孫叢萌,羅 蘭

梅州市婦幼保健計(jì)劃生育服務(wù)中心生殖中心，廣東 梅州 514021

男性不育癥是指夫婦婚后同居未避孕1年以上而未育，由男方原因引起的稱為男性不育?，F(xiàn)如今已婚夫婦的不育率約15%，其中由男性引起的不育約為50%，且呈逐漸上升趨勢。精液質(zhì)量分析是評價(jià)男性不育的基本指標(biāo)；其中精液量、圓細(xì)胞、精子濃度、前向運(yùn)動(dòng)精子（PR）、精子正常形態(tài)率、精子存活率、畸形精子指數(shù)（TZI）等參數(shù)是評估精液質(zhì)量的重要指標(biāo)，對科學(xué)有效的治療男性不育癥具有重要意義。本研究通過對全面放開二胎政策后3 610例男性不育患者精液進(jìn)行質(zhì)量分析，精子形態(tài)學(xué)評估，探討梅州地區(qū)男性不育患者精液質(zhì)量現(xiàn)狀，以及這些檢測項(xiàng)目在男性不育診斷的應(yīng)用價(jià)值?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2016年1月—2018年12月期間來梅州市婦幼保健計(jì)劃生育服務(wù)中心生殖中心就診的男性患者3 610例，年齡19～65歲，平均年齡（33.1±6.3）歲，納入標(biāo)準(zhǔn)：主訴夫婦婚后同居未避孕1年以上未育，體檢未發(fā)現(xiàn)明顯睪丸、附睪、輸精管異常，均無性功能障礙史，無泌尿生殖道感染、性傳播疾病和腮腺炎性睪丸炎的病史，無外傷及遺傳性疾病家族史。

1.2 方法

（1）嚴(yán)格按照WHO第五版《人類精液檢查與處理實(shí)驗(yàn)室手冊》標(biāo)準(zhǔn)所有檢測者禁欲2～7天手淫法采集精液標(biāo)本。精液射入已證實(shí)對精子無毒性的、預(yù)先稱重的無菌痰杯，標(biāo)記上其姓名和編碼。記錄獲取精液時(shí)間、顏色、禁欲時(shí)間，電子稱量取體積，采用廣泛精密試紙測定PH值。（2）精液采用計(jì)算機(jī)精液分析系統(tǒng)進(jìn)行輔助分析（CASA），分析精子濃度、精子活力等參數(shù)。精液質(zhì)量分析標(biāo)準(zhǔn)按照WHO第五版《人類精液檢查與處理實(shí)驗(yàn)室手冊》作為精子質(zhì)量分析的參考標(biāo)準(zhǔn)：精液體積≥1.5 m l；精液PH≥7.2；精子濃度≥15×106/m l；PR≥32%；精子存活率≥58%。以上指標(biāo)均符合者界定為正常。（3）精子形態(tài)學(xué)分析。洗滌精子，將0.5 ml精液加10 ml生理鹽水中稀釋，800 g離心10分鐘，使用拉薄技術(shù)，將5～10 ul精子混懸液均勻涂在載玻片上。采用巴氏染色法，嚴(yán)格按照WHO第五版《人類精液檢查與處理實(shí)驗(yàn)室手冊》標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行精子形態(tài)學(xué)的分類，通過光學(xué)顯微鏡觀察精子包括頭、頸、中段、主段和末段，每張涂片至少評估200個(gè)精子。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 20.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，多組間比較采用方差分析；計(jì)數(shù)資料以例數(shù)和百分比（%）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，以α=0.05為檢驗(yàn)水準(zhǔn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 3610例精液質(zhì)量分析結(jié)果正異常均值分析

在梅州地區(qū)3 610例男性不育患者精液質(zhì)量分析結(jié)果中，精液質(zhì)量分析正常組473例，占比13.1%，年齡均值為32.71歲；精液分析異常組3 137例，占比86.9%，年齡均值為33.11歲，兩組間的年齡差值差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=1.36，P＞0.05）。正常組和異常組在各精液質(zhì)量結(jié)果的比較中，異常組的精液量呈顯著減少（t=2.63，P＜0.05），而精子濃度、 PR、精子正常形態(tài)率和存活率等指標(biāo)呈顯著下降趨勢（t=4.37、t=21.98、t=26.15、t=9.50，P＜0.01），TZI顯著上升(t=15.27，P＜0.05)，見表1。

2.2 3137例精液質(zhì)量結(jié)果異常率分析

3 137例異常精液質(zhì)量分析結(jié)果中，除去重度（＜2.0×106）少精子癥76例和無精子癥55例，其主要異常表現(xiàn)為精子正常形態(tài)率異常，占68.34%，其次為PR精子數(shù)＜32%的占23.69%、精子總數(shù)＜39×106的占15.59%、精子濃度＜15×106/ml的占14.92%、精子存活率＜58%的占13.48%、精液量異常為11.57%和TZI異常為10.77%，見表2。

2.3 圓細(xì)胞正異常組精液質(zhì)量均值結(jié)果對比分析

3610例精液質(zhì)量分析結(jié)果中，圓細(xì)胞≥1.0×106/m l的715例，占比19.8%，除去重度（＜2.0×106）少精子癥76例和無精子癥55例，在精液圓細(xì)胞≥1.0×106/m l（異常組）與圓細(xì)胞＜1.0×106/m l（正常組）兩組精液質(zhì)量分析結(jié)果比較中，圓細(xì)胞＞1.0×106/m l的精液量、精子正常形態(tài)率、PR、精子存活率明顯下降和TZI異常率顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=6.86、t=9.13、t=5.84、t=4.51，P＜0.05）；而兩組精子濃度差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=1.48，P＞0.05），見表3。

2.4 3610例精液質(zhì)量結(jié)果不同年齡段分析

不同年齡組的精液質(zhì)量分析結(jié)果顯示，精液量明顯減少的有＞40歲年齡組(t=5.52，P＜0.05)，精子濃度明顯減少的為≤25歲年齡組(t=2.73，P＜0.01)；PR精子數(shù)與精子存活率按年齡梯度呈下降趨勢，其中≤35歲的PR精子數(shù)在總體的平均PR精子數(shù)之上，＞35歲的PR精子數(shù)低于總體均值；而精子正常形態(tài)率則呈反向趨勢，年齡組越大，平均值越高，≤30歲的精子正常形態(tài)率低于總體均值；TZI在＞40歲年齡組中體現(xiàn)最明顯，明顯高于總體平均值，見表4。

2.5 不同年齡組結(jié)果異常率對比分析

＞40歲年齡組患者與其他各年齡組相比精液異常率較高。對樣本進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，各年齡組之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=4.27，P＞0.05），見表5。

3 討論

隨著生活環(huán)境污染加劇，工作壓力增加，個(gè)人不良生活習(xí)慣等因素，不孕不育的發(fā)生率呈逐漸上升，據(jù)資料統(tǒng)計(jì)，現(xiàn)如今已婚夫婦的不育率約15%，其中由男性引起的不育約為50%，且呈逐漸上升趨勢[1]。隨著國家二胎政策放開，男性的精子檢測，對優(yōu)生優(yōu)育也由為重要。精液質(zhì)量分析作為評價(jià)男性不育癥的基本診治指標(biāo)。本文的3 610例男性不育精液標(biāo)本中，精液質(zhì)量分析異常率占86.9%，這與蘭州地區(qū)88.5%的[2]數(shù)據(jù)相近，比全國多中心調(diào)查報(bào)告的平均水平要高（57.7%，2003年）[3]。在3 610例精液質(zhì)量分析結(jié)果中，精子濃度異常率為14.35%和精子毛細(xì)管穿透試驗(yàn)的異常率為8.86%。無精子癥55例，占1.52%；重度少精子癥（精子濃度＜5.0×106/ml）126例，占3.49%；其中無精子癥和重度少精子癥的主要年齡段分布為25～30歲。精液不液化的有130例，占3.60%；精液量均值為3.2 m l，＜1.5 m l的有363例，占10.06%。在3 137例異常精液質(zhì)量分析結(jié)果中，主要的異常表現(xiàn)為形態(tài)學(xué)異常1 987例，占63.34%，其次為PR精子數(shù)，異常數(shù)為743例，異常率為23.69%；第三是精子總數(shù)異常，異常數(shù)為489例，異常率為15.59%。與張圣杰[4]的研究結(jié)果有所不同，本研究表明精子畸形率上升是本地區(qū)引起男性不育的主要因素，這可能與我中心遵從Tygerberg的嚴(yán)格標(biāo)準(zhǔn)對精子形態(tài)學(xué)進(jìn)行定義有關(guān)，有文獻(xiàn)表明精子形態(tài)率與體外受精妊娠率呈正相關(guān)[5]。圓細(xì)胞≥1.0×106/ml有715例，占19.81%，而白細(xì)胞過氧化物酶陽性有283例，占總數(shù)的7.84%，陽性率為39.58%，本研究認(rèn)為精液圓細(xì)胞增多，可能與睪丸受損或者男性生殖道感染有關(guān)，與精子質(zhì)量下降呈正相關(guān)[6]；不同年齡組精液質(zhì)量分析全年齡段的平均年齡為33.05歲，其中大于45歲有109例，占3.02%；小于20歲1例，占0.03%；檢查人群主要分布為25～40歲，占67.5%。≤25歲年齡組的精液分析各項(xiàng)參數(shù)異常較明顯，尤其體現(xiàn)在濃度和精子正常形態(tài)率結(jié)果均低于總體均值，但是PR精子總數(shù)和精子存活率高于其他年齡組，可能與其個(gè)人生活不良習(xí)慣相關(guān)，年齡上占優(yōu)勢，故活力等情況較好，＞40歲年齡組的異常率明顯增高，精液量減少較為明顯，PR精子總數(shù)和精子存活率明顯低于其他各個(gè)年齡組，在精子正常形態(tài)率結(jié)果高于總體均值的情況下TZI值高于其他年齡組，精子中段和尾段的異常應(yīng)該明顯高于其他年齡組，這在一定程度上也印證了精子活力低于其他年齡組，還原了精子質(zhì)量隨年齡的增長逐漸下降，與低生育率呈正相關(guān)。不同年齡組異常率分析認(rèn)為，沒有顯著性差異，與贛西地區(qū)的[7]結(jié)果存在差異，可能與本地區(qū)是世界長壽之鄉(xiāng)，生態(tài)環(huán)境好相關(guān)。

表1 3610例精液質(zhì)量分析結(jié)果正異常均值分析

表2 3137例精液質(zhì)量結(jié)果異常率分析

表3 圓細(xì)胞正異常組精液質(zhì)量均值結(jié)果對比分析

表4 3610例精液質(zhì)量結(jié)果不同年齡段分析（±s）

表4 3610例精液質(zhì)量結(jié)果不同年齡段分析（±s）

項(xiàng)目年齡（歲）精液量（ml）濃度（×106/m l）PR(%)存活率(%)正常形態(tài)率(%)TZI≤25歲23.8±1.9 3.2±1.5 63.9±46.7 47.1±17.0 76.4±24.6 2.8±2.9 1.35±0.36＞25～≤30歲28.0±1.6 3.3±1.5 69.3±57.5 45.5±18.0 74.2±24.9 3.3±2.9 1.35±0.36＞30～≤35歲32.7±1.8 3.3±1.5 76.4±59.4 45.1±18.8 74.5±24.7 3.5±0.4 1.34±0.37＞35～≤40歲37.9±2.1 3.2±1.5 71.7±58.0 42.9±17.3 72.2±21.4 3.6±2.9 1.36±0.30＞40歲44.0±3.6 2.9±1.4 74.8±57.8 37.3±17.3 67.6±24.4 3.7±3.0 1.40±0.34

表5 不同年齡組結(jié)果異常率對比分析

綜上所述，梅州地區(qū)不育男性精液質(zhì)量現(xiàn)狀主要表現(xiàn)為精子形態(tài)學(xué)異常率升高，其次為PR精子數(shù)和精子存活率下降。隨著近幾年來人工授精、體外受精-胚胎移植技術(shù)的成熟，更多的精子功能檢測項(xiàng)目（精子頂體酶、精子DNA碎片率等）應(yīng)用于臨床診治；男性隨著年齡的增長，精子質(zhì)量下降，因男性患者精液質(zhì)量檢查較女性不孕癥患者檢查簡便易行，建議本地區(qū)不孕不育患者就診時(shí)男性患者首先進(jìn)行精液檢查，探尋不孕不育因素，進(jìn)行科學(xué)有效的不孕不育治療，提高妊娠率。