劉輝 志蘭

【摘要】目的 非小細(xì)胞肺癌VEGFR-2與XAGE-1b基因表達(dá)關(guān)系進(jìn)行研究。方法 抽取我院于2017年5月～2019年5月間收治的患有非小細(xì)胞肺癌的20例患者作為研究的對(duì)象，提取所選患者的總RNA，利用RT-PCR技術(shù)將XAGE-1b基因擴(kuò)增，同時(shí)檢測VEGFR-2的表達(dá)。研究其表達(dá)是否具有相關(guān)性。結(jié)果 XAGE-1b陽性的患者其體內(nèi)VEGFR-2的表達(dá)量也越高，通過多元回歸分析顯示，病理類型和VEGFR-2的表達(dá)量影響XAGE-1b基因。結(jié)論 對(duì)于非小細(xì)胞肺癌的患者來說，VEGFR-2和XAGE-1b基因的表達(dá)量成正相關(guān)，抗血管生成療法和免疫療法相結(jié)合的治療措施適宜的患者可能為VEGFR-2的表達(dá)量高且體內(nèi)含有XAGE-1b基因。

【關(guān)鍵詞】非小細(xì)胞肺癌;VEGFR-2;XAGE-1b基因

【中圖分類號(hào)】R734.2 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A 【文章編號(hào)】ISSN.2095.6681.2020.15..01

近幾年，在結(jié)直腸癌以及肺癌等腫瘤疾病中抗血管生成療法取得顯著的療效。形成新生血管時(shí)VEGFR-2發(fā)揮著重要的作用，同時(shí)亦是許多抗血管生成藥物[1]。用CTA承載樹突狀細(xì)胞以此來組成腫瘤疫苗為一種比較常見的抗腫瘤免疫治療措施，此次研究采用的便是CTA中的一員— XAGE-1b蛋白，其負(fù)載樹突狀細(xì)胞在體外組建肺癌疫苗[2]。為了評(píng)價(jià)非小細(xì)胞肺癌VEGFR-2與XAGE-1b基因表達(dá)關(guān)系，我院對(duì)其開展了深入的探究，現(xiàn)詳細(xì)報(bào)道如下：

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本

使用已經(jīng)檢測XAGE-1b基因表達(dá)水平的20例非小細(xì)胞癌患者的mRNA/cDNA標(biāo)本，進(jìn)行mRNA的提取、鑒定質(zhì)量以及將mRNA通過逆轉(zhuǎn)錄使其生成cDNA。

1.2 探針與引物

以GenBank （Accession No.：NM_ 002253.1）之中VEGFR-2的序列為參考設(shè)計(jì)探針與引物，其內(nèi)參為β-actin。

為了構(gòu)建實(shí)時(shí)的PCR標(biāo)準(zhǔn)曲線，利用特異性引物通過逆轉(zhuǎn)錄PCR將β-actin與VEGFR-2擴(kuò)增，鑒定測序，利用A260將標(biāo)準(zhǔn)品DNA進(jìn)行定量，使用超純水來使其連續(xù)稀釋以致范圍在每微升107～101拷貝，取出1 uL將其當(dāng)作樣本檢測的一個(gè)定量標(biāo)準(zhǔn)。

1.3 實(shí)時(shí)PCR定量

20 uL的反應(yīng)體系之中檢測β-actin與VEGFR-2的含量，首先進(jìn)行PCR反應(yīng)。實(shí)施PCR反應(yīng)的條件主要包括：2分鐘50℃，10分鐘95℃，隨后進(jìn)行15秒95℃以及1分鐘60℃ ，進(jìn)行40個(gè)循環(huán)。所有的樣本均需進(jìn)行重復(fù)兩次測定，定量檢測的結(jié)果為其均值。

若患者XAGE-1b為陽性其VEGFR-2的表達(dá)量也偏高。在α為0.05時(shí)，把VEGFR-2的表達(dá)量與患者的臨床特征一起代入多元logistic的回歸分析之中，結(jié)果表明，VEGFR-2的表達(dá)量 （其比值比為14.812 ， 95%可信區(qū)間為1.281～172.150，P為0.032）與病理類型（其比值比為0.071， 95%可信區(qū)間0.006～0.779，P為0.032）為影響XAGE-1b表達(dá)的因素。

2 討 論

為了研究在非小細(xì)胞癌治療之中免疫治療聯(lián)合抗血管生成療法的可行性，本次研究中檢測同時(shí)分析了在免疫治療中其靶點(diǎn)XAGE-1b和抗血管生成治療中其靶點(diǎn)VEGFR-2表達(dá)的關(guān)聯(lián)性，結(jié)果表面，XAGE-1b和VEGFR-2的表達(dá)量呈現(xiàn)正相關(guān)，即XAGE-1b表達(dá)陽性的患者其VEGFR-2的表達(dá)量偏高，同時(shí)多元logistic回歸分析表明，VEGFR-2的表達(dá)量影響XAGE-1b的表達(dá)。研究結(jié)果表明，抗血管生成療法和免疫療法相結(jié)合的治療措施適宜的患者可能為VEGFR-2的表達(dá)量高且體內(nèi)含有XAGE-1b基因。

參考文獻(xiàn)

[1] 樊慧杰，袁 靜，吳晶晶，et al.VEGFR2多態(tài)性對(duì)貝伐珠單抗聯(lián)合化療一線治療晚期非小細(xì)胞肺癌患者效果及安全性的影響[J].中華醫(yī)學(xué)雜志，2019，99（2）：99-104.

[2] 盧鑒財(cái)，黃 俊，徐韞健，et al.Super-ARMS法在檢測非小細(xì)胞肺癌EGFR基因突變中的應(yīng)用分析[J].熱帶醫(yī)學(xué)雜志，2019（004）：430-433，458.

基金項(xiàng)目：2019年度河南省重點(diǎn)研發(fā)與推廣專項(xiàng)（科技攻關(guān)）項(xiàng)目，項(xiàng)目編號(hào)：192102310316;

項(xiàng)目名稱：XAGE-1b新型疫苗在非小細(xì)胞肺癌免疫治療中的作用及機(jī)制研究