張志紅，李新愛(ài)

(1.榮成市人和中心衛(wèi)生院，山東 威海 264306；2.解放軍第960醫(yī)院南院區(qū)，山東 濟(jì)南 25002)

隨著人口老齡化的加劇，衰老已成為全球醫(yī)學(xué)研究的熱點(diǎn)問(wèn)題，其中不乏對(duì)衰老機(jī)制及抗衰老藥物的研究。一直以來(lái)人們便有追求延年益壽、青春永駐的理想，因中醫(yī)、中藥抗衰老有著兩千多年的豐富經(jīng)驗(yàn)，其以獨(dú)特的方法和理論體系占有一席之地。枸杞、靈芝作為傳統(tǒng)中藥，其提取物均含有豐富的活性成分—多糖，現(xiàn)代研究證實(shí)，枸杞多糖、靈芝多糖均具有較強(qiáng)的抗氧化、抗衰老作用[1-4]。中藥紅景天由申佳佳等經(jīng)試驗(yàn)證實(shí)，其功效成分紅景天苷能提高動(dòng)物體內(nèi)的不同器官組織的SOD、GSH-Px活性，降低體內(nèi)的過(guò)氧化物水平而發(fā)揮抗衰老作用[5]。

此外，葡萄籽原花青素的抗氧化活性一直被研究界所推崇，其作為一種雙黃酮衍生物結(jié)構(gòu)的天然多酚類，抗氧化能力是維生素E的50倍，維生素C的20倍[6]。葡萄籽原花青素的多個(gè)酚羥基，在體內(nèi)被氧化釋放出H+，競(jìng)爭(zhēng)性地與自由基及氧化物結(jié)合，從而防止脂質(zhì)氧化，阻斷自由基鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，降低血清中MDA含量，增強(qiáng)SOD、GSH-Px活性，從而強(qiáng)化機(jī)體的抗氧化系統(tǒng)[7]。

文章選擇枸杞提取物、靈芝提取物、紅景天提取物、葡萄籽提取物作為原料制成復(fù)方葡萄籽原花青素制劑，設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)探究其安全性和抗氧化作用。

1 材料與方法

1.1 受試樣品及服用方法

復(fù)方葡萄籽原花青素制劑由本實(shí)驗(yàn)進(jìn)行制備，人體推薦日用量為2.2g/60kg.bw。該受試樣品原料由枸杞子提取物、紅景天提取物、靈芝提取物、葡萄籽提取物按37∶36∶18∶9經(jīng)混合工藝制成。

1.2 納入人群

選擇在年齡45～60歲自愿受試者，性別不限，身體健康良好，無(wú)長(zhǎng)期服藥史，無(wú)重要臟器既往病史的人員。此外，需排除短期內(nèi)服用與抗氧化作用功能有關(guān)的食品藥品、未按規(guī)定服用受試樣品者。

1.3 設(shè)計(jì)與分組

試食實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)自身和組間對(duì)照，依據(jù)雙盲法進(jìn)行。實(shí)驗(yàn)前測(cè)定受試者血清中丙二醛(MDA)、超氧化物岐化酶(SOD)、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)水平。根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，隨機(jī)分為試食組和對(duì)照組。為保證組間的可比性，對(duì)年齡、性別、生活飲食習(xí)慣等影響結(jié)果的因素進(jìn)行均衡性檢驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)每組受試者60例，連續(xù)服用120 d，試驗(yàn)期間依據(jù)之前的飲食習(xí)慣。

2 觀察指標(biāo)

2.1 一般指標(biāo)

試食前詳細(xì)了解受試者的精神、睡眠、飲食、大小便、體重、血壓、心率等基本的健康情況。

2.2 功效性指標(biāo)

在試驗(yàn)開(kāi)始及結(jié)束時(shí)各檢測(cè)1次MDA、SOD、GSH-Px水平。

2.3 安全性指標(biāo)

受試者進(jìn)行血常規(guī)、尿常規(guī)、糞便常規(guī)檢查、血液生化檢測(cè)(血清總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AST)、膽固醇(TC)、甘油三脂(TG)、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、尿酸(UA)、血糖(GLU))、以及進(jìn)行心電圖、腹部B超等檢查，各項(xiàng)指標(biāo)在試驗(yàn)開(kāi)始及結(jié)束時(shí)各檢測(cè)1次。

3 結(jié)果判定

實(shí)驗(yàn)結(jié)果依據(jù)國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局《關(guān)于印發(fā)抗氧化功能評(píng)價(jià)方法等9個(gè)保健功能評(píng)價(jià)方法的通知(國(guó)食藥監(jiān)保化[2012]107號(hào))》附件1 抗氧化功能評(píng)價(jià)方法進(jìn)行判定。此外，實(shí)驗(yàn)前后自身比較和試驗(yàn)后組間比較，功效性指標(biāo)差異具有顯著性，該指標(biāo)判定為陽(yáng)性。

4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

5 結(jié)果

5.1 一般觀察

試食組和對(duì)照組經(jīng)過(guò)120 d試食實(shí)驗(yàn)后，有效人數(shù)各為56例，受試者一般基礎(chǔ)性指標(biāo)(如精神、睡眠、飲食、大小便)均未見(jiàn)異常，狀況均良好。試食組和對(duì)照組男女比例分別為26/30，27/29，年齡分別為(46.23±6.78)歲、(46.18±7.12)歲。

5.2 功效性觀察

試驗(yàn)前后受試者的血清MDA、SOD、GSH-Px水平變化情況見(jiàn)表1。試食組和對(duì)照組試驗(yàn)前各指標(biāo)相比較，兩組水平接近，差異無(wú)顯著性(P>0.05)。試驗(yàn)后試食組較同期對(duì)照組和自身比較，血清中MDA活性下降，SOD、GSH-Px活性明顯升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

表1 試食前后受試者的MDA、SOD、GSH-Px水平變化情況

5.3 安全性觀察

由表2實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，試食前后試食組和對(duì)照組體重、血壓、心率、血常規(guī)、尿常規(guī)、糞便常規(guī)、心電圖、腹部B超等檢查均未見(jiàn)顯著改變，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；血生化各指標(biāo)試驗(yàn)前后試食組和對(duì)照組經(jīng)比較，均無(wú)顯著變化，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，說(shuō)明本實(shí)驗(yàn)試食樣品和對(duì)照樣品對(duì)受試者的肝腎功能及代謝等無(wú)明顯影響，對(duì)健康無(wú)損害作用。

表2 試食前后受試者的安全性指標(biāo)的變化

6 討論

本實(shí)驗(yàn)受試物為枸杞子提取物、紅景天提取物、靈芝提取物、葡萄籽提取物經(jīng)混合制成，各原料均具有抗氧化、延緩衰老的作用。現(xiàn)代研究表明，氧化脅迫是導(dǎo)致生物機(jī)體衰老的一個(gè)重要原因，此外還與很多機(jī)體疾病直接相關(guān)，如酒精含量過(guò)高引起的肝損傷及老年癡呆癥等[8]。隨著機(jī)體細(xì)胞內(nèi)氧化損傷的累積，細(xì)胞機(jī)能開(kāi)始減弱，從而引發(fā)各種慢性疾病的發(fā)生，最終導(dǎo)致機(jī)體的衰老及死亡。廣泛存在生物體內(nèi)的超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-PX)均是清除超氧陰離子自由基的酶，其能維持機(jī)體氧化-抗氧化平衡，能阻止超氧陰離子自由基對(duì)細(xì)胞的毒害作用[9]。丙二醛(MDA)則是細(xì)胞膜脂質(zhì)過(guò)氧化的終產(chǎn)物之一，其含量可間接估計(jì)脂質(zhì)過(guò)氧化的程度。因此，SOD、GSH-PX、MDA均可反映機(jī)體的抗氧化能力[10]。

本實(shí)驗(yàn)試食期間，不改變兩組受試者的精神、睡眠、飲食等情況，實(shí)驗(yàn)消除了組間差異，保證結(jié)果的公平和客觀。由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，兩組受試者體重、血壓、心率、血常規(guī)、尿常規(guī)、糞便常規(guī)、血生化、心電圖、腹部B超等均未見(jiàn)明顯損害，說(shuō)明受試物具有安全性。實(shí)驗(yàn)后MDA水平明顯下降，SOD、GSH-Px水平明顯升高，與實(shí)驗(yàn)前及對(duì)照組比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，受試樣品復(fù)方葡萄籽原花青素制劑對(duì)人體具有明確的抗氧化作用。