趙寅生，易小敏，屠昌明，黃其峰，吳黎黎，賈健安

(中國(guó)人民解放軍聯(lián)勤保障部隊(duì)第901醫(yī)院a.檢驗(yàn)科，b.泌尿外科，合肥 230031)

前列腺炎是成年男性中的一種常見(jiàn)病，相關(guān)研究表明成年男性中前列腺炎發(fā)病率約為8.2%[1]，慢性前列腺炎對(duì)患者生活質(zhì)量具有嚴(yán)重的生理及心理上的影響[2]。根據(jù)1997年美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生研究院（National Institutes of Health，NIH）對(duì)前列腺炎的分類，即 NIH分類法[3]，前列腺炎可分為3型：NIH-Ⅱ型：慢性細(xì)菌性前列腺炎；NIH-Ⅲ型：慢性前列腺炎/慢性骨盆疼痛綜合征；NIH-Ⅳ型：無(wú)癥狀前列腺炎。由于缺乏特異性的診斷指標(biāo)，前列腺炎的診斷及病情評(píng)估需要較多的臨床評(píng)估方法及鑒別診斷，傳統(tǒng)的檢查方法包括尿液分析、前列腺按摩液檢查和直腸指檢[4]，后兩種方法對(duì)患者具有一定侵入性，患者就診體驗(yàn)較差，且不同操作者之間存在較大的操作差異，因此尋找一種無(wú)侵入性同時(shí)又準(zhǔn)確的診斷指標(biāo)具有重要的臨床意義。

前列腺小體是由前列腺上皮細(xì)胞分泌的一種納米級(jí)囊泡，在精液及前列腺液中含量較多。通常情況下，少量前列腺小體分泌至尿道中，隨尿液排出[5]，當(dāng)前列腺發(fā)生炎癥時(shí)，尿液中前列腺小體中部分蛋白成分可顯著升高，其中前列腺小體外泌蛋白（prostatic exosomal protein，PSEP）升高明顯，是慢性前列腺炎的潛在指標(biāo)，因此本研究評(píng)價(jià)了該指標(biāo)在慢性前列腺炎診斷中的價(jià)值。

1 材料與方法

1.1 研究對(duì)象 依據(jù)《前列腺炎診斷治療指南(2014版)》[6]中慢性前列腺炎臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)，納入自 2018年7～10月于我院就診的慢性前列腺炎患者 102例，選擇同期于我院體檢健康的70例健康男性作為對(duì)照組。慢性前列腺炎患者及健康對(duì)照組均常規(guī)行尿常規(guī)分析、PSEP測(cè)定。在經(jīng)過(guò)醫(yī)院倫理委員會(huì)討論通過(guò)后進(jìn)行該研究。同時(shí)排除急性前列腺炎患者、48h內(nèi)有性生活者、前列腺癌患者、有嚴(yán)重的臟器功能疾病、由于行為障礙不能配合者、二周以內(nèi)插入導(dǎo)尿管者、有嚴(yán)重的肛周部位疾病及不適合做前列腺按摩檢測(cè)者、病情危重，難以對(duì)安全性和有效性做出確切評(píng)價(jià)者。

1.2 試劑和儀器 酶標(biāo)儀購(gòu)自于美國(guó)伯樂(lè)公司，PSEP試劑盒購(gòu)自江蘇太倉(cāng)昂科生物技術(shù)有限公司。

1.3 方法 采集慢性前列腺炎患者前列腺按摩前中段尿，收集健康體檢者隨機(jī)尿，均置入－80℃冰箱保存?zhèn)溆?。根?jù)PSEP試劑盒操作說(shuō)明對(duì)收集的尿液樣本采用間接 ELISA方法進(jìn)行檢測(cè)，根據(jù)試劑盒內(nèi)的不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品A值建立實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)曲線，將患者標(biāo)本的檢測(cè)數(shù)值同標(biāo)準(zhǔn)孔數(shù)值進(jìn)行比較，計(jì)算測(cè)試樣本的PSEP濃度值。比較前列腺炎組與對(duì)照組尿液PSEP濃度的差異，同時(shí)建立ROC曲線來(lái)初步確定一個(gè)最佳診斷界值(Cutoff值),據(jù)此值來(lái)計(jì)算靈敏度和特異度。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 運(yùn)用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。慢性前列腺炎患者和健康對(duì)照組的PSEP差異比較采用秩和檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 前列腺炎組與對(duì)照組PSEP比較 前列腺炎組與對(duì)照組中位年齡分別為36（25～56）歲及38（27～59）歲，年齡分布差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。兩組尿液PSEP結(jié)果均呈非正態(tài)分布。前列腺炎組PSEP顯著高于對(duì)照組[3.002（1.728～3.966）ng/ml vs 0.869（0.565～1.094）ng/ml]，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.001）。

2.2 ROC結(jié)果 見(jiàn)圖1。對(duì)前列腺小體外泄蛋白檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行ROC曲線擬合，ROC曲線下面積為0.922，選擇Youden指數(shù)最大的點(diǎn)對(duì)應(yīng)的值作為慢性前列腺炎的診斷標(biāo)準(zhǔn)，得出Cutoff值為1.238 ng/ml,相對(duì)應(yīng)的敏感度為86.27%，特異度為90%。

圖1 ROC曲線

3 討論

慢性前列腺炎的癥狀包括骨盆區(qū)域疼痛、尿道刺激癥、神經(jīng)癥狀及性功能障礙，其臨床表現(xiàn)缺少特異性，診斷主要依靠前列腺按摩液常規(guī)檢查[6]（前列腺炎診斷治療指南），患者對(duì)前列腺按摩液常規(guī)檢查接收度較差，從而間接影響了疾病的診治，因此尋找一種方便快捷的無(wú)侵入性指標(biāo)具有重要的意義。

前列腺小體結(jié)構(gòu)為亞細(xì)胞的囊泡狀，生理功能多樣廣泛，直徑為40～500nm，通過(guò)前列腺上皮細(xì)胞胞吐作用后再分泌進(jìn)入前列腺液和尿液[5，7]。前列腺小體的脂質(zhì)成分大部分為鞘磷脂，也含有少量的核酸成分，如DNA，mRNA，miRNA等小片段。同時(shí)前列腺小體還包含百余種蛋白質(zhì)成分：其中包括酶類，運(yùn)輸和結(jié)構(gòu)類蛋白，信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白，GTP結(jié)合蛋白，注釋蛋白，分子伴侶等等[7]。

由于解剖結(jié)構(gòu)的關(guān)系，前列腺小體容易進(jìn)入前列腺液和尿液中。隨著研究深入，PSEP與前列腺疾病的關(guān)系引起研究者的廣泛關(guān)注，因組織受到炎細(xì)胞浸潤(rùn)，慢性前列腺炎患者體內(nèi)會(huì)釋放出各種活性物質(zhì)和趨化因子，在精液中前列腺小體的抗菌功能比中性粒細(xì)胞發(fā)揮更強(qiáng)。前列腺小體的抗氧化性可起到中和白細(xì)胞的ROS作用。前列腺小體具有抗氧化抗菌功能的關(guān)鍵是其特殊的脂質(zhì)結(jié)構(gòu)和成分，因此在前列腺炎疾病中可以檢測(cè)到前列腺小體蛋白[8].

本研究中采用了ELISA方法，檢測(cè)了102例慢性前列腺炎患者及70例健康體檢者尿液中PSEP含量。與健康人群相比，慢性前列腺炎患者PSEP濃度平均高達(dá)3.002（1.728～3.966）ng/ml，顯著高于健康人群[0.869（0.565～1.094）ng/ml]（P＜0.001）。其鑒別慢性前列腺炎患者與健康人群的ROC曲線下面積高達(dá)0.922，高于相關(guān)研究結(jié)果[9]，本研究中根據(jù)Youden指數(shù)選擇的最佳實(shí)驗(yàn)室臨界值設(shè)為1.238 ng/ml，與相關(guān)研究結(jié)果接近[10]，稍高于試劑盒推薦的慢性前列腺炎診斷臨界值（1.2ng/ml），提示各實(shí)驗(yàn)室在實(shí)際應(yīng)用時(shí)應(yīng)建立本實(shí)驗(yàn)室的參考區(qū)間。

由于PSEP檢測(cè)使用尿液標(biāo)本，具有極好的患者依從性，同時(shí)其診斷敏感度與特異度均較高，因此具備成為慢性前列腺炎診斷指標(biāo)的潛力，具有較好的臨床應(yīng)用價(jià)值。