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        血清抗核抗體熒光核型及抗核抗體譜檢測在系統(tǒng)性紅斑狼瘡診斷中的應(yīng)用價(jià)值分析

        2020-07-26 11:13:50劉衛(wèi)霞龐愛梅郭緒曉
        關(guān)鍵詞:抗核核型敏感度

        劉衛(wèi)霞,龐愛梅,郭緒曉,張 恒

        (山東中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科,濟(jì)南 250011)

        系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemic lupus erythematosus,SLE)是一種機(jī)體免疫功能紊亂導(dǎo)致的多器官系統(tǒng)受累的自身免疫性疾病。它的發(fā)病機(jī)制尚不清楚,遺傳、環(huán)境和激素水平的變化導(dǎo)致機(jī)體免疫失調(diào)和對(duì)自身抗原的耐受性破壞,導(dǎo)致自身抗體產(chǎn)生、炎性介質(zhì)形成和內(nèi)臟器官的破壞。SLE異質(zhì)性高,復(fù)發(fā)和緩解交替出現(xiàn),病程復(fù)雜,容易漏診、誤診。充分認(rèn)識(shí)預(yù)測SLE發(fā)生、發(fā)展和惡化的生物標(biāo)志物有助于該病的診斷和治療??购丝贵w(antinuclear antibody,ANA)是SLE病人體內(nèi)出現(xiàn)較早且常見的抗體,近年來發(fā)展了多種手段來檢測病人體內(nèi)的抗核抗體,其中用間接免疫熒光法檢測抗核抗體熒光核型和用線性免疫印跡法檢測抗體的具體類型是近年發(fā)展起來的用來檢測抗核抗體的方法,在某些醫(yī)院已經(jīng)得到廣泛應(yīng)用,但關(guān)于二者在SLE診斷中的價(jià)值還沒有明確的報(bào)道。本研究就兩種方法在SLE診斷中的價(jià)值做一具體分析,以便更好地推廣二者在SLE診斷中的應(yīng)用,利于病人的治療。

        1 材料和方法

        1.1 研究對(duì)象 選取2018年10月~2019年10月山東中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院門診及住院SLE患者135例,其中男性6例,女性129例,年齡14~65歲,平均年齡38.8±14.8歲,所有患者均符合1997年美國風(fēng)濕病學(xué)會(huì)修訂的SLE診斷標(biāo)準(zhǔn)。另外選擇同期診治的非SLE風(fēng)濕性疾病病人96例作為疾病對(duì)照組。其中男性10例,女性86例,年齡18~76歲,平均年齡45.3±15.8歲。包括類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎66例,舍格倫綜合征10例,皮肌炎10例,混合性結(jié)締組織病8例,系統(tǒng)性硬化癥2例,均符合診斷標(biāo)準(zhǔn)。另外選取本院查體中心體檢健康者96例作為健康對(duì)照組,其中男性11例,女性85例,年齡20~75歲,平均年齡38.9±16.8歲。

        1.2 試劑和儀器 ANA熒光核型分析采用德國歐蒙公司生產(chǎn)的ANA熒光核型檢測試劑盒,ANA譜分析采用德國歐蒙公司生產(chǎn)的ANA譜檢測試劑盒。

        1.3 方法 采集受檢者靜脈血3ml于真空采血管中,3 500r/min離心5min,取血清檢測。ANA熒光核型分析采用間接免疫熒光法,采用HEp-2/猴肝細(xì)胞兩種生物薄片進(jìn)行檢測,以ANA滴度>1∶100為陽性。ANA譜分析采用線性免疫印跡法,線性條帶的強(qiáng)度用掃描儀掃描,然后用軟件EUROLineScan分析,定性為-,+,++,+++。

        1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS19.0軟件進(jìn)行處理。計(jì)數(shù)資料采用卡方檢驗(yàn),檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

        2 結(jié)果

        2.1 SLE病人ANA熒光核型分析 135例SLE病人ANA陽性率為99.3%,顯著高于疾病對(duì)照組(75.0%)和健康對(duì)照組(4.5%),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。其熒光核型主要包括核顆粒型63例(46.7%),核均質(zhì)型30例(22.2%),胞漿型18例(13.3%),均質(zhì)胞漿混合型15例(11.1%),均顯著高于疾病對(duì)照組和健康對(duì)照組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)。

        表1 SLE病人ANA譜陽性率分析[n(%)]

        2.2 SLE病人ANA譜分析 見表1。用LIA法分析SLE病人ANA譜,發(fā)現(xiàn)在SLE病人中,雙鏈DNA(dsDNA)抗體、Ro52-抗體、SSA抗體、抗體分子核糖核蛋白(nRNP)抗體、抗核小體(NUC)抗體、抗核糖體P蛋白(RIB)抗體、抗組蛋白(HI)抗體、Smith(Sm)抗體和SSB抗體的陽性率(即抗體的敏感度)均顯著高于疾病對(duì)照組和健康對(duì)照組(均P<0.05)。敏感度較高的九種抗體特異度分別為dsDNA抗體(99.0%)、Ro52-抗體(89.1%)、SSA抗體(92.1%)、nRNP抗體(95.8%)、NUC抗體(99.0%)、RIB抗體(99.0%)、HI抗體(99.0%)、Sm抗體(99.0%)和SSB抗體(96.9%),可以看出九種抗體的特異度都比較高。

        2.3 SLE病人不同ANA熒光核型對(duì)應(yīng)的抗核抗體種類的比較 見表2。我們比較了SLE病人不同的ANA熒光核型對(duì)應(yīng)抗核抗體的種類,發(fā)現(xiàn)不同的熒光核型對(duì)應(yīng)的抗核抗體種類不同。

        表2 SLE病人不同的ANA熒光核型對(duì)應(yīng)的抗核抗體種類的比較[n(%)]

        可以看出,核顆粒型熒光核型以抗nRNP抗體和dsDNA抗體為主,核均質(zhì)型以dsDNA抗體和NUC抗體為主,胞漿型以RIB抗體和dsDNA抗體為主,均質(zhì)胞漿混合型以dsDNA抗體和HI抗體為主。四種熒光核型共有的抗體是dsDNA抗體,所以dsDNA抗體是SLE病人最為特異的抗體。

        3 討論

        系統(tǒng)性紅斑狼瘡是一種病人體內(nèi)出現(xiàn)自身抗體導(dǎo)致的多器官系統(tǒng)受累的自身免疫性疾病??购丝贵w是一組將自身真核細(xì)胞的各種成分脫氧核糖核蛋白、DNA,可提取的核抗原和RNA作為靶抗原的自身抗體的總稱。本研究發(fā)現(xiàn)135例SLE病人ANA陽性率達(dá)99.3%,說明SLE病人體內(nèi)都存在抗核抗體。我們對(duì)SLE病人的ANA譜進(jìn)行了具體分析,發(fā)現(xiàn)dsDNA抗體、nRNP抗體和NUC抗體是SLE病人較為敏感和特異的抗體,可以作為SLE病人的標(biāo)志性抗體。

        dsDNA抗體是SLE病人最為敏感和特異的抗體,敏感度為57.8%,特異度達(dá)99.0%,所以dsDNA抗體可以用作SLE篩查首選的血清學(xué)指標(biāo),這與多位作者的研究結(jié)果一致[1-3]。美國風(fēng)濕病學(xué)會(huì)早在1997年已將抗dsDNA抗體納入診斷SLE的重要分類標(biāo)準(zhǔn)之一。dsDNA抗體參與SLE多種臨床表現(xiàn)的發(fā)生,與SLE患者的心臟損害、肝臟損害及神經(jīng)損害等有密切關(guān)系,且滴度越高,病損程度越嚴(yán)重[4]。

        其次nRNP抗體也是SLE病人較為敏感和特異的抗體,敏感度為48.8%,特異度達(dá)95.8%。nRNP抗體與混合性結(jié)締組織病關(guān)系最為密切,常被用來區(qū)分結(jié)締組織病和非結(jié)締組織病,SLE患者體內(nèi)抗nRNP抗體高滴度常提示與其他風(fēng)濕性疾?。ㄈ缍喟l(fā)性肌炎、系統(tǒng)性硬化癥)有重疊??筺RNP抗體與疾病的活動(dòng)性相關(guān),有研究表明,SLE患者抗nRNP抗體陽性組發(fā)熱、關(guān)節(jié)炎和雷諾現(xiàn)象的發(fā)生率較陰性組高[5]。

        抗核小體抗體(NUC抗體)也是SEL病人出現(xiàn)的較為敏感和特異的抗體,敏感度為40%,特異度達(dá)99.0%。SLE抗體產(chǎn)生的機(jī)制尚未闡明,認(rèn)為凋亡缺陷是SLE病理生理的關(guān)鍵機(jī)制,核小體被認(rèn)為是SLE的主要抗原。NUC抗體對(duì)SLE診斷的敏感度和特異度均較高,用于SLE的診斷可信度為90%,尤其對(duì)于抗dsDNA陰性的SLE患者,NUC更具有診斷價(jià)值[6-7]。

        Sm抗體對(duì)SLE有較高的特異度,對(duì)于早期的、治療預(yù)后的判斷有很大幫助,但檢出率低,本研究結(jié)果顯示,Sm抗體的敏感度為20%,與文獻(xiàn)報(bào)道一致[4,7]。由于檢出率低,在一定程度上影響了SLE的診斷。

        Ro52-抗體和SSA抗體雖然在SLE病人中也有較高的陽性率,但在舍格倫綜合征(SS)患者最常見,常被認(rèn)為是SS的標(biāo)志性抗體。

        綜上所述,ANA核型分析對(duì)于SLE的診斷敏感度較高,但特異度低(僅達(dá)60.4%),而ANA譜分析尤其dsDNA抗體、nRNP抗體和NUC抗體這三種抗體對(duì)于SLE的診斷敏感度和特異度均很高,對(duì)SLE的診斷和預(yù)后有很高的利用價(jià)值。我們?cè)谂R床工作中要注意將ANA核型分析與ANA譜檢測這兩種方法聯(lián)合起來應(yīng)用,以利于SLE 病人的診斷和治療。

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