胡 偉，文 麗，鄧小紅，許建章

(1.上海伊科拜克獸藥銷售有限公司，上海 200040，2.駐馬店揚(yáng)翔飼料有限公司，河南 駐馬店 463000 )

2019新型冠狀病毒牽動(dòng)著世界上每個(gè)人的心，這個(gè)看不見的敵人帶來了一場沒有硝煙的戰(zhàn)爭，給全世界帶來了災(zāi)難性的打擊。此后無人不知冠狀病毒，從未上過學(xué)的老父親也因這次疫情知道鐘南山的大名。冠狀病毒首次發(fā)現(xiàn)距今已有70多年的歷史，此類病毒可感染人、豬、其他哺乳動(dòng)物和鳥類，引起呼吸道和腸道疾病。冠狀病毒變異快，傳播迅速，已知和新出現(xiàn)的冠狀病毒對人類和養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大的威脅和經(jīng)濟(jì)損失。作為養(yǎng)豬人，不僅需要了解人源性冠狀病毒，更要了解豬源性冠狀病毒，防患于未然，把豬養(yǎng)得更好，賺更多錢。

1 人源性冠狀病毒

最早的人源性冠狀病毒于1965年從具有感冒癥狀的病人鼻腔分泌物中分離獲得，命名為人冠狀病毒B814。目前，常見的感染人的冠狀病毒有7種，分別為人冠狀病毒229E(229E)、人冠狀病毒OC43(OC43)、嚴(yán)重急性呼吸綜合征冠狀病毒(SARSCoV)、人冠狀病毒NL63(NL63)、人冠狀病毒HKU1(HKU1)、中東呼吸綜合征冠狀病毒(MERS-CoV)和新型冠狀病毒(2019-nCoV)。其中，最為人們熟悉的當(dāng)屬2002年底開始流行的SARS-CoV以及2019年底開始流行的2019-nCoV；另外，2012年始于沙特阿拉伯的MERS-CoV也是人源性冠狀病毒著名成員(圖1)[1-3]。

現(xiàn)有的試驗(yàn)證據(jù)表明，229E、OC43、NL63和HKU1 4個(gè)冠狀病毒主要在人群中流行，可引起免疫抑制人群溫和的呼吸道癥狀，目前沒有發(fā)現(xiàn)其他動(dòng)物作為病毒的儲存宿主。而SARS、MERS和2019-nCoV則存在其他自然宿主，有研究表明SARS病毒以果子貍作為中間宿主，將病毒從蝙蝠帶給人類，導(dǎo)致9%的感染者死亡；MERS則以駱駝作為病毒來源，傳染給人類，感染者的死亡率高達(dá)36%，是目前對人類最具威脅性的冠狀病毒。針對最新的2019-nCoV，華南農(nóng)業(yè)大學(xué)Xiao等[4]以及香港大學(xué)Lam等[5]的研究表明，穿山甲很可能作為中間宿主將病毒從蝙蝠傳染給人來。幸運(yùn)的是，目前為止沒有研究發(fā)現(xiàn)豬可以作為人源性冠狀病毒的宿主，因此豬對人類是安全的。

2 豬源性冠狀病毒

豬源性冠狀病毒雖然不會感染人類，但是同樣會造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失，如2010年以來在中國養(yǎng)豬業(yè)流行的豬流行性腹瀉病毒(Porcine Epidemic Diarrhea Virus，PEDV)導(dǎo)致了100萬頭仔豬死亡，美國自2013年起也因PEDV損失10%的仔豬[3]。截至目前，從豬上共鑒別了6類常見冠狀病毒，分別為傳染性胃腸炎病毒(Transmissible Gastroenteritis Virus，TGEV)、PEDV、豬呼吸道冠狀病毒(Porcine Despiratory Corouavirus，PRCV)、豬血凝性腦脊髓炎病毒(Porcine Hemagglutinating Encephalomyelitis Virus，PHEV)、豬德爾塔冠狀病毒(Porcine Delta Coronavirus，PDCOV)和 豬 急性腹瀉綜合征冠狀病毒(Swine Acute Diarrhoea Syndrome Coronavirus，SADS-COV)。作為養(yǎng)豬人，自然要對豬源性冠狀病毒有所了解，保護(hù)好當(dāng)下的金豬。

2.1 PEDV、TGEV和PRCV

大部分養(yǎng)豬人對PEDV和TGEV不陌生，這兩種病毒感染豬的腸道后均可引起腹瀉、嘔吐和死亡等癥狀，且會造成1周齡以下的發(fā)病仔豬極高的死亡率，尤其是PEDV。2010年12月以來PEDV新的變異毒株給全國豬場帶來了巨大的損失，發(fā)病仔豬死亡率達(dá)80%～100%，目前國內(nèi)很多豬場仍然遭受該病毒的侵襲。TGEV于1946年在美國被鑒定出來，為豬上最早發(fā)現(xiàn)的冠狀病毒。目前該病毒在美國和歐洲的豬群中流行率較小，其中很大的原因歸咎于這兩個(gè)地區(qū)的豬群普遍感染PRCV。

PRCV作為TGEV在S基因片段大量堿基缺失后變異的病毒，主要感染豬的呼吸道，大多引起10～15周齡以上的豬呼吸道癥狀。研究發(fā)現(xiàn)大部分豬場為陽性狀態(tài)，但通常豬群處于亞臨床癥狀，在其他病毒和細(xì)菌存在的情況下，該病的臨床癥狀才明顯。如豬繁殖與呼吸綜合征病毒(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus，PRRSV)和PRCV共感染可導(dǎo)致該病表現(xiàn)出明顯的臨床癥狀，兩者會共同加劇感染豬肺部病變。那么，為何TGEV在PRCV流行的歐洲地區(qū)會平靜下來？原因在于PRCV感染豬群后可誘導(dǎo)豬產(chǎn)生對抗TGEV的中和抗體，起到部分保護(hù)效果，而且這種保護(hù)力可以通過初乳或常乳保護(hù)新生仔豬，降低TGEV導(dǎo)致的仔豬死淘率(懷孕階段二次感染后母豬的乳汁可提供87.5%～100%保護(hù)率)[6]。

在國內(nèi)，緣何TGEV仍然在豬場中普遍流行(山東規(guī)?；i場流調(diào)顯示，TGEV感染率達(dá)18.52%)，導(dǎo)致豬場損失慘重？

筆者分析認(rèn)為：

⑴ PEDV的廣泛流行以及PEDV和TGEV的混合感染加劇了豬場的損失；

⑵ 國內(nèi)豬繁殖與呼吸障礙綜合 征(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome，PRRS)等免疫抑制性疾病導(dǎo)致豬群免疫力下降，母豬的母源抗體不能很好地保護(hù)仔豬(眾所周知，對PEDV和TGEV的防控，乳汁中的IgA發(fā)揮著關(guān)鍵的作用；引起母豬群免疫抑制的PRRS等疾病或者其他損害母豬黏膜免疫的因素可導(dǎo)致母源抗體水平降低)。

2.2 PDCoV、PHEV和SADS-COV

2012年，中國香港首次報(bào)道在豬上分離到PDCoV，感染豬的臨床癥狀類似于PEDV感染，表現(xiàn)為仔豬和母豬出現(xiàn)水樣腹瀉以及仔豬死亡(圖2)，但感染仔豬的死亡率(30%～40%)低于PEDV引起的死亡率低，隨后內(nèi)地也從腹瀉豬的臨床樣品中檢測到PDCoV，并也出現(xiàn)仔豬死亡。2014年末，肖少波研究團(tuán)隊(duì)從湖北、河南、安徽和廣東等地的豬場腹瀉病例中分離到多個(gè)PDCoV分離株；中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所馮力研究團(tuán)隊(duì)對2014年1月至2015年11月收集的77家豬場的232份臨床腹瀉樣品進(jìn)行了RT-PCR檢測，結(jié)果顯示10.34%(24/232)的樣品呈PDCoV陽性，且某些腹瀉病例僅僅分離到PDCoV。

圖2 PDCoV引起5日齡仔豬水樣腹瀉和脫水[10-11]

圖3 PHEV引起仔豬出現(xiàn)神經(jīng)癥狀、消瘦以及胃脹氣[10-11]

圖4 PHEV引起的仔豬消瘦死亡和腦部組織出血[10-11]

1957年，加拿大第一個(gè)報(bào)道了豬感染PHEV后引發(fā)的臨床疾病，該病的主要癥狀包括4周齡以下的仔豬出現(xiàn)嘔吐、消瘦、腦脊髓炎以及死亡(圖3和圖4)[10-11]。目前，該病普遍存在于世界各地的豬群中，主要引起4周齡以下仔豬的死亡。PHEV是唯一一個(gè)會引起仔豬出現(xiàn)神經(jīng)癥狀的冠狀病毒。在中國，豬群最早的發(fā)病時(shí)間是1985年，發(fā)病地是北京，近年來多個(gè)豬場報(bào)道了該病的發(fā)生；根據(jù)2014年吉林市某豬場的報(bào)道，發(fā)病豬主要出現(xiàn)嘔吐和神經(jīng)癥狀，部分病豬伴隨著尖叫和拉稀，病豬最終均死亡[8-9]。流行病學(xué)調(diào)查顯示，雖然PHEV流行廣泛，但是發(fā)病案例較少，主要得益于母源抗體的保護(hù)。通常發(fā)病豬場都與后備母豬的大量引進(jìn)有關(guān)，因此應(yīng)引起豬場的重視。

SADS-COV為最近才發(fā)現(xiàn)的豬源性冠狀病毒，時(shí)間為2016年，發(fā)病地為廣東省清遠(yuǎn)市的4家豬場，導(dǎo)致24 693頭仔豬死亡。該病毒引起的臨床癥狀和PEDV的基本一致，導(dǎo)致5日齡以下的仔豬出現(xiàn)急性拉稀和脫水，死亡率高達(dá)90%；然而，母豬等大齡豬感染后僅僅出現(xiàn)溫和型腹瀉，并且2 d內(nèi)即可康復(fù)。研究發(fā)現(xiàn)，SADS-COV與HKU-2相關(guān)冠狀病毒的核酸序列相似性高達(dá)98.48%，有關(guān)數(shù)據(jù)表明該病毒可能來自于馬蹄蝠[12]。SADS-COV的發(fā)現(xiàn)提示我們養(yǎng)豬人：其他物種如蝙蝠的冠狀病毒對豬場的豬群具有一定的威脅。

3 人源性和豬源性冠狀病毒之間的關(guān)系

如上文所述，目前的研究表明豬源性冠狀病毒不會感染人，而人源性冠狀病毒也不會在豬體內(nèi)復(fù)制。如2004年有研究人員嘗試用SARS冠狀病毒感染6周齡仔豬，雖然宣告失敗，但是實(shí)驗(yàn)動(dòng)物血清SARS病毒轉(zhuǎn)陽。另外，實(shí)驗(yàn)用仔豬屬于PRCV抗體陽性動(dòng)物，因此可能會存在干擾[13]。無論如何，豬源性冠狀病毒對人類是安全的，目前生物安全級別非常高的豬場絕對是安全的地方。但是，我們要警惕豬作為載體將野生動(dòng)物身上的病毒傳染給人類！

4 豬源性冠狀病毒的防控

無論是人類還是動(dòng)物，對傳染病的防控都需要遵循控制傳染源、切斷傳播途徑和保護(hù)易感動(dòng)物/人的策略，因此生物安全應(yīng)擺放在豬源性冠狀病毒病防控的首要位置。對豬場來說，一如既往地加強(qiáng)生物安全不僅是為了防控非洲豬瘟，也是為了防控豬的其他疾病，如豬源性冠狀病毒。

在養(yǎng)豬生產(chǎn)中，豬場保護(hù)易感動(dòng)物的第一個(gè)方法是生物安全。當(dāng)然，豬群感染冠狀病毒后，保護(hù)易感動(dòng)物以減少損失同樣非常重要。在6類常見的豬源性冠狀病毒中，無論是PEDV和TEGV，還是PRCV、PDCOV、PHEV以及SADS-COV，它們均會對幼齡仔豬產(chǎn)生較大的危害，但成年豬感染后僅引起輕微的癥狀；因此，在疫情發(fā)生時(shí)，保護(hù)幼齡仔豬是豬場首要任務(wù)。由于幼齡仔豬的免疫系統(tǒng)未發(fā)育成熟，無法采用刺激新生仔豬使其產(chǎn)生免疫力的方法，因此養(yǎng)豬生產(chǎn)中保護(hù)幼齡仔豬的常見方法有：⑴刺激或補(bǔ)充新生仔豬干擾素，如給仔豬注射新城疫Ⅰ系疫苗產(chǎn)生的干擾素能夠減少PEDV引起的損失；⑵通過母源抗體保護(hù)仔豬。在這兩種方法中，效果最好的當(dāng)屬第2種，也最受大家青睞。

要利用母源抗體保護(hù)仔豬，首先要刺激母豬產(chǎn)生免疫力，然后通過初乳和常乳將保護(hù)力傳遞給仔豬。這種免疫保護(hù)具有一定的交叉性，如上文提到的歐洲地區(qū)的豬群廣泛感染后PRCV產(chǎn)生了對抗TEGV的保護(hù)力，因此這些地區(qū)的TEGV得到了很好控制。

如何刺激母豬產(chǎn)生針對冠狀病毒的保護(hù)力？通常有兩種做法：返飼和接種疫苗。目前尚無疫苗可以預(yù)防PDCOV、PHEV和SADS-COV的感染，但已有多個(gè)商品疫苗可預(yù)防PEDV和TEGV的感染，然而疫苗的免疫效果一直存在爭議。另外，2010年P(guān)EDV變異毒株的廣泛流行導(dǎo)致疫苗的免疫預(yù)防效果大打折扣。雖然返飼法在美國和泰國廣泛使用，但是國內(nèi)的使用效果存在較大的差異。筆者以PEDV為例闡述冠狀病毒疫苗和返飼法，希望對大家有所啟示。

⑴ 母豬的胎盤組織結(jié)構(gòu)決定了仔豬出生時(shí)體內(nèi)沒有母源免疫球蛋白。在自身主動(dòng)免疫發(fā)揮作用前，仔豬通過初乳和常乳中的抗體進(jìn)行被動(dòng)獲得性保護(hù)。此外，給新生仔豬接種PEDV疫苗進(jìn)行免疫存在兩個(gè)問題：①母源抗體可干擾疫苗的免疫反應(yīng)；②仔豬需要到達(dá)3周齡才能產(chǎn)生堅(jiān)實(shí)的免疫力。

⑵ PED的防控依靠母源免疫力，主要依靠母豬乳汁中的IgA。初乳中含量最高的抗體為IgG，初乳轉(zhuǎn)換成常乳后，乳汁中的IgG含量急劇下降，此時(shí)含量最高的抗體為IgA，為主要免疫保護(hù)蛋白。仔豬從母豬初乳獲得IgG，可防止系統(tǒng)性感染；常乳中的分泌型IgA(sIgA)可產(chǎn)生局部被動(dòng)免疫保護(hù)力，保護(hù)仔豬腸道。

⑶ IgG主要通過肌肉注射由中樞免疫系統(tǒng)產(chǎn)生。但是，對新生仔豬起主要保護(hù)作用的抗體是sIgA，主要由腸道黏膜免疫產(chǎn)生。研究表明，80%的IgA抗體分泌細(xì)胞(ASC)定植于腸道相關(guān)淋巴結(jié)中(腸道黏膜免疫面積非常大，鋪開猶如一個(gè)足球場。因此，sIgA主要由腸道黏膜免疫產(chǎn)生，小部分由中樞免疫產(chǎn)生)。母乳被動(dòng)免疫保護(hù)哺乳仔豬主要依靠IgA漿母細(xì)胞傳遞到乳腺，并且sIgA在常乳中蓄積，這種傳遞被稱為“腸道-乳腺-sIgA軸”[14]。

⑷ IgA主要由腸道黏膜免疫產(chǎn)生，需要消化道受到活病毒的刺激。多項(xiàng)研究表明，乳汁中PEDV中和抗體的產(chǎn)生需要活病毒刺激豬的消化道，因此返飼比肌肉注射疫苗能更好地刺激母豬乳汁中sIgA的產(chǎn)生。

⑸ 滅活苗或亞單位(S蛋白)苗腸道外疫苗免疫陰性母豬，不能很好地誘導(dǎo)黏膜免疫的產(chǎn)生，但可促進(jìn)IgG的產(chǎn)生(主要在血清和初乳中)。常乳中的IgG水平會迅速下降，給仔豬提供的乳源性免疫保護(hù)力非常有限。但是，在某些情況下也有例外，如血清中IgG的水平非常高，被大量傳遞到初乳中，并且在常乳中保持較高的水平，在新生仔豬出生后第1周可以提供持續(xù)片段性的保護(hù)力。

⑹ 返飼活病毒可以很好地誘導(dǎo)母豬產(chǎn)生sIgA，而非腸道免疫，如肌肉注射滅活苗或亞單位苗不能很好誘導(dǎo)陰性母豬產(chǎn)生sIgA或免疫保護(hù)力，但作為自然感染后加強(qiáng)免疫非常有效。因?yàn)榻?jīng)消化道感染后腸道源的IgA記憶細(xì)胞不僅僅在小腸中存在，同時(shí)在系統(tǒng)性中樞免疫器官如脾臟中也存在，所以第2次接種滅活苗后作用于中樞免疫同樣可以誘導(dǎo)sIgA的大量產(chǎn)生。

⑺ 臨床中部分豬場返飼失??？常見原因如下：①返飼操作不當(dāng)，如返飼材料的質(zhì)量不合格，正確的做法是選取7日齡內(nèi)出現(xiàn)典型癥狀的仔豬制作材料；返飼過程中出現(xiàn)高溫或太陽光殺死了病毒；②豬場的偽狂犬病和豬瘟不穩(wěn)定；③亞健康母豬問題，如PRRS和霉菌毒素等導(dǎo)致的亞健康母豬，這部分母豬在返飼后并未產(chǎn)生保護(hù)力，或產(chǎn)生的sIgA水平低，不能很好地保護(hù)仔豬，導(dǎo)致PED在豬場中零星發(fā)生。

5 結(jié)語

一場沒有硝煙的戰(zhàn)爭讓世人認(rèn)識到冠狀病毒的厲害，看不見的敵人給世界的經(jīng)濟(jì)帶來了巨大的損失。作為養(yǎng)豬人，冠狀病毒一點(diǎn)也不陌生，PEDV和TGEV這些大家熟知的冠狀病毒給豬場同樣帶來了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。此次的新型冠狀病毒同樣給養(yǎng)豬業(yè)帶來了警示：PDCOV、PHEV和SADSCOV等已經(jīng)出現(xiàn)的和未出現(xiàn)的冠狀病毒時(shí)刻威脅著養(yǎng)豬業(yè)。PEDV等豬源性冠狀病毒的防控與母豬腸道黏膜免疫反應(yīng)密切相關(guān)，腸道接觸活病毒才能激發(fā)母豬產(chǎn)生更多的sIgA，隨后通過腸道-乳腺-sIgA軸使乳汁含有更多的保護(hù)性抗體。因此，改善母豬腸道黏膜免疫對防控PEDV等冠狀病毒的感染非常重要。此外，豬場要避免PRRS和霉菌毒素等對母豬免疫力的破壞，防止PRRS引發(fā)豬場暴發(fā)PED。