于彩霞，鞏云霏，閆 蘇，孫國(guó)宗，趙江彥，王會(huì)芳

（涿州市醫(yī)院檢驗(yàn)科，河北涿州 072750）

絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥（postmenopausal osteoporosis，PMOP）是由于雌激素分泌水平降低，導(dǎo)致骨量減少、骨微結(jié)構(gòu)破壞、骨脆性增加，易發(fā)生骨折的一種全身性骨骼疾病。隨著我國(guó)人口老齡化趨勢(shì)加重，PMOP的發(fā)生率逐漸增加，PMOP相關(guān)的疼痛和繼發(fā)骨折嚴(yán)重影響女性健康及生活質(zhì)量[1-2]。近期的研究表明，視黃醇結(jié)合蛋白4（retinol binding protein 4,RBP4）作為一個(gè)新的脂肪因子，具有調(diào)節(jié)骨代謝及骨骼細(xì)胞等的作用[3]。骨橋蛋白（osteopontin,OPN）是一種重要的多功能糖蛋白，在骨質(zhì)疏松引起的血管重構(gòu)過程中發(fā)揮著重要的調(diào)節(jié)作用[4]。為此，本研究通過分析絕經(jīng)后婦女血清RBP4及OPN水平與骨密度（bone mineral density,BMD）的關(guān)系，探討其在PMOP中的應(yīng)用價(jià)值，旨在為PMOP的早期防治及診療提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 研究對(duì)象 收集2015年1月～2018年3月涿州市醫(yī)院收治的絕經(jīng)后婦女。排除標(biāo)準(zhǔn)：患有內(nèi)分泌系統(tǒng)疾病，類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、卵巢切除、惡性腫瘤及嚴(yán)重心、肝、腎疾病者；6個(gè)月內(nèi)服用影響骨代謝藥物，不能配合本次研究者。最終有262例絕經(jīng)后婦女入組，年齡60～84歲，平均年齡68.50±7.24歲。本研究與患者或家屬簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 骨質(zhì)疏松癥的診斷標(biāo)準(zhǔn)：參照WHO推薦的診斷方法，以標(biāo)準(zhǔn)差（s）值和T值來定量骨密度，進(jìn)而定義骨質(zhì)疏松和低骨量。

1.2.2 BMD測(cè)量：采用美國(guó)GE公司的Lunar Prodigy Advance PA+300164型雙能X線骨密度儀（DEXA）測(cè)定。測(cè)量受試者腰椎1-4（L1-4）和左側(cè)股骨頸（femeral neck,FN）骨密度。BMD均由同一位技術(shù)人員進(jìn)行測(cè)量，受試者平仰臥位行L1-4正位骨掃描，雙下肢屈膝位行股骨頸掃描。

1.2.3 檢測(cè)指標(biāo)：采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)血清RBP4及OPN水平，試劑盒由美國(guó)R&D公司提供。采用全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀及其配套試劑盒檢測(cè)I型原膠原N-端前肽（procollagen type I N-terminal pro peptide,PINP）、β-膠原降解產(chǎn)物（β-crosslaps,β-CTX）、甲狀旁腺素（parathyroid hormone,PTH）和骨鈣素（osteocalcin,OC）水平，貝克曼AU5800型全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)血鈣（Ca）及血磷（P）水平。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)軟件分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，多組均數(shù)比較采用單因素方差分析，兩組間比較采用成組t檢驗(yàn)。繪制受試者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲線分析RBP4及OPN診斷PMOP的價(jià)值。相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)分析。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各年齡段骨質(zhì)疏松人數(shù)分布 262例受試者中48例（18.3%）骨量正常，113例（43.1%）骨量減少，101例（38.5%）骨質(zhì)疏松。70～84歲年齡段74例，發(fā)生骨質(zhì)疏松60例；60～69歲年齡段63例，發(fā)生骨質(zhì)疏松22例；46～59歲年齡段125例，發(fā)生骨質(zhì)疏松19例。70～84歲年齡段發(fā)生骨質(zhì)疏松人數(shù)較60～69歲和46～59歲年齡段明顯增多，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

2.2 各年齡段各指標(biāo)比較 見表1。70～84歲組L1-4及左FN骨密度均明顯低于46～59歲組和60～69歲組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。70～84歲組身高明顯低于46～59歲組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。不同年齡段的各組間，體重、BMI，RBP4及OPN水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

2.3 各組檢測(cè)指標(biāo)比較 見表2。骨質(zhì)疏松組年齡、RBP4及OPN水平均明顯高于骨量減少組和正常組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。骨質(zhì)疏松組血清β-CTX水平明顯高于正常組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。骨質(zhì)疏松組身高、體重及BMI均明顯低于正常組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。各組間血清PINP，PTH，OC，Ca及P水平比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

2.4 血清RBP4水平與各檢測(cè)指標(biāo)的相關(guān)性分析 見表3。Pearson相關(guān)分析結(jié)果顯示，血清RBP4水平與年齡，β-CTX及OPN呈正相關(guān)（r=0.316，0.305，0.446，均P＜0.05），與Ca，L1-4及左FN骨密度呈負(fù)相關(guān)（r=-0.268，-0.437，-0.419，均P＜0.05）。骨質(zhì)疏松癥組血清RBP4水平與β-CTX及OPN呈正相關(guān)（r=0.291，0.491，均P＜0.05），與Ca，L1-4及左FN骨密度呈負(fù)相關(guān)（r=-0.247，-0.513，-0.486，均P＜0.05）。

表1 各年齡段各指標(biāo)比較（±s）

表1 各年齡段各指標(biāo)比較（±s）

注：檢驗(yàn)水準(zhǔn)α＝0.05；*與46～59歲組比較，P＜0.05;Δ與60～69歲組比較，P＜0.05。

項(xiàng)目 46～59歲（n=125）60～69歲（n=63）70～84歲（n=74）F P身高（cm）159.62±4.15 157.40±4.26 154.82±4.20* 4.503 0.012體重（kg）60.34±8.16 59.27±8.40 57.30±7.84 1.392 0.141 BMI（kg/m2）24.16±2.85 23.90±2.74 23.68±2.82 0.351 0.735 BMD（L1-4）1.12±0.18 0.92±0.13 0.79±0.14*Δ 8.927 ＜0.001 BMD（左FN）0.90±0.16 0.75±0.08 0.63±0.07*Δ 7.804 ＜0.001 RBP4（μg/ml）18.25±4.10 19.14±4.36 21.37±4.52 0.936 0.228 OPN（ng/ml）10.75±3.40 11.64±4.27 12.15±4.38 1.429 0.125

表2 各組檢測(cè)指標(biāo)比較（±s）

表2 各組檢測(cè)指標(biāo)比較（±s）

注：檢驗(yàn)水準(zhǔn)α＝0.05；*與正常組比較，P＜0.05;Δ與骨量減少組比較，P＜0.05。

項(xiàng)目 正常組（n=48）骨量減少組（n=113）骨質(zhì)疏松組（n=101）F P FP年齡（歲）55.40±6.72 58.23±7.64 70.84±9.73*Δ 4.731 0.008身高（cm）159.70±4.24 157.86±4.30 153.96±4.13*Δ 3.974 0.025體重（kg）62.36±8.25 60.34±8.53 56.57±7.58* 4.315 0.016 BMI（kg/m2）25.50±3.16 23.94±2.86 22.47±2.75* 3.482 0.034 PINP（μg/L）41.60±14.83 44.83±17.32 52.63±28.40 1.804 0.093 β-CTX（μg/L）0.30±0.14 0.41±0.19 0.54±0.32* 4.497 0.013 PTH（pmol/L）13.58±6.94 12.72±7.13 10.64±7.20 0.342 0.746 OC（μg/L）2.80±1.35 3.20±1.94 3.56±1.82 0.901 0.262 Ca（mmol/L）2.32±0.15 2.30±0.13 2.27±0.16 0.227 0.875 P（mmol/L）1.31±0.22 1.29±0.26 1.24±0.15 0.884 0.316 RBP4（μg/ml）15.30±3.87 18.46±4.25* 25.13±4.74*Δ 4.913 0.004 OPN（ng/ml）8.24±3.13 10.47±3.46* 13.58±4.42*Δ 6.924 ＜0.001

表3 血清RBP4水平與各檢測(cè)指標(biāo)的相關(guān)性分析

2.5 血清OPN水平與各檢測(cè)指標(biāo)的相關(guān)性分析 見表4。血清OPN水平與年齡，β-CTX呈正相關(guān)（r=0.356，0.312，均P＜0.05），與Ca，L1-4及左FN骨密度呈負(fù)相關(guān)（r=-0.302，-0.478，-0.502，均P＜0.05）。骨質(zhì)疏松癥組血清OPN水平與β-CTX呈正相關(guān)（r=0.284，P＜0.05），與Ca，L1-4及左FN骨密度呈負(fù)相關(guān)（r=-0.265，-0.556，-0.574，均P＜0.05）。

2.6 血清RBP4及OPN水平對(duì)PMOP的診斷價(jià)值 血清RBP4水平最佳截值為21.53μg/ml時(shí)診斷PMOP的敏感度和特異度分別為87.3%和80.2%，ROC曲線下面積（area under curve,AUC）為0.890。血清OPN水平最佳截值為12.27 ng/ml時(shí)診斷PMOP的敏感度和特異度分別為90.4%和83.5%，ROC曲線下面積（area under curve,AUC）為0.928。

3 討論

PMOP早期癥狀不典型，若認(rèn)識(shí)不夠，往往導(dǎo)致漏診，并可發(fā)生骨質(zhì)疏松性骨折，對(duì)女性患者的生命健康和生活質(zhì)量造成極大的危害。RBP4是一種轉(zhuǎn)運(yùn)維生素A類運(yùn)載蛋白，血清RBP4水平升高與氧化應(yīng)激反應(yīng)和炎性因子增加相關(guān)，進(jìn)而參與骨代謝疾病的發(fā)生發(fā)展[5]。OPN是一種帶負(fù)電的非膠原性骨基質(zhì)糖蛋白，通過促進(jìn)破骨細(xì)胞和骨基質(zhì)的附著，增加破骨細(xì)胞的活性，抑制骨組織的礦化過程，在骨質(zhì)疏松骨代謝過程中發(fā)揮著重要作用[6]。

表4 血清OPN水平與各檢測(cè)指標(biāo)的相關(guān)性分析

本研究結(jié)果顯示，骨質(zhì)疏松組血清RBP4及OPN水平均明顯高于骨量減少組和正常組，提示血清RBP4及OPN水平在PMOP中明顯升高，其與PMOP的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。CHO等[7]研究顯示，PMOP婦女血清OPN水平明顯升高，且與低腰椎BMD相關(guān)。譚昱等[8]研究也發(fā)現(xiàn)，骨量減少組和骨質(zhì)疏松組血清OPN水平較正常對(duì)照組明顯升高，且骨質(zhì)疏松組明顯高于骨量減少組，提示OPN可能是影響絕經(jīng)后婦女腰椎骨量丟失的重要因子。亦有研究顯示，調(diào)整骨質(zhì)疏松組其他影響因素后，血清RBP4在所有部位與骨密度呈正相關(guān)[9]。相關(guān)分析顯示，骨質(zhì)疏松癥組血清RBP4及OPN水平與β-CTX呈正相關(guān)，與L1-4及左FN骨密度呈負(fù)相關(guān)，而骨量減少組與β-CTX及骨密度均無相關(guān)性。說明在骨量減少組RBP4及OPN對(duì)骨轉(zhuǎn)換水平和骨量無影響，而在骨質(zhì)疏松癥RBP4及OPN水平升高，對(duì)PMOP的骨代謝起到負(fù)向調(diào)節(jié)骨量作用。本研究中Ca與RBP4及OPN水平呈顯著負(fù)相關(guān)，提示增加鈣攝入量可在一定程度上增加BMD。由此推測(cè)，補(bǔ)鈣可降低RBP4及OPN水平，從而達(dá)到防治骨質(zhì)疏松的目的。陳思敏等[10]對(duì)125例絕經(jīng)后女性進(jìn)行研究，也發(fā)現(xiàn)高血清OPN水平與低BMD，高β-CTX水平及鈣缺乏相關(guān)。ROC曲線顯示，血清RBP4及OPN水平為21.53μg/ml和12.27 ng/ml是診斷PMOP的最佳截值，其曲線下面積為0.890和0.928。提示血清RBP4及OPN水平對(duì)PMOP診斷具有一定的價(jià)值。CHANG等[11]研究顯示，血清OPN水平＞14.7ng/ml是引起圍絕經(jīng)期骨質(zhì)疏松的重要危險(xiǎn)因子，與OPN≤14.7ng/ml相比，發(fā)生骨質(zhì)疏松的風(fēng)險(xiǎn)高2.97倍。FODOR等[12]對(duì)204例PMOP患者血清OPN水平進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)高水平的OPN與低腰椎BMD，高骨轉(zhuǎn)換水平相關(guān)，且血清OPN水平診斷PMOP的臨界值為9.47μg/L。另有研究表明，血清OPN水平與絕經(jīng)后婦女BMD呈負(fù)相關(guān)，與骨轉(zhuǎn)換水平呈正相關(guān)，OPN診斷絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松的臨界值為10.1 ng/ml，敏感度為89.5%，特異度為70.8%，曲線下面積為0.953[13]。

綜上所述，血清RBP4及OPN水平在PMOP中明顯高表達(dá)，且與低BMD，β-CTX水平及鈣缺乏相關(guān)，該結(jié)果提示了RBP4及OPN可能影響絕經(jīng)后婦女腰椎和左側(cè)股骨頸的骨量丟失。