孫叢萌,羅 蘭

梅州市婦幼保健計劃生育服務中心生殖中心，廣東 梅州 514021

男性不育癥是指夫婦婚后同居未避孕1年以上而未育，由男方原因引起的稱為男性不育?，F(xiàn)如今已婚夫婦的不育率約15%，其中由男性引起的不育約為50%，且呈逐漸上升趨勢。精液質量分析是評價男性不育的基本指標；其中精液量、圓細胞、精子濃度、前向運動精子（PR）、精子正常形態(tài)率、精子存活率、畸形精子指數(shù)（TZI）等參數(shù)是評估精液質量的重要指標，對科學有效的治療男性不育癥具有重要意義。本研究通過對全面放開二胎政策后3 610例男性不育患者精液進行質量分析，精子形態(tài)學評估，探討梅州地區(qū)男性不育患者精液質量現(xiàn)狀，以及這些檢測項目在男性不育診斷的應用價值?，F(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2016年1月—2018年12月期間來梅州市婦幼保健計劃生育服務中心生殖中心就診的男性患者3 610例，年齡19～65歲，平均年齡（33.1±6.3）歲，納入標準：主訴夫婦婚后同居未避孕1年以上未育，體檢未發(fā)現(xiàn)明顯睪丸、附睪、輸精管異常，均無性功能障礙史，無泌尿生殖道感染、性傳播疾病和腮腺炎性睪丸炎的病史，無外傷及遺傳性疾病家族史。

1.2 方法

（1）嚴格按照WHO第五版《人類精液檢查與處理實驗室手冊》標準所有檢測者禁欲2～7天手淫法采集精液標本。精液射入已證實對精子無毒性的、預先稱重的無菌痰杯，標記上其姓名和編碼。記錄獲取精液時間、顏色、禁欲時間，電子稱量取體積，采用廣泛精密試紙測定PH值。（2）精液采用計算機精液分析系統(tǒng)進行輔助分析（CASA），分析精子濃度、精子活力等參數(shù)。精液質量分析標準按照WHO第五版《人類精液檢查與處理實驗室手冊》作為精子質量分析的參考標準：精液體積≥1.5 m l；精液PH≥7.2；精子濃度≥15×106/m l；PR≥32%；精子存活率≥58%。以上指標均符合者界定為正常。（3）精子形態(tài)學分析。洗滌精子，將0.5 ml精液加10 ml生理鹽水中稀釋，800 g離心10分鐘，使用拉薄技術，將5～10 ul精子混懸液均勻涂在載玻片上。采用巴氏染色法，嚴格按照WHO第五版《人類精液檢查與處理實驗室手冊》標準進行精子形態(tài)學的分類，通過光學顯微鏡觀察精子包括頭、頸、中段、主段和末段，每張涂片至少評估200個精子。

1.3 統(tǒng)計學方法

采用SPSS 20.0軟件進行統(tǒng)計分析，計量資料以均數(shù)±標準差（±s）表示，組間比較采用t檢驗，多組間比較采用方差分析；計數(shù)資料以例數(shù)和百分比（%）表示，組間比較采用χ2檢驗，以α=0.05為檢驗水準，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 3610例精液質量分析結果正異常均值分析

在梅州地區(qū)3 610例男性不育患者精液質量分析結果中，精液質量分析正常組473例，占比13.1%，年齡均值為32.71歲；精液分析異常組3 137例，占比86.9%，年齡均值為33.11歲，兩組間的年齡差值差異無統(tǒng)計學意義（t=1.36，P＞0.05）。正常組和異常組在各精液質量結果的比較中，異常組的精液量呈顯著減少（t=2.63，P＜0.05），而精子濃度、 PR、精子正常形態(tài)率和存活率等指標呈顯著下降趨勢（t=4.37、t=21.98、t=26.15、t=9.50，P＜0.01），TZI顯著上升(t=15.27，P＜0.05)，見表1。

2.2 3137例精液質量結果異常率分析

3 137例異常精液質量分析結果中，除去重度（＜2.0×106）少精子癥76例和無精子癥55例，其主要異常表現(xiàn)為精子正常形態(tài)率異常，占68.34%，其次為PR精子數(shù)＜32%的占23.69%、精子總數(shù)＜39×106的占15.59%、精子濃度＜15×106/ml的占14.92%、精子存活率＜58%的占13.48%、精液量異常為11.57%和TZI異常為10.77%，見表2。

2.3 圓細胞正異常組精液質量均值結果對比分析

3610例精液質量分析結果中，圓細胞≥1.0×106/m l的715例，占比19.8%，除去重度（＜2.0×106）少精子癥76例和無精子癥55例，在精液圓細胞≥1.0×106/m l（異常組）與圓細胞＜1.0×106/m l（正常組）兩組精液質量分析結果比較中，圓細胞＞1.0×106/m l的精液量、精子正常形態(tài)率、PR、精子存活率明顯下降和TZI異常率顯著升高，差異有統(tǒng)計學意義（t=6.86、t=9.13、t=5.84、t=4.51，P＜0.05）；而兩組精子濃度差異無統(tǒng)計學意義（t=1.48，P＞0.05），見表3。

2.4 3610例精液質量結果不同年齡段分析

不同年齡組的精液質量分析結果顯示，精液量明顯減少的有＞40歲年齡組(t=5.52，P＜0.05)，精子濃度明顯減少的為≤25歲年齡組(t=2.73，P＜0.01)；PR精子數(shù)與精子存活率按年齡梯度呈下降趨勢，其中≤35歲的PR精子數(shù)在總體的平均PR精子數(shù)之上，＞35歲的PR精子數(shù)低于總體均值；而精子正常形態(tài)率則呈反向趨勢，年齡組越大，平均值越高，≤30歲的精子正常形態(tài)率低于總體均值；TZI在＞40歲年齡組中體現(xiàn)最明顯，明顯高于總體平均值，見表4。

2.5 不同年齡組結果異常率對比分析

＞40歲年齡組患者與其他各年齡組相比精液異常率較高。對樣本進行統(tǒng)計學分析，各年齡組之間差異無統(tǒng)計學意義（χ2=4.27，P＞0.05），見表5。

3 討論

隨著生活環(huán)境污染加劇，工作壓力增加，個人不良生活習慣等因素，不孕不育的發(fā)生率呈逐漸上升，據(jù)資料統(tǒng)計，現(xiàn)如今已婚夫婦的不育率約15%，其中由男性引起的不育約為50%，且呈逐漸上升趨勢[1]。隨著國家二胎政策放開，男性的精子檢測，對優(yōu)生優(yōu)育也由為重要。精液質量分析作為評價男性不育癥的基本診治指標。本文的3 610例男性不育精液標本中，精液質量分析異常率占86.9%，這與蘭州地區(qū)88.5%的[2]數(shù)據(jù)相近，比全國多中心調查報告的平均水平要高（57.7%，2003年）[3]。在3 610例精液質量分析結果中，精子濃度異常率為14.35%和精子毛細管穿透試驗的異常率為8.86%。無精子癥55例，占1.52%；重度少精子癥（精子濃度＜5.0×106/ml）126例，占3.49%；其中無精子癥和重度少精子癥的主要年齡段分布為25～30歲。精液不液化的有130例，占3.60%；精液量均值為3.2 m l，＜1.5 m l的有363例，占10.06%。在3 137例異常精液質量分析結果中，主要的異常表現(xiàn)為形態(tài)學異常1 987例，占63.34%，其次為PR精子數(shù)，異常數(shù)為743例，異常率為23.69%；第三是精子總數(shù)異常，異常數(shù)為489例，異常率為15.59%。與張圣杰[4]的研究結果有所不同，本研究表明精子畸形率上升是本地區(qū)引起男性不育的主要因素，這可能與我中心遵從Tygerberg的嚴格標準對精子形態(tài)學進行定義有關，有文獻表明精子形態(tài)率與體外受精妊娠率呈正相關[5]。圓細胞≥1.0×106/ml有715例，占19.81%，而白細胞過氧化物酶陽性有283例，占總數(shù)的7.84%，陽性率為39.58%，本研究認為精液圓細胞增多，可能與睪丸受損或者男性生殖道感染有關，與精子質量下降呈正相關[6]；不同年齡組精液質量分析全年齡段的平均年齡為33.05歲，其中大于45歲有109例，占3.02%；小于20歲1例，占0.03%；檢查人群主要分布為25～40歲，占67.5%?！?5歲年齡組的精液分析各項參數(shù)異常較明顯，尤其體現(xiàn)在濃度和精子正常形態(tài)率結果均低于總體均值，但是PR精子總數(shù)和精子存活率高于其他年齡組，可能與其個人生活不良習慣相關，年齡上占優(yōu)勢，故活力等情況較好，＞40歲年齡組的異常率明顯增高，精液量減少較為明顯，PR精子總數(shù)和精子存活率明顯低于其他各個年齡組，在精子正常形態(tài)率結果高于總體均值的情況下TZI值高于其他年齡組，精子中段和尾段的異常應該明顯高于其他年齡組，這在一定程度上也印證了精子活力低于其他年齡組，還原了精子質量隨年齡的增長逐漸下降，與低生育率呈正相關。不同年齡組異常率分析認為，沒有顯著性差異，與贛西地區(qū)的[7]結果存在差異，可能與本地區(qū)是世界長壽之鄉(xiāng)，生態(tài)環(huán)境好相關。

表1 3610例精液質量分析結果正異常均值分析

表2 3137例精液質量結果異常率分析

表3 圓細胞正異常組精液質量均值結果對比分析

表4 3610例精液質量結果不同年齡段分析（±s）

表4 3610例精液質量結果不同年齡段分析（±s）

項目年齡（歲）精液量（ml）濃度（×106/m l）PR(%)存活率(%)正常形態(tài)率(%)TZI≤25歲23.8±1.9 3.2±1.5 63.9±46.7 47.1±17.0 76.4±24.6 2.8±2.9 1.35±0.36＞25～≤30歲28.0±1.6 3.3±1.5 69.3±57.5 45.5±18.0 74.2±24.9 3.3±2.9 1.35±0.36＞30～≤35歲32.7±1.8 3.3±1.5 76.4±59.4 45.1±18.8 74.5±24.7 3.5±0.4 1.34±0.37＞35～≤40歲37.9±2.1 3.2±1.5 71.7±58.0 42.9±17.3 72.2±21.4 3.6±2.9 1.36±0.30＞40歲44.0±3.6 2.9±1.4 74.8±57.8 37.3±17.3 67.6±24.4 3.7±3.0 1.40±0.34

表5 不同年齡組結果異常率對比分析

綜上所述，梅州地區(qū)不育男性精液質量現(xiàn)狀主要表現(xiàn)為精子形態(tài)學異常率升高，其次為PR精子數(shù)和精子存活率下降。隨著近幾年來人工授精、體外受精-胚胎移植技術的成熟，更多的精子功能檢測項目（精子頂體酶、精子DNA碎片率等）應用于臨床診治；男性隨著年齡的增長，精子質量下降，因男性患者精液質量檢查較女性不孕癥患者檢查簡便易行，建議本地區(qū)不孕不育患者就診時男性患者首先進行精液檢查，探尋不孕不育因素，進行科學有效的不孕不育治療，提高妊娠率。