李 竟，鄭照軍，鄭 晶，郭 暉

2019年12月以來，中國湖北省武漢市出現(xiàn)了新型冠狀病毒感染的肺炎病人，并迅速蔓延到我國其他地區(qū)。2020 年1月12日，WHO正式將引起肺炎疫情的新型冠狀病毒命名為2019新型冠狀病毒(2019 new coronavirus，2019-nCoV)，屬于β屬冠狀病毒，其基因組和蝙蝠SARS樣冠狀病毒(bat-SL-CoVZC45)高度同源，相似度85%以上[1]；由其感染引起的肺炎稱之為新型冠狀病毒肺炎(COVID-19)。臨床表現(xiàn)主要有發(fā)熱、干咳、乏力，重癥病人多在發(fā)病1周后出現(xiàn)呼吸困難和/或低氧血癥，嚴(yán)重者快速進(jìn)展為急性呼吸窘迫綜合征、膿毒癥休克、代謝性酸中毒等，實(shí)驗(yàn)室檢查可出現(xiàn)多種指標(biāo)的變化，主要表現(xiàn)為發(fā)病早期外周血白細(xì)胞總數(shù)正?；蚪档?，淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)絕對值減少，C反應(yīng)蛋白(CRP)升高，重癥病人常有炎癥因子升高并伴有外周血淋巴細(xì)胞進(jìn)行性減少[2]。所以實(shí)驗(yàn)室檢查對COVID-19的早期篩查和治療，提高COVID-19的治愈率非常重要。CRP是機(jī)體在應(yīng)激狀態(tài)下由肝臟合成的一種急性時(shí)相反應(yīng)蛋白，升高常見于細(xì)菌感染，在病毒感染時(shí)一般不升高或僅有輕微升高。當(dāng)機(jī)體受到感染后 ，其升高的幅度與感染的程度呈正相關(guān)并可早于白細(xì)胞升高，故其有較高的敏感性[3]。 中性粒細(xì)胞淋巴細(xì)胞比值(NLR)作為機(jī)體炎癥反應(yīng)的生物標(biāo)志物，可直觀地反映機(jī)體的炎癥狀態(tài)和全身免疫系統(tǒng)狀態(tài)，越來越受到炎癥相關(guān)研究的極大重視。本文旨在研究淋巴細(xì)胞(LY)、CRP聯(lián)合NLR檢測在COVID-19早期診斷中的臨床應(yīng)用價(jià)值?，F(xiàn)作報(bào)道。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2020年1-2月我院收治的53例COVID-19確診病人進(jìn)行回顧性分析，其中男30例，女23例；年齡21～87歲。同時(shí)選取同期90例已排除新型冠狀病毒感染的其他呼吸系統(tǒng)疾病病人作為對照組，其中男44例，女46例；年齡5～86歲。確診病例和排除病例標(biāo)準(zhǔn)均嚴(yán)格按照國家衛(wèi)健委發(fā)布的新型冠狀病毒感染肺炎的診療方案(第7版本)執(zhí)行。

1.2 儀器和試劑 血常規(guī)檢測采用日本希斯美康公司XE-5000型自動(dòng)血常規(guī)分析流水線，由中性粒細(xì)胞絕對數(shù)和淋巴細(xì)胞絕對數(shù)計(jì)算出NLR值；CRP 檢測應(yīng)用羅氏公司生產(chǎn)的Cobas 8000型全自動(dòng)生化分析儀。采用分析儀原裝配套試劑、校準(zhǔn)品及質(zhì)控品，所有標(biāo)本檢測均嚴(yán)格按照試劑盒說明書及相應(yīng)儀器標(biāo)準(zhǔn)操作程序進(jìn)行操作，并進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制。

1.3 方法 以EDTA-K2抗凝管采集受檢者靜脈血2 mL用于血常規(guī)檢測。以肝素抗凝管采集受檢者靜脈血3～5 mL，3 000 r/min，離心5 min，用于CRP的檢測。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)和ROC曲線評價(jià)各指標(biāo)診斷價(jià)值。

2 結(jié)果

2.1 2組間各指標(biāo)檢測結(jié)果比較 COVID-19組NLR、CRP水平均高于對照組，LY水平低于對照組(P<0.01)(見表1)。

2.2 NLR、LY、CRP對COVID-19診斷價(jià)值分析 以2019-nCoV核酸檢測結(jié)果作為金標(biāo)準(zhǔn)，評價(jià)NLR、LY、CRP對COVID-19診斷的價(jià)值。NLR、LY、CRP單獨(dú)及NLR+LY+CRP聯(lián)合用于診斷COVID-19曲線下面積(AUC)依次為：0.610、0.705、0.833、0.817，最佳截?cái)嘟缰?cut-off 值)分別為6.23、1.41、11.80，靈敏度分別為31.0%、69.8%、67.9%、58.5%，特異度分別為96.7%、62.2%、80.0%、92.2%，NLR+LY+CRP聯(lián)合診斷價(jià)值高于單獨(dú)診斷價(jià)值(見表2、圖1)。

表1 2組間各指標(biāo)檢測結(jié)果比較

表2 各指標(biāo)對COVID-19診斷價(jià)值分析

3 討論

由于COVID-19潛伏期較長，人群普遍易感，并且重癥、危重癥病人死亡率較高，故加強(qiáng)對COVID-19早診斷、早治療對提高治愈率、降低死亡率有非常重要的意義，同時(shí)也能最大可能地避免醫(yī)院感染。目前臨床診斷COVID-19的“金標(biāo)準(zhǔn)”是2019-nCoV的核酸檢測，但其受標(biāo)本采集、人員操作等因素的影響，可能導(dǎo)致假陰性率過高，同時(shí)核酸檢測無法做到隨到隨檢，耗時(shí)亦較長。而實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)合流行病學(xué)調(diào)查及影像學(xué)檢查能給臨床早期診斷COVID-19提供有價(jià)值的參考。本文通過對我院收治的53例COVID-19確診病人的實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果的回顧性分析和研究，旨在探討NLR、LY、CRP檢測在COVID-19早期診斷中的應(yīng)用價(jià)值。

本研究所采用的數(shù)據(jù)均為病人首診的檢查結(jié)果，所以能準(zhǔn)確反映病人入院時(shí)的狀態(tài)，也能為臨床的早期診斷提供參考。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，COVID-19組的WBC計(jì)數(shù)正常或者偏低，符合病毒性感染血象變化的一般特點(diǎn)，而LY計(jì)數(shù)減少[4]，這又區(qū)別于一般的病毒感染，筆者認(rèn)為這可能是2019-nCoV可以破壞病人的免疫系統(tǒng)從而導(dǎo)致LY減少，對此周玉平等[5]亦有過報(bào)道，由此可以推斷LY的減少程度與疾病的嚴(yán)重程度成正相關(guān)，這和與其高度同源性的蝙蝠樣SARS病毒破壞人體免疫系統(tǒng)非常相似[6-7]。同時(shí)在研究過程中還發(fā)現(xiàn)有部分病人的WBC升高明顯，這有可能是因?yàn)椴∏樘幱谶M(jìn)展期或者病人為重癥(危重癥)[8]。

CRP作為急性時(shí)相反應(yīng)蛋白，當(dāng)機(jī)體發(fā)生感染時(shí)，尤其在細(xì)菌感染時(shí)升高較為明顯[9]，而在病毒感染時(shí)一般不升高或輕微升高，本文研究顯示，COVID-19組的CRP水平較對照組明顯增高(P<0.01)。由于CRP受體內(nèi)某些細(xì)胞炎癥因子調(diào)控，特別是白細(xì)胞介素-6(IL-6)水平的影響，當(dāng)體內(nèi)IL-6升高，能夠刺激肝細(xì)胞產(chǎn)生CRP[10]，而筆者在對COVID-19病人的實(shí)驗(yàn)室結(jié)果分析時(shí)，發(fā)現(xiàn)多數(shù)COVID-19病人的IL-6水平均有不同程度的升高。同時(shí)CRP在炎癥反應(yīng)中起著積極作用，其與WBC存在正相關(guān)，當(dāng)感染發(fā)生后，CRP早于WBC升高，回復(fù)正常也較快，故具有極高的敏感性。

NLR是反映機(jī)體炎癥狀態(tài)的一個(gè)指標(biāo)，其在炎性反應(yīng)中具有重要作用，中性粒細(xì)胞是天然免疫細(xì)胞，具有反應(yīng)迅速的特點(diǎn)；LY是適應(yīng)性免疫細(xì)胞，具有免疫防御功能。我們在上文中已經(jīng)討論過COVID-19病人的白細(xì)胞正?；蚱?，LY下降，從而導(dǎo)致NLR升高，說明NLR對COVID-19病人和非COVID-19病人的鑒別有一定的臨床價(jià)值。在結(jié)果分析中，我們還發(fā)現(xiàn)有些COVID-19病人的白細(xì)胞升高，而LY嚴(yán)重下降，NLR升高幅度較大，后經(jīng)臨床資料分析發(fā)現(xiàn)這些病人均為臨床危重型，這說明NLR也是影響重癥發(fā)生的重要因素之一，具有良好的預(yù)測價(jià)值[11]，在臨床早期鑒別診斷普通型和危重型的過程中具有重要的意義。

采用ROC曲線分析NLR、LY、CRP單獨(dú)及聯(lián)合用于診斷COVID-19的AUC依次為：0.610、0.705、0.833、0.817， cut-off 值分別為6.23、1.41、11.80，靈敏度分別為31.0%、69.8%、67.9%、58.5%，特異度分別為96.7%、62.2%、80.0%、92.2%。采用NLR、LY、CRP聯(lián)合檢測能夠提高COVID-19診斷的靈敏度和準(zhǔn)確性，因此，對上述檢測指標(biāo)應(yīng)聯(lián)合起來綜合分析，結(jié)合流行病學(xué)史及肺部影像學(xué)結(jié)果，提高COVID-19的早期診斷水平，從而指導(dǎo)臨床及早采取合理的隔離及治療措施，避免交叉感染，提高疾病治愈率。