劉漢玉,趙 瑋,陳曉華,宓憲偉,王素梅,劉 明,潘明章
(1.黑龍江職業(yè)學院,哈爾濱 150111;2.黑河市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局,黑龍江 黑河 164300;3.哈爾濱市慶元公司,哈爾濱 150111)
我國的奶牛從業(yè)者一直追求提高奶牛繁殖效率的批次化繁殖技術,因為奶牛良好繁殖狀況和高效的繁殖管理是牛場延續(xù)和種群擴大的根本途徑,也直接影響牛場的經(jīng)濟效益。奶牛的同期排卵-定時輸精(Ovsynch-TAI)技術可以使產(chǎn)后奶牛更早受孕,能夠大大縮短奶牛產(chǎn)犢間隔,加快牛場的世代更替,增加奶牛產(chǎn)奶量,提高奶牛泌乳效率,特別是可以在牛奶價格處于低位時增加經(jīng)濟效益。
隨著奶牛飼養(yǎng)技術的不斷發(fā)展,奶牛的泌乳性能不斷提高,奶牛的繁殖力卻出現(xiàn)明顯下降。為應對這一問題,20世紀90年代J.R.Pursley發(fā)明了奶牛的同期排卵-定時輸精(Ovsynch-TAI)技術[1-3]。該技術利用外源性促性腺激素釋放激素(GnRH)和前列腺素(PG)對奶牛發(fā)情及排卵進行人為干預,使奶牛的發(fā)情及排卵同期化,其經(jīng)典程序為GnRH→PG→GnRH→TAI[4-6],現(xiàn)在基于這一程序開發(fā)出了很多衍生程序。
Ovsynch-TAI技術的原理是根據(jù)奶牛卵泡發(fā)育波的特點開發(fā)而來。奶牛的一個發(fā)情周期有2~3個卵泡波,每個卵泡波都有一個優(yōu)勢卵泡發(fā)育,但只有最后一個卵泡波的優(yōu)勢卵泡會破裂排卵。在母牛發(fā)情周期的任意一天注射GnRH,使垂體合成并釋放促卵泡素(FSH)和促黃體素(LH),誘導卵巢上的優(yōu)勢卵泡破裂排卵,形成黃體;7 d后注射PG溶解黃體,卵巢上會有新的優(yōu)勢卵泡被選擇出來并發(fā)育;2 d后注射GnRH,使這個優(yōu)勢卵泡在24~32 h內(nèi)排卵。由于卵巢上的卵泡多次發(fā)育,卵巢機能旺盛,卵子的質(zhì)量較高,輸精后的受胎率較高,在實踐中發(fā)現(xiàn)在第2次注射GnRH 16 h后輸精受胎率最高,因此,一般選擇在這個時間輸精。
選取哈爾濱市雙城區(qū)某牧場體況良好的健康中國荷斯坦奶牛80頭,隨機分為4組,每組20頭,即對照組、試驗1組、試驗2組、試驗3組,對照組不進行生殖激素處理,試驗1組、試驗2組、試驗3組應用不同定時輸精程序進行輸精,并在輸精30 d后進行B超妊娠診斷。
氯前列醇鈉注射液(PG,0.2 mg/支)、舒牛(GnRH,100μg/支),購自寧波激素二廠。
獸用便攜式B超機(型號為kx5100),購自徐州市凱信電子設備有限公司;細管凍精,購自黑龍江省博瑞遺傳有限公司;輸精設備,購自廣西蔣氏動物用品有限公司。
對照組不進行處理,應用外部觀察法和蠟筆涂抹法進行發(fā)情鑒定,進行人工輸精,輸精30 d后進行B超孕檢。
試驗1組應用Ovsynch-56[7]法,母牛發(fā)情周期的任意一天為第0天,第0天08:00肌注GnRH,第7天08:00肌注PG,第9天16:00肌注GnRH,第10天08:00輸精。
試驗2組應用預同步-11法[8-9],母牛發(fā)情周期的任意一天為第0天,第0天08:00肌注PG,第14天08:00肌注PG,第25天08:00肌注Gn-RH,第32天08:00肌注PG,第34天16:00肌注GnRH,第35天08:00輸精。
試驗3組應用雙同步法[10],母牛發(fā)情周期的任意一天為第0天,第0天08:00肌注GnRH,第7天08:00肌注PG,第10天08:00肌注GnRH,第17天08:00肌注GnRH,第24天08:00肌注PG,第26天16:00肌注GnRH,第27天08:00輸精。
試驗數(shù)據(jù)采用Excel軟件進行統(tǒng)計,并用兩樣本百分數(shù)資料顯著性檢驗進行分析。
測定結(jié)果見表1、圖1。
圖1 各組奶牛參配率的比較
由表1可以看出,3個試驗組參配率均極顯著高于對照組(P<0.01),各試驗組間均差異不顯著(P>0.05)。
表1 各組奶牛參配率測定結(jié)果
測定結(jié)果見表2、圖2。
圖2 各組奶牛受胎率的比較
表2 各組奶牛受胎率測定結(jié)果
由表2可以看出,3個試驗組奶牛受胎率與對照組相比均差異不顯著(P>0.05)。
本試驗中,對照組奶牛參配率為40%,應用同期排卵-定時輸精程序輸精的試驗組奶牛參配率為100%,對照組與試驗組間差異極顯著。這主要是由于對照組應用常規(guī)發(fā)情鑒定的方法,只有發(fā)現(xiàn)奶牛發(fā)情才能進行輸精,有些奶牛由于安靜發(fā)情或未觀察到發(fā)情錯過了最佳配種時期。而應用同期排卵-定時輸精程序處理的母牛,由于生殖激素的作用,卵巢的機能旺盛,排出的卵子質(zhì)量較好,不進行發(fā)情鑒定也可以輸精,因此參配率高于自然發(fā)情。
本試驗中,由于樣本數(shù)較少,造成對照組、試驗1組、試驗2組、試驗3組間奶牛受胎率統(tǒng)計學檢驗差異不顯著,但在生產(chǎn)實踐中母牛受胎率的差異具有實際意義,會顯著影響牛場的繁殖效率和經(jīng)濟效益。以后研究會對比進行補充研究,完善數(shù)據(jù)。
本試驗中,試驗1組奶牛受胎率為35%,對照組為20%,這可能是由于應用Ovsynch-56法進行激素處理,第1次注射GnRH主要是促進第一個卵泡波的優(yōu)勢卵泡破裂,排卵,并形成黃體;第2次注射PG主要是溶解黃體,使第二個卵泡波快速發(fā)育;第3次注射GnRH是使第二個卵泡波的優(yōu)勢卵泡排卵,這時卵巢機能旺盛,排出的卵子質(zhì)量好,受胎率提高。
試驗2組奶牛受胎率為45%,高于試驗1組和對照組,這可能是由于試驗2組采用預同步程序,這一程序是在Ovsynch-56程序前注射2次PG[11]。這2次PG注射會促進奶牛黃體溶解,子宮收縮、凈化,使子宮內(nèi)環(huán)境達到最佳的受胎標準,同時使奶牛的發(fā)情同期化,這也使排卵一致化率高、受胎率高。
試驗3組和試驗2組奶牛受胎率均為45%,高于試驗1組和對照組。試驗3組的程序更加復雜、成本更高,但受胎率僅與試驗組相同,沒有達到預期效果。
采用Ovsynch-56、預同步-11和雙同步法進行定期輸精處理,奶牛受胎率分別為35%、45%和45%,對照組自然發(fā)情奶牛受胎率為20%。預同步-11法以較低的成本、較高的受胎率更加適合中型的奶牛企業(yè)使用,而Ovsynch-56法更適合小型牧場或奶牛小區(qū)使用,而雙同步程序需要在以后試驗中進一步驗證。