的影響。

2 結(jié)果分析

2.1 凍融期土壤溫度、含水率的變化

為研究凍融期間土壤總氮礦化過程,本文對土壤表層日均含水率與日均溫度進(jìn)行了監(jiān)測(圖2)。2017年秋、冬季,天山林區(qū)土壤初次凍結(jié)于11月20日夜間形成,于白天土壤溫度高于0℃時(shí)結(jié)束。從2017年11月下旬至2018年3月下旬,≥20 cm深度的土壤處于凍結(jié)狀態(tài)。另外從2017年11月上旬至2018年4月末,土壤含水率增加了10.2%(圖2)。次年3月中旬至4月末為春季凍融期,這期間土壤頻繁發(fā)生凍結(jié)-融化現(xiàn)象。

2.2 凍融期總氮礦化速率及MBN含量變化

在整個(gè)時(shí)期間的總氨化速率(圖2)特征表現(xiàn)為隨著土壤溫度下降而持續(xù)下降,與總硝化速率和MBN含量相比,它以相反方向變化,即伴隨最小的氨化速率,土壤MBN含量處于上升位置。各個(gè)凍融時(shí)期,3種群落類型土壤總氨化速率較為接近。表層土壤總氨化速率于11月中旬達(dá)到峰值(6.75 mg N kg-1d-1),隨土壤含水率和土壤溫度的下降而至低點(diǎn)(1.3 mg N kg-1d-1),凍結(jié)期土壤總氨化速率變化不明顯。春季凍融期間,隨著土壤溫度和含水率的上升,總氨化速率緩慢上升(圖2)。

圖2 土壤總氮礦化速率、微生物量氮含量、溫度及含水率變化Fig.2 Dynamic changes in gross nitrification rate, gross ammonification rate, MBN content, temperature and moistureAFP：秋季凍融期Autumn freeze-thaw period；CFP：凍結(jié)期Constantly frozen period；SFP：次年春季凍融期Spring freeze-thaw period

與總氨化速率呈持續(xù)下降趨勢相比,總硝化速率在整個(gè)時(shí)期呈較為強(qiáng)烈的震蕩變化,數(shù)值在1.3—6.75 mg N kg-1d-1之間(12月中旬和4月中旬,以喬木林地土壤為例)?？傁趸俾试谇锛緝鋈谶^程中先增加至3.5—4.7 mg N kg-1d-1,隨著土壤溫度和含水率下降呈減小的趨勢(圖2)。從群落類型來看,在秋季凍融期林地土壤總硝化速率相較另外兩種類型土壤較高,并且上升速率提升更快。

土壤MBN含量隨著表層土壤凍結(jié)后下降,但12月中旬的一場降水致使土壤含水率上升,MBN含量隨之而增加。春季凍融期間溫度相較于凍結(jié)期有所回升,MBN含量隨之增加,但增幅不明顯(圖2)。整個(gè)凍融期間,林地土壤MBN含量始終大于灌叢和草地。

2.3 凍融期對總氮礦化累積量、季節(jié)貢獻(xiàn)率的影響

為了獲得氮轉(zhuǎn)化累積量,利用計(jì)算可以說明秋季和春季凍融期對整個(gè)凍融時(shí)期總氮礦化的重要性(公式 6, 公式7)。整個(gè)期間喬木林地、灌叢和草地表層土壤總氨化累積量分別為163.93 kg N hm2a-1、88.27 kg N hm2a-1和103.41 kg N hm2a-1,相同樣地類型在不同凍融時(shí)期有顯著差異(P<0.05)；而總硝化累積量為55.43 kg N hm2a-1、47.12 kg N hm2a-1和41.58 kg N hm2a-1,對總硝化作用來說,相同樣地類型在不同凍融時(shí)期也有顯著差異(P<0.05),并且喬木林地的總氨化和總硝化累積量最多。對于凈礦化作用來說,在相同時(shí)期不同群落類型土壤凈氨化和凈硝化累積量沒有顯著性差異(表1)。

秋季凍融期(17 d)的總氨化累積量均值占整個(gè)時(shí)期的29.5%,秋季凍融期總硝化量均值占比為57.1%；春季凍融期(32 d)總氨化占比為36%,總硝化占比為20.3%?？偘被谇?、春凍融時(shí)期與全部凍融時(shí)期占比為66%,總硝化轉(zhuǎn)化量占比為77.4%(表1)。

表1 總氮礦化累積量、凈氮礦化累積量在3種土地類型的不同時(shí)期所占比例

整體上凍融時(shí)期及3種群落類型對總氮礦化速率、凈氮礦化速率和MBN均有極顯著(P<0.01)的影響。群落結(jié)構(gòu)對以上所有指標(biāo)均有極顯著的影響(P<0.01),凍融期對除凈硝化速率以外所有指標(biāo)都有極顯著(P<0.01)影響(表2)。

表2 凍融期及群落類型對總氮礦化速率、凈氮礦化速率和微生物量氮含量的影響

總氨化速率與總硝化速率、凈硝化速率、MBN呈極顯著的正相關(guān)關(guān)系(P<0.01),說明總氨化速率與總硝化速率之間有一定的相互影響,同時(shí)總氨化速率還受MBN的驅(qū)動(dòng)作用；總硝化速率與凈硝化速率、凈氨化速率、凈硝化速率呈極顯著的正相關(guān)關(guān)系(P<0.01),其中凈氨化速率和凈硝化速率相關(guān)性較小,同時(shí)總硝化速率也受MBN的影響,總硝化速率和MBN、凈氨化速率和MBN速率為負(fù)相關(guān)關(guān)系,其中凈氨化速率和MBN速率之間呈極顯著負(fù)相關(guān)關(guān)系(P<0.01, 表3)。

表3 總氮礦化速率、凈氮礦化速率和微生物量氮含量之間相關(guān)性

2.4 土壤溫度及含水率對氮素動(dòng)態(tài)的影響

在整個(gè)凍融時(shí)期,總氨化速率在整體上呈現(xiàn)出與土壤溫度相關(guān)關(guān)系一致的規(guī)律,但是3種群落類型的相關(guān)程度有所差異。隨著土壤溫度的升高,總氨化速率(林地和灌叢)顯著增加(P<0.05)；但MBN含量卻與土壤溫度表現(xiàn)相反,當(dāng)土壤溫度升高時(shí)MBN(林地和草地)含量顯著降低(P<0.05, 圖3)。

圖3 土壤溫度對總氮礦化速率、凈氮礦化速率及微生物氮含量的影響Fig.3 Effects of daily mean soil temperature on gross N mineralization rate, net N mineralization rate and microbial biomass N content

當(dāng)土壤含水率上升時(shí),凈氨化速率(灌叢)、凈硝化速率(灌叢)和凈礦化速率(灌叢)顯著下降(P<0.05),而總硝化速率和土壤含水率之間沒有顯著相關(guān)關(guān)系(圖4)。

圖4 土壤溫度對總氮礦化速率、凈氮礦化速率及微生物氮含量的影響Fig.4 Effects of daily mean soil moisture on gross N mineralization rate, net N mineralization rate and microbial biomass N content

3 討論

3.1 凍融對氮礦化速率動(dòng)態(tài)的影響

3.1.1 凍融對總氮礦化速率的影響

總氮礦速率能夠反應(yīng)土壤氮素周轉(zhuǎn)情況和供氮能力,對認(rèn)識(shí)植物獲得可利用無機(jī)氮及生態(tài)系統(tǒng)氮素流失的途徑起到重要作用[22]。凍融時(shí)期氮礦化速率動(dòng)態(tài)變化得知,凍融過程中土壤溫度對總氨化速率和總硝化速率影響顯著(P<0.05, 圖3),凍融期的總氮礦化速率比凍結(jié)期更高(圖2)。這一觀點(diǎn)得到了幾項(xiàng)在草原、農(nóng)業(yè)上研究的支持[25-26],這些研究認(rèn)為在凍融時(shí)期極端低溫改變了土壤結(jié)構(gòu),影響土壤團(tuán)粒大小和穩(wěn)定性,繼而影響氮素的循環(huán)和流失,使得凍融條件下總氨化和總硝化速率較高,從而促進(jìn)了土壤的氮礦化過程[25-26](圖2)。對比凍結(jié)期,秋季、春季凍融期的總氨化量和總硝化量占比為一半以上(表1),與內(nèi)蒙古草原土壤總氮轉(zhuǎn)換量的研究結(jié)果相符[2],這一時(shí)期土壤溫度和含水率有所上升,微生物也更加活躍,土壤中氮素礦化過程增長更為明顯[27]。

3.1.2 凍融條件下總氮礦化速率與凈氮礦化速率的關(guān)系

本研究通過對比總氮礦化和凈氮礦化累積量后發(fā)現(xiàn),總氮礦化累積量為83.29 kg N hm2a-1,凈氮礦化累積量為3.53 kg N hm2a-1,前者是后者的23.59倍(表1)。這一結(jié)果與前人研究相近,表明總礦化累積量和凈礦化累積量的比值約為23倍左右[9]。當(dāng)森林土壤小型無機(jī)氮庫的產(chǎn)生和固定速率較快時(shí),僅考慮凈礦化速率可能會(huì)低估氮的累積量[30]。對內(nèi)華達(dá)山脈森林土壤的研究中,凈氨化年累積量為16—37 kg N hm2a-1,而總氨化量約為此的7倍[31]。

3.1.3 凍融條件下不同群落類型對總氮礦化速率的影響

3.2 凍融條件下土壤溫度、含水率及MBN對總氮礦化的影響

3.2.1 凍融條件下土壤溫度、含水率對總氮礦化的影響

3.2.2 凍融條件下土壤MBN含量對總氮礦化速率的影響

土壤溫度和含水率對土壤氮礦化速率的影響主要是通過改變微生物的生理特征而進(jìn)行[37]。凍融過程使微生物群落數(shù)量及多樣性顯著降低,當(dāng)土壤微生物死亡后,殘余微生物利用其營養(yǎng)物質(zhì)的恢復(fù)力直接決定土壤氮礦化周轉(zhuǎn)能力[37]。隨著土壤MBN含量增加,總氨化速率顯著增加(P<0.01, 表3)。相關(guān)研究表明,凍融對土壤微生物區(qū)系、數(shù)量和酶活性上均有影響[38]。當(dāng)土壤溫度下降時(shí),土壤中冰晶體的膨脹和擴(kuò)充使得微生物細(xì)胞膜和細(xì)胞壁有機(jī)械損傷,從而導(dǎo)致細(xì)胞形態(tài)發(fā)生變化[38]；另外當(dāng)土壤水凍結(jié)時(shí),水溶液發(fā)生濃縮,微生物細(xì)胞滲透壓失去平衡,細(xì)胞膜流動(dòng)性減少,導(dǎo)致細(xì)胞受到傷害[38]。

在本研究中,群落類型和凍融過程對MBN有極顯著的影響(P<0.01, 表2)。這與奧地利溫帶山毛櫸林土壤觀察的現(xiàn)象相似,微生物生物量的周轉(zhuǎn)和演替是土壤中可利用氮的主要來源[39],凍融期土壤中MBN的累積可能會(huì)改善不同生態(tài)系統(tǒng)的氮利用效率(表2, 表3)。因?yàn)?種群落類型土壤的結(jié)構(gòu)和孔隙度不同,當(dāng)凍融事件發(fā)生時(shí)土壤孔隙中儲(chǔ)存的水分和氧氣均會(huì)有所變化,當(dāng)氧氣擴(kuò)散到達(dá)一定限度時(shí),微生物的有氧活動(dòng)減少,氮礦化速率受到影響[40]。因此土壤溫度、含水率和MBN是控制氮循環(huán)和微生物活性的主要因素。土壤氮素可利用性及其對氣候變化的響應(yīng)是預(yù)測氣候變化背景下陸地生態(tài)系統(tǒng)碳、氮收支的關(guān)鍵之處[40]。由于全新世時(shí)期天山林區(qū)的濕度值一直在增加[41],春、秋季凍融循環(huán)過程也受到影響,總氮礦化過程對凍融循環(huán)響應(yīng)的量化工作能夠在一定程度上反映陸地生態(tài)系統(tǒng)的氮循環(huán)過程。

4 結(jié)論

綜上所述,在天山林區(qū),凍融期內(nèi)土壤以總氨化過程為主；秋、春凍融期總氮礦化累積量占全年的一半以上,并且凍融期的總氮礦化速率相比凍結(jié)期更高；對不同的群落類型而言,凍融過程對總氨化速率和總硝化速率的影響差異明顯。未來應(yīng)進(jìn)一步探究凍融條件下土壤氮礦化與碳礦化的協(xié)同效應(yīng)及其氮素轉(zhuǎn)化的關(guān)鍵微生物過程與機(jī)制,進(jìn)而了解天山云杉森林中各類氮轉(zhuǎn)化過程之間的關(guān)聯(lián)性。