藺兆星，郭博陽，王耀斐，干 娜，賀 琪，李 鴿，朱參勝

（陜西省地方病防治研究所/陜西省皮膚性病防治所,西安710003）

梅毒是由梅毒螺旋體感染人引起的慢性、系統(tǒng)性性傳播疾病，同時也可在子宮內(nèi)發(fā)生母嬰傳播，嚴(yán)重危害人體（包括新生兒）的健康[1]。梅毒的血清學(xué)檢測是目前梅毒實驗室診斷的重要依據(jù)，對梅毒患者的臨床診斷與治療，以及梅毒傳染病疫情的及時上報意義重大。梅毒的實驗室血清學(xué)檢測方法根據(jù)檢測對象的不同分為兩大類，一是以檢測梅毒螺旋體特異性抗體的梅毒螺旋體血清學(xué)試驗，二是以檢測梅毒螺旋體非特異性抗體的非梅毒螺旋體血清學(xué)試驗[2]。為進(jìn)一步提高我省二級及以上醫(yī)療衛(wèi)生機構(gòu)的臨床實驗室梅毒血清學(xué)檢測水平，陜西省皮膚性病防治所組織全省386家醫(yī)療衛(wèi)生機構(gòu)開展了2018～2019年臨床實驗室梅毒血清學(xué)室間質(zhì)量評價活動，現(xiàn)將結(jié)果分析報道如下。

1 材料與方法

1.1 參控實驗室 陜西省二級及以上醫(yī)療衛(wèi)生機構(gòu)共386家參與了本次梅毒血清學(xué)檢測室間質(zhì)量評價活動，包括綜合醫(yī)療機構(gòu)308家，婦幼機構(gòu)63家，疾病預(yù)防控制中心14家，第三方醫(yī)學(xué)檢驗機構(gòu)1家，其中經(jīng)省性病中心實驗室驗收合格的規(guī)范化性病實驗室24家。

1.2 參控樣本 梅毒血清參控樣本統(tǒng)一采購自北京金豪制藥股份有限公司，所有參控樣本均已滅活處理，但仍需按照傳染性樣本對待。參控樣本儲存于2～8℃，在冷藏運輸?shù)臈l件下分發(fā)至全省386家參控實驗室。預(yù)期值參照生產(chǎn)廠商提供的說明書。

1.3 方法 每家參控實驗室收到1套（5支）參控樣本，1份質(zhì)評說明書。要求各參控實驗室在建議檢測期內(nèi)，用各自實驗室常規(guī)使用的梅毒血清學(xué)檢測方法，分別對5支參控樣本進(jìn)行梅毒螺旋體血清學(xué)試驗以及非梅毒螺旋體血清學(xué)定性和定量試驗檢測。按要求在規(guī)定時間內(nèi)通過陜西省梅毒質(zhì)評系統(tǒng)向省性病中心實驗室網(wǎng)報質(zhì)評活動的所有結(jié)果。質(zhì)評結(jié)果總分100分，其中梅毒螺旋體血清學(xué)試驗和非梅毒螺旋體血清學(xué)定量試驗各占50分。每支參控樣本與預(yù)期值一致得10分，漏報或與預(yù)期值不一致得0分。綜合得分80分及以上為合格，單項得分40分及以上為合格。

2 結(jié)果

2.1 質(zhì)評成績 見表1。全省參控的386家實驗室全部按時回報了質(zhì)評結(jié)果，上報率為100%。386家參控實驗室得分≥80分的384家，＜80分的2家，全省總合格率為99.48%。梅毒螺旋體血清學(xué)試驗單項得分≥40分的386家，無＜40分的，單項合格率100%。非梅毒螺旋體血清學(xué)定量試驗單項得分≥40分的349家，＜40分的37家，單項合格率90.41%。

表1 2018～2019年陜西省梅毒血清學(xué)室間質(zhì)評成績分布[實驗室數(shù)(%)]

2.2 質(zhì)評符合率 見表2。全省386家參控實驗室的梅毒螺旋體血清學(xué)試驗符合率達(dá)到99.79%，非梅毒螺旋體血清學(xué)定性試驗符合率達(dá)98.91%，而非梅毒螺旋體血清學(xué)定量試驗符合率為91.32%。符合率的計算是按照所檢測項目的檢測符合例數(shù)/該項目實際檢測例數(shù)×100%。

表2 2018～2019年陜西省梅毒血清學(xué)室間質(zhì)評符合率

2.3 檢測方法比較 本次386家參控實驗室所用檢測方法的符合率見表3。

2.4 質(zhì)評錯誤結(jié)果分析 本次質(zhì)評活動全省總計171例結(jié)果回報與預(yù)期值不符，其中非梅毒螺旋體血清學(xué)試驗定量錯誤146例，定性錯誤21例（TRUST假陰性15例，RPR假陰性6例）。梅毒螺旋體血清學(xué)試驗定性錯誤4例（TP-CLIA，TP-ELISA，TP-RT假陰性各1例，TP-CLIA假陽性1例）。

3 討論

梅毒血清學(xué)檢測是目前實驗室檢測梅毒的主要手段。通過臨床實驗室準(zhǔn)確的梅毒血清學(xué)檢測結(jié)果，結(jié)合患者流行病學(xué)史和臨床表現(xiàn)，才能對患者是否感染梅毒、梅毒的分期、隱性梅毒或是胎傳梅毒作出正確診斷[3]。開展室間質(zhì)評活動有利于評估并提高全省各參控實驗室的梅毒血清學(xué)檢測能力，同時也是實現(xiàn)全省規(guī)范化性病實驗室全面建設(shè)的基礎(chǔ)前提[4]。

本次2018～2019年全省梅毒室間質(zhì)評活動，為了評估各臨床實驗室梅毒血清學(xué)的實際檢測能力，只將梅毒螺旋體血清學(xué)試驗和非梅毒螺旋體血清學(xué)定量試驗的參控樣本檢測成績納入考核，且二者各占50%。在實際工作中，根據(jù)考評的側(cè)重點不同，也有報道參控樣本的檢測成績只占質(zhì)評總成績的50%，剩余50%則為現(xiàn)場督導(dǎo)檢查評分[5]，該類評分標(biāo)準(zhǔn)最終反映的是參控實驗室的綜合檢測能力。此外，在本次室間質(zhì)評活動中，雖然考評了非梅毒螺旋體血清學(xué)定性試驗但并未算入考核成績，是因為其包含在了非梅毒螺旋體血清學(xué)定量試驗中，而后者除了能夠反映定性結(jié)果外，還可反映出參控實驗室對定量結(jié)果滴度判讀的準(zhǔn)確性。

表3 不同梅毒血清學(xué)檢測方法的符合率

在梅毒螺旋體血清學(xué)試驗、非梅毒螺旋體血清學(xué)定性和定量試驗符合率方面，與其他省份梅毒血清學(xué)檢測室間質(zhì)評報告的符合率情況大體一致，同時本次質(zhì)評非梅毒螺旋體血清學(xué)試驗的符合率只達(dá)到91.32%，同樣相對低于梅毒螺旋體血清學(xué)試驗[6-8]。從參控實驗室性質(zhì)來看，第三方醫(yī)學(xué)檢驗機構(gòu)三項符合率均達(dá)到了100%；婦幼機構(gòu)各項符合率次之，分別為100%，99.37%和94.29%，排名第二；而參控數(shù)量最多的綜合醫(yī)院由于檢驗水平不齊，整體符合率低于婦幼機構(gòu)而排名第三；最后整體符合率最低的是疾控機構(gòu)分別為98.57%，98.57%和90.00%。提示除了對全省各級醫(yī)療機構(gòu)進(jìn)行培訓(xùn)外，也應(yīng)加強對疾控機構(gòu)梅毒相關(guān)檢測人員的技術(shù)培訓(xùn)。

從檢測方法來看，在梅毒螺旋體血清學(xué)試驗中，雖然梅毒螺旋體明膠顆粒凝集實驗(TPPA)是梅毒螺旋體血清學(xué)試驗的金標(biāo)準(zhǔn)且符合率較高，但由于該方法對操作人員水平有較高要求且不能實現(xiàn)自動化，所以多數(shù)參控實驗室選擇酶聯(lián)免疫法（213家）或是化學(xué)發(fā)光法（81家）進(jìn)行替代，而在多數(shù)條件有限的參控實驗室（58家）中，免疫層析快檢法也受到廣泛應(yīng)用，上述三種方法本次回報的符合率均在99.5%以上；在非梅毒螺旋體血清學(xué)定量試驗中，甲苯胺紅不加熱血清試驗(TRUST)和快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(RPR)作為目前臨床應(yīng)用最廣的兩種方法，其使用實驗室數(shù)相近，分別為223家和163家，且二者在定量檢測中的符合率也相近，分別為91.25%和91.41%。

對此次質(zhì)評活動171例錯誤結(jié)果具體分析如下：①非梅毒螺旋體血清學(xué)定量試驗錯誤最多，共計146例，其中128例高于預(yù)期值范圍，而剩余的18例則低于預(yù)期值范圍，此外上述錯誤接近4/5都是與預(yù)期值范圍只差一個滴度；②非梅毒螺旋體血清學(xué)定性試驗的21例錯誤結(jié)果均為假陰性，除1家參控實驗室出現(xiàn)明顯失誤將滴度范圍在1∶4～1∶16的參控樣本回報成了陰性外，其余20例都是將滴度范圍在1∶1～1∶4的參控樣本回報成了陰性；③最后在梅毒螺旋體血清學(xué)試驗的4例定性錯誤結(jié)果中出現(xiàn)了1例假陽性，可能是由于該參控實驗室所用化學(xué)發(fā)光法過于敏感導(dǎo)致。雖然梅毒螺旋體血清學(xué)檢測靈敏度和特異度更高的免疫印跡法尚未在全省的臨床實驗室中應(yīng)用[9]，但本次質(zhì)評出現(xiàn)的大多數(shù)錯誤并不是檢測方法造成的，而是可以通過規(guī)范檢測操作來避免的。

本次室間質(zhì)評活動，全省386家二級及以上醫(yī)療機構(gòu)只有2家參控實驗室存在非梅毒螺旋體血清學(xué)定量試驗單項漏報的情況，整體上報率較2014年的97.4%有了很大改善，可以看出各參控實驗室的主動性有所提高，這與近年來在全省積極開展臨床實驗室性病檢測技術(shù)培訓(xùn)和規(guī)范化性病實驗室驗收密不可分。各市（區(qū)）衛(wèi)生行政部門認(rèn)真貫徹落實了《性病防治管理辦法》和《陜西省預(yù)防與控制梅毒規(guī)劃（2010～2020年）》，今年全省參控實驗室數(shù)由2014年的341家增長至386家，覆蓋了全省12個市（區(qū)），而總合格率也由2014年的70.97%上升至99.48%，非梅毒螺旋體血清學(xué)定性和定量試驗的符合率也由2014年的97.69%和76.16%分別上升至98.91%和91.32%[10]。此外，全省非梅毒螺旋體血清學(xué)定量試驗還存在很大提升空間，今后需要加強此方面的技術(shù)培訓(xùn)和規(guī)范化性病實驗室的驗收督導(dǎo)工作，從而進(jìn)一步提高全省梅毒血清學(xué)檢測水平。