柳 娜，劉越敏，謝田朋，曲 馨，景 明

（甘肅中醫(yī)藥大學(xué)，甘肅 蘭州 730000）

熏倒牛 Biebersteinia heterostemon Maxim.為牻牛兒苗科熏倒牛屬植物，作為一種常用的藏藥，其藥用部位為地上部分。藏名音譯為明見(jiàn)賽保,民間又稱(chēng)為臭花椒、狼尾巴，為藏醫(yī)專(zhuān)用和特色藥材之一[1]?！毒е楸静荨分杏涊d熏倒牛味辛、苦、性寒，具有消腫止痛、清熱解毒、涼血、祛風(fēng)的功效，用于治療各種炎癥、結(jié)核、丹毒、瘧疾、咽喉腫痛、胃痛、全身水腫、卒中等癥[2]。主要分布在甘肅、青海、寧夏、四川等地區(qū)[3]。迄今，關(guān)于熏倒牛的研究報(bào)道多為其化學(xué)成分及藥理藥效作用等方面，而關(guān)于其生藥學(xué)鑒別特征也未見(jiàn)文獻(xiàn)報(bào)道?，F(xiàn)對(duì)熏倒牛的基源、藥材性狀和不同器官的鑒別特征進(jìn)行了生藥學(xué)研究，可為澄清熏倒牛的基源、品種整理和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

熏倒牛藥材于2018年10月采自定西市安定區(qū)團(tuán)結(jié)鎮(zhèn)聯(lián)莊村，由甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)陳垣教授鑒定為Biebersteinia heterostemon Maxim.將其根 莖、葉、種子福爾馬林溶液浸泡保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 儀器與試劑

顯微成像儀(尼康-80i型，上海德沃斯科技儀器有限公司)；電子天平（型號(hào)：ME103E/02，梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司）；無(wú)水乙醇、水合氯醛、二甲苯、硅膠、鹽酸、切片石蠟、正丁醇、甲酸、乙酸均為分析純。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 熏倒牛原植物形態(tài)鑒別

對(duì)熏倒牛原植物的根、莖、葉、花等形狀、顏色、大小進(jìn)行觀察[4-7]。

1.3.2 石蠟切片鑒別

取熏倒牛的根、莖、葉和種子，用清水洗干凈后自然晾干，選出特征完整的藥材用刀片切成小段備用，進(jìn)行梯度脫水后，二甲苯透明處理，再進(jìn)行包埋與修整，切片和粘片，脫蠟，用番紅-固綠染色，最后用中性膠進(jìn)行封片處理。

1.3.3 粉末鑒定

取熏倒牛的根、莖、葉、果實(shí)和種子置于60℃烘箱中烘干，分別粉碎處理后，過(guò)60目篩，備用。分別取少量的藥材粉末置于干凈的載玻片上加入2滴水合氯醛，置于酒精燈上加熱透化處理后，靜置放涼，滴半滴稀甘油，傾斜45℃蓋上蓋玻片，擠壓出裝片中殘留氣泡，從蓋玻片一側(cè)輕輕吸出多余的殘液，采用光學(xué)顯微鏡觀察各器官中細(xì)胞組織的形態(tài)特征。

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.1 熏倒牛的性狀鑒別

根粗壯,紡錘形,稀分枝,表皮褐色和黃褐色，上半部分為疏生為枯萎的葉柄的殘余覆蓋。莖直立，呈圓柱狀，有明顯的縱棱,表皮黃棕色至棕褐色,密被黑色腺毛和柔毛,質(zhì)脆,橫斷面不整齊,髓白色或空心。多葉少枝，有棕色托葉，葉互生,呈倒披針形，,葉片2～3回羽狀深裂或全裂；小裂片條狀披針形,皺縮；著生長(zhǎng)黃褐色柔毛和腺?；ㄐ蜷L(zhǎng)，葉狀苞片，披針形，為單毛所覆蓋，邊緣全緣，先端漸尖，花瓣5,倒卵形,淡黃色,排列緊密,與萼片等長(zhǎng)或稍短?；ㄝ?,宿存,黑色,被腺毛和柔毛。 花期 5～8月，味苦,氣濃臭。

2.2 熏倒牛組織切片特征

2.2.1 根

熏倒牛根部橫切面木栓層排列3層細(xì)胞，射線(xiàn)將維管束分為16～18束不等，維管束由外依次向內(nèi)為初生韌皮部、次生韌皮部、形成層、次生木質(zhì)部、初生木質(zhì)部。如圖1所示。

2.2.2 莖

莖橫切面組織皮層細(xì)胞排列3～4列，維管束被射線(xiàn)分成20～25束不等，形成層明顯，維管束由外向內(nèi)依次為：中柱鞘纖維、韌皮部、形成層、木質(zhì)部、髓部中空。如圖2所示。

圖2 熏倒牛莖部顯微橫切圖

2.2.3 葉

熏倒牛葉表皮一層細(xì)胞排列緊密的類(lèi)方形細(xì)胞構(gòu)成，表面由氣孔和非腺毛，少為腺毛。類(lèi)圓柱形柵欄組織細(xì)胞緊貼于上表皮細(xì)胞，與上表皮細(xì)胞垂直。海綿組織細(xì)胞間隙大，位于柵欄組織與下表皮細(xì)胞之間，下表皮細(xì)胞也有一層排列緊密的細(xì)胞，細(xì)胞下方是2～3層的厚角組織細(xì)胞。葉片主脈維管束屬于外韌型，導(dǎo)管多為梯紋導(dǎo)管，如圖3所示。

圖3 熏倒牛葉部顯微橫切圖

2.2.4 種子

熏倒牛種皮為1列棕褐色的厚壁細(xì)胞，細(xì)胞類(lèi)方形，外壁互相連接，相鄰細(xì)胞間有間隙；胚乳細(xì)胞多層，排列緊密，內(nèi)含較多的淀粉粒及脂肪油滴；胚偏于一側(cè)，細(xì)胞呈不規(guī)則方形環(huán)狀排列，如圖4所示。

圖4 熏倒牛種子橫切圖

2.3 熏倒牛粉末特征

2.3.1 根粉末特征

熏倒牛根的干燥粉末呈棕褐色，用顯微鏡觀察其裝片可見(jiàn)細(xì)胞組織中的梯紋、網(wǎng)紋導(dǎo)管，多以梯紋導(dǎo)管為主，單個(gè)或束聚分布，纖維為長(zhǎng)梭形，直徑為13～15mm，木栓細(xì)胞分布較多，多呈不規(guī)則方形，薄壁細(xì)胞為長(zhǎng)方形，可見(jiàn)清晰的孔紋。

圖5 熏倒牛根部粉末特征圖

2.3.2 莖粉末特征

熏倒牛莖部的干燥粉末為黃棕色，細(xì)胞組織中石細(xì)胞、木纖維、導(dǎo)管及木栓組織多呈棕黃色，木纖維為長(zhǎng)梭形，直徑為 11～15mm，細(xì)胞壁厚 2.0～3.0mm，大部分束聚存在。網(wǎng)紋和梯紋導(dǎo)管散在或束聚分布，直徑約為10～15mm。石細(xì)胞散在，直徑為15～22mm，壁厚 3.0～6.5mm，多呈不規(guī)則形，孔紋較明顯。 木栓細(xì)胞破碎或聚集分布。薄壁細(xì)胞呈方形或類(lèi)圓形，可見(jiàn)清晰的孔紋。

圖6 熏倒牛莖部粉末特征圖

2.3.3 葉粉末特征

熏倒牛葉粉末呈淡綠色，用顯微觀察粉末裝片可見(jiàn)少數(shù)不定式氣孔，呈鐮刀狀彎曲的非腺毛散在，頂端呈鈍圓形，基部較窄，寬10～13mm。導(dǎo)管以網(wǎng)紋和梯紋導(dǎo)管居多，直徑為 6.5～15.5mm，多數(shù)呈束聚集。柵欄組織有3～6列細(xì)胞排列，薄壁細(xì)胞分布較多，多呈類(lèi)方形，木栓細(xì)胞破碎散在，壁厚2.5～3.5mm，纖維細(xì)胞表面凸起，有孔溝。

圖7 熏倒牛葉部細(xì)胞顯微特征

2.3.4 種子粉末特征

熏倒牛種子粉末呈棕褐色，種皮柵狀細(xì)胞呈多角形，直徑約為18mm，木質(zhì)化，壁厚。內(nèi)種皮細(xì)胞呈類(lèi)方形，壁連珠狀增厚，胚乳細(xì)胞呈多角形，呈無(wú)色，內(nèi)嵌直徑約10mm的糊粉粒，石細(xì)胞類(lèi)圓形散在，胞腔大。

3 討論

藏藥熏倒牛各部位顯微特征明顯。（1）根部橫切面木栓層排列3層細(xì)胞，纖維束發(fā)達(dá)，維管束層次明顯。粉末裝片可見(jiàn)細(xì)胞組織中多以梯紋導(dǎo)管為主，木纖維為長(zhǎng)梭形，直徑為13～15mm，木栓細(xì)胞分布較多，多呈不規(guī)則方形，薄壁細(xì)胞為長(zhǎng)方形，可見(jiàn)清晰的孔紋。（2）莖部橫切面皮層細(xì)胞排列3～4列，維管束射線(xiàn)較多，木質(zhì)部與韌皮部界線(xiàn)明顯，髓部大，中空。粉末裝片中可見(jiàn)木纖維為長(zhǎng)梭形 ，大部分束聚存在。網(wǎng)紋和梯紋導(dǎo)管散在或束聚分布，直徑約為10～15mm。不規(guī)則形石細(xì)胞散在，直徑為15～22mm，壁厚 3.0～6.5mm，木栓多呈四邊形，薄壁細(xì)胞呈方形或類(lèi)圓形，可見(jiàn)清晰的孔紋。（3）葉片切片中柵欄組織細(xì)胞緊貼于上表皮細(xì)胞，與上表皮細(xì)胞垂直，由導(dǎo)管分布。海綿組織細(xì)胞間隙大，下表皮細(xì)胞也有一層排列緊密的細(xì)胞，細(xì)胞下方是2～3層的厚角組織細(xì)胞。粉末裝片可見(jiàn)少數(shù)不定式氣孔，和非腺毛散在，導(dǎo)管以網(wǎng)紋和梯紋導(dǎo)管居多，直徑為 6.5～15.5mm，多數(shù)呈束聚集。 柵欄組織有 3～6 列細(xì)胞排列，薄壁細(xì)胞分布較多，多呈類(lèi)方形，木栓細(xì)胞破碎散在，壁厚 2.5～3.5mm，纖維細(xì)胞表面凸起，有孔溝。（4）種子顯微切片可見(jiàn)種皮為1列棕褐色的厚壁細(xì)胞，胚乳細(xì)胞多層，內(nèi)含較多的淀粉粒及脂肪油滴；胚偏于一側(cè)，細(xì)胞呈不規(guī)則方形環(huán)狀排列。粉末裝片可見(jiàn)種皮柵狀細(xì)胞呈多角形，直徑約為18mm，木化，壁厚。內(nèi)種皮細(xì)胞呈類(lèi)方形，壁連珠狀增厚，胚乳細(xì)胞呈多角形，呈無(wú)色，內(nèi)嵌直徑約10mm的糊粉粒，石細(xì)胞類(lèi)圓形散在，胞腔大。以上特征可作為熏倒牛生藥學(xué)鑒定的依據(jù)。