何 丹，孔鈺婷，宋洪波,2,*，安風(fēng)平，黃 群,2

（1.福建農(nóng)林大學(xué)食品科學(xué)學(xué)院，福建 福州 350002；2.福建農(nóng)林大學(xué) 福建省特種淀粉品質(zhì)科學(xué)與加工技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，福建 福州 350002）

西番蓮（Passiflora edulis）原產(chǎn)于南美洲，在許多熱帶和亞熱帶國(guó)家均有種植，是最受歡迎的濃郁芳香水果之一，近年來(lái)在我國(guó)廣西、廣東、江西及福建等省已規(guī)模種植。西番蓮具有豐富的營(yíng)養(yǎng)成分及促健康作用[1]，目前其加工以果汁和濃縮果汁為主[2]，果皮（占果實(shí)質(zhì)量的50%～55%）通常被廢棄。研究報(bào)道，紫果西番蓮果皮中含有豐富的果膠、膳食纖維、黃酮類(lèi)化合物及花色苷，其花色苷含量比藍(lán)莓、桑葚和葡萄等水果高[3-5]?；ㄉ帐翘烊簧氐闹饕煞种?，可賦予水果、蔬菜和花卉等植物藍(lán)色、紅色和紫色[6]。研究表明，花色苷能夠改善胰島素抵抗和保護(hù)β細(xì)胞[7]，作用機(jī)制主要與其抗氧化活性有關(guān)，也可能與對(duì)酶的抑制作用或其他途徑存在關(guān)聯(lián)[8]；此外，花色苷還能夠抑制和減少促炎細(xì)胞因子的分泌，使其具有一定的抗炎[9]和抗糖尿病活性[10]。本研究旨在明確紫果西番蓮果皮中花色苷的組成，評(píng)估其中花色苷的體外抗氧化活性及其對(duì)2型糖尿病相關(guān)酶活力的抑制作用，通過(guò)模擬胃腸道消化對(duì)其生物利用度進(jìn)行初步研究，以期為紫果西番蓮果皮中花色苷的開(kāi)發(fā)利用提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

‘紫香1號(hào)’紫果西番蓮購(gòu)于福建省龍巖市漳平市拱橋鎮(zhèn)。

無(wú)水乙醇、鹽酸、氯化鉀和無(wú)水乙酸鈉（均為分析純）國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；矢車(chē)菊素-3-葡萄糖苷（cyanidin-3-glucoside，C3G） 法國(guó)Extrasynthese公司；D101型大孔吸附樹(shù)脂 艾美科?。ㄖ袊?guó)）生物醫(yī)藥有限公司；α-淀粉酶（50 U/mg）、α-葡萄糖苷酶（50 U/mg）、胃蛋白酶（30 000 U/mg）、膽汁鹽、胰蛋白酶（2 500 U/mg）、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl，DPPH）、對(duì)硝基苯基-α-D-吡喃葡萄糖苷（p-nitrophenylα-D-glucopyranoside，PNPG）、3,5-二硝基水楊酸（3,5-dinitrosalicylic acid，DNS） 上海源葉生物有限公司；2,2’-聯(lián)氮-雙(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二銨鹽（2,2’-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid)diammonium salt，ABTS） 阿拉丁試劑（上海）有限公司。

1.2 儀器與設(shè)備

TGL-16型臺(tái)式高速冷凍離心機(jī) 四川蜀科儀器有限公司；1260型高效液相色譜儀、6520型高效液相色譜-四極桿飛行時(shí)間-串聯(lián)質(zhì)譜（high performance liquid chromatography quadrupole-time-of-flight-tandem mass spectrometry，HPLC-QTOF-MS/MS） 美國(guó)安捷倫公司；UV-1780紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)、Inertsustain C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm） 日本島津公司；定制玻璃層析柱（170 cm×5 cm） 福州昱安正茂玻璃儀器有限公司。

1.3 方法

1.3.1 紫果西番蓮果皮的處理

將紫果西番蓮果皮用40 ℃熱風(fēng)干燥至水分質(zhì)量分?jǐn)?shù)為（8.0±0.5）%，粉碎后過(guò)40 目（0.45 mm）篩，于-18 ℃避光保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3.2 紫果西番蓮果皮花色苷的提取

稱(chēng)取100 g樣品與5 L體積分?jǐn)?shù)60%乙醇溶液（含體積分?jǐn)?shù)0.1% HCl）于燒杯中混合，保鮮膜封口，于黑暗環(huán)境下提取24 h，（0.097±0.005）MPa減壓抽濾進(jìn)行固液分離，固體殘?jiān)谏鲜鰲l件下重復(fù)提取3 次，合并濾液。濾液于2 555×g、20 ℃離心10 min，（38±1）℃減壓濃縮（（0.097±0.005）MPa）并回收乙醇，將濃縮液冷凍干燥，即為粗提物。于-18 ℃避光保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3.3 紫果西番蓮果皮花色苷的純化

用蒸餾水將花色苷粗提物配制質(zhì)量濃度為（17.35±0.62）mg/L的溶液。層析柱填料為D101型大孔吸附樹(shù)脂，床體積為2 L；上樣流速5 mL/min，泄漏量為10%時(shí)停止上樣；先用10 L、pH（2.5±0.05）的HCl溶液以10 mL/min的流速進(jìn)行洗脫；再用4 L、pH（2.50±0.05）體積分?jǐn)?shù)90%乙醇溶液以5 mL/min的流速進(jìn)行洗脫，收集洗脫液。將洗脫液于（38±1）℃下減壓濃縮（（0.097±0.005）MPa），冷凍干燥制得純化樣品。

1.3.4 紫果西番蓮果皮總花色苷含量測(cè)定

采用美國(guó)分析化學(xué)家協(xié)會(huì)分析方法中的pH示差法測(cè)定紫果西番蓮果皮花色苷粗提物和純化樣品中的總花色苷含量。

1.3.5 HPLC-二極管陣列檢測(cè)紫果西番蓮果皮花色苷中C3G的含量

用甲醇配制質(zhì)量溶度為1 mg/mL的樣品溶液，過(guò)0.45 μm濾膜待測(cè)。色譜條件：色譜柱：C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流動(dòng)相A：體積分?jǐn)?shù)0.3%甲酸-水溶液，流動(dòng)相B：乙腈；洗脫梯度：0～10 min、13%～25% B；10～12 min、25%～20% B；12～22 min、20%～13% B；檢測(cè)波長(zhǎng)520 nm；柱溫25 ℃；流速1 mL/min；進(jìn)樣量10 μL；外標(biāo)法定量。

1.3.6 HPLC-QTOF-MS/MS鑒定紫果西番蓮果皮花色苷組分

色譜條件與1.3.5節(jié)一致。MS條件：正離子模式；霧化器壓力40 psi；干燥器溫度350 ℃；氣體流量10 L/min；毛細(xì)管電壓3 500 V；裂解電壓135 V；全掃描；掃描范圍m/z 50～1 200[11]。

1.3.7 紫果西番蓮果皮花色苷體外抗氧化活性測(cè)定

1.3.7.1 DPPH自由基清除活性

參照Brand-Williams等[12]的方法，取0.1 mL不同質(zhì)量濃度的樣品溶液（花色苷粗提物、純化樣品和VC）和3.9 mL 0.063 4 mmol/L DPPH-無(wú)水乙醇溶液混合，避光反應(yīng)30 min，用紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)于515 nm波長(zhǎng)處測(cè)定溶液吸光度?？瞻捉M以3.9 mL無(wú)水乙醇溶液代替DPPH溶液。對(duì)照組以0.1 mL無(wú)水乙醇代替樣品溶液。紫果西番蓮果皮花色苷粗提物和純化樣品DPPH自由基清除率按式（1）計(jì)算，并計(jì)算DPPH自由基半抑制濃度（half inhibitory concentration，IC50）。

式中：A0為對(duì)照組溶液吸光度；A1為樣品組溶液吸光度；A2為空白組溶液吸光度。

1.3.7.2 ABTS陽(yáng)離子自由基清除活性

參照Re等[13]的方法，將20mL 7 mmol/L的ABTS溶液與350 μL 140 mmol/L的過(guò)硫酸鉀溶液混合，室溫下避光反應(yīng)14 h，制成ABTS儲(chǔ)備溶液。取15 μL用甲醇配制的不同質(zhì)量濃度的樣品溶液（花色苷粗提物、純化樣品和VC）與185 μL ABTS儲(chǔ)備溶液混合，避光反應(yīng)30 min，用紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)于734 nm波長(zhǎng)處測(cè)定溶液吸光度?？瞻捉M以185 μL甲醇溶液代替ABTS儲(chǔ)備溶液，對(duì)照組以15 μL甲醇溶液代替樣品溶液。根據(jù)式（1）計(jì)算ABTS陽(yáng)離子自由基清除率，并計(jì)算ABTS陽(yáng)離子自由基IC50。

1.3.7.3 鐵離子還原能力

參照Sarkar等[14]的方法并稍作修改，采用鐵離子還原能力（ferric ion reducing antioxidant power，F(xiàn)RAP）法測(cè)定。將300 mmol/L pH 3.6的醋酸鹽緩沖溶液、10 mmol/L二硫蘇糖醇溶液和20 mmol/L FeCl3溶液按體積比10∶1∶1混合配制成FRAP溶液。以FeSO4濃度為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，回歸方程為Y＝0.387 6X+0.184 3（R2＝0.999 6），線性范圍為0.1～1.5 mmol/L。取0.1 mL不同質(zhì)量濃度的樣品溶液（花色苷粗提物、純化樣品和VC）和3.0 mL FRAP溶液混勻，避光反應(yīng)4 min后于593 nm波長(zhǎng)處測(cè)定溶液吸光度。將吸光度代入FeSO4標(biāo)準(zhǔn)曲線，將所得相應(yīng)的FeSO4濃度定義為FRAP，單位為mmol/L。

1.3.8 紫果西番蓮果皮花色苷對(duì)α-淀粉酶及α-葡萄糖苷酶的抑制作用

1.3.8.1α-淀粉酶活性抑制率

參考文獻(xiàn)[15]中的方法并略作改動(dòng)。500 μL 1 U/mL的α-淀粉酶溶液與500 μL 1 mg/mL的樣品溶液（花色苷粗提物和純化樣品）混合，37 ℃預(yù)熱10 min，加入500 μL 1 g/100 mL可溶性淀粉溶液（預(yù)先溶于pH 6.9的磷酸鹽緩沖液（phosphate buffered saline，PBS）并煮沸15 min），37 ℃孵育3 min，加入1 mL DNS顯色劑，于100 ℃水浴5 min，冷卻后將混合物用超純水稀釋4 倍，于520 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度。以pH 7 PBS代替酶溶液為樣品對(duì)照，以pH 7 PBS代替樣品溶液為空白組；以不添加樣品溶液和酶溶液作為空白對(duì)照組。按式（2）計(jì)算α-淀粉酶活性抑制率。以阿卡波糖為陽(yáng)性對(duì)照，將計(jì)算結(jié)果除以阿卡波糖對(duì)α-淀粉酶抑制率（測(cè)定條件相同），紫果西番蓮果皮花色苷對(duì)α-淀粉酶的抑制率以相對(duì)于阿卡波糖的抑制率表示。

1.3.8.2α-葡萄糖苷酶活性抑制率

參考Mojica等[16]的方法并稍作修改。在96 孔板中加入50 μL 1 mg/mL樣品溶液和100 μL 1 U/mL的α-葡萄糖苷酶溶液，37 ℃孵育10 min；加入50 μL 5 mmol/L的PNPG溶液，37 ℃下孵育5 min，于405 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度。按式（2）計(jì)算抑制率。以阿卡波糖為陽(yáng)性對(duì)照，將計(jì)算結(jié)果除以阿卡波糖對(duì)α-葡萄糖苷酶抑制率（測(cè)定條件相同），紫果西番蓮果皮花色苷對(duì)α-葡萄糖苷酶的抑制率以相對(duì)于阿卡波糖的抑制率（%）表示。

1.3.9 紫果西番蓮果皮花色苷的體外生物利用度測(cè)定

參考Sengul等[17]的方法并略作改動(dòng)。將20 mg樣品溶解在20 mL pH 1.7的HCl溶液中，加入25.2 mg胃蛋白酶，37 ℃、100 r/min攪拌2 h，再加入500 mg膽汁鹽和18 mg胰蛋白酶進(jìn)行體外模擬消化。向長(zhǎng)5 cm的纖維素透析管（截留分子質(zhì)量12 kDa）中加入5.6 mL 0.75 mol/L NaHCO3溶液，并將其放入消化液中保持2 h。進(jìn)入管內(nèi)的溶液代表在體內(nèi)吸收并進(jìn)入血清的樣品，通過(guò)pH示差法分析進(jìn)入血清樣品的總花色苷含量。根據(jù)式（3）計(jì)算花色苷的體外生物利用度。

式中：m1為進(jìn)入透析管內(nèi)溶液中的花色苷質(zhì)量/mg；m2為樣品中花色苷的初始質(zhì)量/mg。

1.4 數(shù)據(jù)處理與分析

每組實(shí)驗(yàn)重復(fù)3 次，結(jié)果用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示；采用Graphpad prism 8.0.2軟件進(jìn)行單因素方差分析和t檢驗(yàn)，P＜0.05認(rèn)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果與分析

2.1 紫果西番蓮果皮中花色苷含量及鑒定

圖1 紫果西番蓮果皮花色苷純化樣品及C3G標(biāo)準(zhǔn)品的HPLC圖Fig. 1 High performance liquid chromatography of purified anthocyanins from Passi flora edulisSims peel and C3G standard

表1 紫果西番蓮果皮花色苷的含量及純度Table 1 Anthocyanin contents and purity of crude and purified anthocyanins from Passi flora edulis Sims peel

紫果西番蓮果皮中花色苷粗提物的得率為（3.94±0.11）mg/g。通過(guò)比較純化樣品與C3G標(biāo)準(zhǔn)品的保留時(shí)間（圖1），可以初步推斷紫果西番蓮果皮中的主要花色苷為C3G，這與文獻(xiàn)[17]報(bào)道的結(jié)果一致。由表1可知，純化樣品中總花色苷含量較粗提物提高了（102.27±1.09）mg/g，回收率為（77.87±0.80）%，C3G純度由（51.17±1.97）%提高到（65.26±2.47）%。由此表明通過(guò)D101型大孔樹(shù)脂柱層析進(jìn)行紫果西番蓮果皮花色苷的初步純化是可行的。

圖2 紫果西番蓮果皮花色苷的總離子流圖Fig. 2 Total ion current chromatogram of anthocyanins in Passiflora edulis Sims peel

采用HPLC-QTOF-MS/MS對(duì)純化樣品中的花色苷組分進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。誤差質(zhì)量（δ）作為異核多鍵相關(guān)譜的一個(gè)重要特征，按照δ＜3對(duì)化合物結(jié)構(gòu)進(jìn)行確認(rèn)[20]，紫果西番蓮果皮中花色苷各組分總離子流圖如圖2所示。理論上，花色苷的糖苷化可以在任意位的羥基上發(fā)生，但是某些羥基位置是被優(yōu)先選擇的，如3-OH和5-OH常被糖基取代，而這兩者相比時(shí)，3-OH會(huì)優(yōu)先被糖苷化[21]。本實(shí)驗(yàn)從純化樣品中鑒定出12 種花色苷見(jiàn)表2，結(jié)構(gòu)見(jiàn)圖3。

圖2中峰1～4和峰8均有m/z 287的糖苷配基離子，表明它們是矢車(chē)菊素的糖苷衍生物。根據(jù)峰1的分子離子峰M+m/z 773.214 03和碎片離子峰m/z 611.161 27/449.104 09/287.054 29，峰1被鑒定為矢車(chē)菊素-3-二葡萄糖苷-5-葡萄糖苷。根據(jù)峰2的分子離子峰M+m/z 611.161 51和碎片離子峰m/z 449.112 51（損失m/z 162，葡萄糖）/287.055 91（損失m/z 324，2 分子葡萄糖），因此峰2被鑒定為矢車(chē)菊素-3,5-二葡萄糖苷，該物質(zhì)已在西番蓮花冠中被報(bào)道[22]，但在果皮中鮮見(jiàn)報(bào)道。峰3（分子離子峰M+m/z 449.107 56、碎片離子峰m/z 287.054 20）被鑒定為矢車(chē)菊素-3-葡萄糖苷。峰4的分子離子峰M+m/z 595.166 40及其碎片離子峰m/z 287.059 20，其損失m/z 308對(duì)應(yīng)于矢車(chē)菊素-3-蕓香糖苷中蕓香糖分子（鼠李糖+葡萄糖），因此峰4鑒定為矢車(chē)菊素-3-蕓香糖苷。峰3、4所代表物質(zhì)在西番蓮果皮中已見(jiàn)報(bào)道[23]。峰8（分子離子峰M+m/z 535.107 50，碎片離子峰m/z 449.106 55/287.054 60）被鑒定為矢車(chē)菊素-3-(6”-丙二酰)葡萄糖苷，其在西番蓮果皮[18,24]及花冠[22]中均有報(bào)道。

碎片離子峰m/z 271表明該物質(zhì)的糖苷配基為天竺葵素（峰5和峰10）。根據(jù)峰5的分子離子峰M+m/z 433.112 50及碎片離子峰m/z 271.06 090（損失m/z 162，葡萄糖），被鑒定為天竺葵素-3-葡萄糖苷，其在紫果西番蓮果皮中已有報(bào)道[18]。峰10具有2 個(gè)特征碎片離子峰，分別為m/z 433.112 60（[M]＋-146）和m/z 271.060 81（[M]＋-308），表明糖苷配基與蕓香糖（鼠李糖+葡萄糖）連接。因此，峰10被鑒定為天竺葵素-3-蕓香糖苷。

圖3 紫果西番蓮果皮中花色苷的化學(xué)結(jié)構(gòu)Fig. 3 Structures of anthocyanins in Passiflora edulis Sims peel

根據(jù)峰6和峰12的分子離子峰及碎片離子峰的特征信息，峰6和峰12分別被鑒定為飛燕草素-3-葡萄糖苷和飛燕草素-3-(6”-丙二酰)葡萄糖苷。峰7及峰9的碎片離子峰表明這兩種物質(zhì)均為芍藥素苷（m/z 301）的衍生物。其中峰7的分子離子峰M+m/z 463.124 18，表明其由芍藥素與一分子葡萄糖結(jié)合而成，所以峰7被鑒定為芍藥素-3-葡萄糖苷，其在紫果西番蓮果皮中已見(jiàn)報(bào)道[18]。峰9（分子離子峰M+m/z 549.124 21，碎片離子峰m/z 463.124 00/301.068 40）被鑒定為芍藥素-3-(6”-丙二酰)葡萄糖苷。根據(jù)峰11的質(zhì)譜特征信息，其被鑒定為錦葵色素-3-葡萄糖苷，在西番蓮果皮中已見(jiàn)報(bào)道[19]。

表2 紫果西番蓮果皮花色苷的鑒定及質(zhì)譜特征Table 2 Identification and mass spectrometric properties of anthocyanins from Passi flora edulis Sims peel

2.2 紫果西番蓮果皮花色苷的體外抗氧化活性

圖4 紫果西番蓮果皮花色苷和VC的DPP自由基（A）、ABTS陽(yáng)離子自由基（B）清除活性和FRAP（C）Fig. 4 Scavenging activities of anthocyanins from Passi flora edulis Sims peel and VC on 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl radicals (A), 2,2’-azinobis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) cation radicals (B) and their ferric ion reducing antioxidant power (C)

由圖4可以看出，在質(zhì)量濃度為50～1 000 μg/mL時(shí)，紫果西番蓮果皮花色苷粗提物、純化樣品和VC的DPPH自由基清除率均隨質(zhì)量濃度的增加而增加；質(zhì)量濃度為1 000 μg/mL時(shí)，花色苷純化樣品的DPPH自由基清除率略高于VC、顯著高于粗提物（P＜0.05）；花色苷純化樣品、VC和粗提物對(duì)DPPH自由基的IC50分別為126.6、152.2 μg/mL和604.1 μg/mL。ABTS陽(yáng)離子自由基清除率的變化趨勢(shì)與之類(lèi)似，花色苷純化樣品、VC和粗提物的IC50分別為54.47、58.61 μg/mL和260.2 μg/mL。3 種花色苷樣品的FRAP在質(zhì)量濃度5～80 μg/mL范圍內(nèi)呈增加趨勢(shì)；在80 μg/mL時(shí)，花色苷純化樣品FRAP顯著高于VC和粗提物（P＜0.05），此時(shí)FRAP分別為（1.413±0.051）、（1.277±0.025）mmol/mL和（0.724±0.021）mmol/mL。較高的抗氧化能力通常與花色苷及總酚的含量相關(guān)[31-32]。研究表明，覆盆子、藍(lán)莓中的類(lèi)黃酮化合物（如花色苷）具有優(yōu)于VC的抗氧化能力[33]，可能是由于花色苷的高抗氧化能力與其結(jié)構(gòu)中含有大量酚羥基基團(tuán)有關(guān)[21]。總體而言，本研究發(fā)現(xiàn)紫果西番蓮果皮花色苷純化樣品的抗氧化能力較粗提物顯著提高，且優(yōu)于VC。

2.3 紫果西番蓮果皮花色苷對(duì)α-淀粉酶及α-葡萄糖苷酶的抑制作用

表3 紫果西番蓮果皮花色苷對(duì)α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的抑制率Table 3 Inhibition rates of crude extract and purified anthocyanins from Passi flora edulis Sims peel against α-amylase and α-glucosidase

抑制與2型糖尿病相關(guān)的關(guān)鍵酶（α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶）活力能夠減少脂肪吸收和防止餐后血糖升高，是治療2型糖尿病的早期途徑[34]。花色苷通過(guò)與這些酶結(jié)合，從而影響其活性。Peng Jinming等[35]發(fā)現(xiàn)，黑花生皮的花色苷提取物對(duì)α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的抑制作用具有濃度依賴(lài)性，不同結(jié)構(gòu)的花色苷與酶的結(jié)合能力存在差別。如表3所示，紫果西番蓮果皮花色苷粗提物和純化樣品對(duì)α-淀粉酶活力抑制率分別為（26.76±0.98）%和（34.11±1.47）%，對(duì)α-葡萄糖苷酶活力抑制率分別為（52.87±2.31）%和（60.36±2.05）%，表現(xiàn)出更強(qiáng)的抑制作用。花色苷純化樣品對(duì)兩種酶活力的抑制作用均顯著高于粗提物（P＜0.05）。

紫果西番蓮果皮花色苷粗提物及純化樣品對(duì)α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的抑制作用均不及阿卡波糖，然而，一些用于治療肥胖和2型糖尿病的藥物（奧利司他和阿卡波糖）易引發(fā)如胃腸脹氣、腹瀉和腹脹等不良反應(yīng)，因此常規(guī)藥物與具有生物功效的天然產(chǎn)物聯(lián)用是減輕藥物副作用的新途徑[34]。另一方面，糖尿病人由于血糖升高，糖基化終末期產(chǎn)物和自由基明顯增多，這些自由基會(huì)促進(jìn)炎癥反應(yīng)發(fā)生，這也是糖尿病慢性病變的一個(gè)重要原因，因此抗氧化對(duì)于預(yù)防和延緩糖尿病的慢性并發(fā)癥具有重要作用[36]。

紫果西番蓮果皮花色苷純化樣品具有很好的抗氧化活性和抑制α-淀粉酶及α-葡萄糖苷酶的雙重功效，因此在開(kāi)發(fā)降血糖功能食品或藥物方面具有極大潛力。

2.4 紫果西番蓮果皮花色苷的體外生物利用度

表4 紫果西番蓮果皮花色苷粗提物和純化樣品的生物利用度Table 4 Bioavailability of crude extract and purified anthocyanins from Passi flora edulis Sims peel

生物利用度是指有效成分被吸收進(jìn)入人體循環(huán)的比例，描述了口服物由胃腸道吸收以及經(jīng)過(guò)肝臟到達(dá)體循環(huán)血液中的量占口服劑量的百分比。本實(shí)驗(yàn)采用體外模擬評(píng)價(jià)紫果西番蓮果皮花色苷的生物利用度，從表4可以看出，花色苷純化樣品的生物利用度為（9.78±0.31）%，顯著大于粗提物的（5.45±0.39）%（P＜0.05）。研究表明，覆盆子花色苷粗提物在腸消化過(guò)程中的生物利用度為5.3%[37]，與本研究粗提物體外模擬消化的生物利用度接近。由此可見(jiàn)，紫果西番蓮果皮花色苷純化樣品具有更高的生物利用度。

3 結(jié) 論

基于保留時(shí)間和二級(jí)質(zhì)譜數(shù)據(jù)，初步鑒定出紫果西番蓮果皮中存在12 種花色苷?；ㄉ占兓瘶悠返目寡趸钚燥@著高于粗提物（P＜0.05），且優(yōu)于VC，純化樣品對(duì)α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶抑制作用也顯著高于粗提物（P＜0.05），說(shuō)明花色苷純化樣品具有很好的抗氧化活性和抑制血糖升高的潛能?；ㄉ沾痔嵛锖图兓瘶悠返捏w外生物利用度分別為5.45%和9.78%，純化樣品具有更高的生物利用度。紫果西番蓮果皮花色苷純化樣品在降血糖、抗氧化功能食品和醫(yī)藥方面具有很好的開(kāi)發(fā)潛力。還需要運(yùn)用核磁共振波譜等手段進(jìn)一步解析紫果西番蓮果皮花色苷的組成和結(jié)構(gòu)，進(jìn)而闡明結(jié)構(gòu)與其強(qiáng)抗氧化性之間的關(guān)系，明確花色苷與純化樣品中其他成分可能存在的協(xié)同增效作用。