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        雷公藤根中Cu超標的原因探究及制劑安全性評價

        2020-07-07 09:18:24王騰飛陳胤宏石炎林肖安菊
        湖北理工學院學報 2020年3期

        王騰飛,陳胤宏,劉 濤,石炎林,肖安菊

        (湖北理工學院 醫(yī)學院,湖北 黃石 435003)

        雷公藤(Tripterygium wilfordii Hook. f.)屬于衛(wèi)矛科,多年生藤本植物。雷公藤味苦、辛、性涼、有大毒,具有祛風除濕、消腫止痛、清熱解毒等功效。臨床常用制劑有雷公藤多苷片、雷絡酯片等。

        急性銅中毒會使患者出現(xiàn)惡心、嘔吐、上腹部痛、腹瀉等胃腸刺激癥狀和頭痛、眩暈、虛弱等神經(jīng)系統(tǒng)癥狀[1-2]?!吨袊幍洹?005年版首次規(guī)定了5種中藥材中Cu的含量不得高于20.0 mg/kg。該限量標準與《藥用植物及制劑進出口綠色行業(yè)標準》中所規(guī)定的綠色藥用植物及制劑的重金屬及砷鹽的限量指標相一致。近年來,筆者檢測雷公藤根中Cu的含量,結果發(fā)現(xiàn)Cu的含量超標約1倍,檢測方法是依據(jù)《中國藥典》第1部(2015版)記載[3]。

        查閱文獻資料,國內(nèi)尚未報道過雷公藤根中鉛、鎘、銅、汞、砷5種重金屬的含量檢測情況。那么,雷公藤根中高含量的Cu來源于哪個方面?是土壤中Cu的含量高,還是雷公藤對Cu有富集作用?為了保證雷公藤用藥安全,本文擬研究雷公藤種植地的土壤、種植地常見的一年生草本植物青葙、雷公藤制劑工藝第一步85%乙醇提取液和藥渣中Cu的含量[4],進而評價雷公藤制劑的安全性。

        1 材料與儀器

        1.1 試驗材料

        湖北理工學院種植地的土壤;青葙(種植地里最常見的一年生草本植物);雷公藤根(扦插生長3年的樣品);雷公藤根用85%乙醇回流提取的提取液和剩余藥渣。將各樣品平鋪于桌面,自然晾干,粉碎備用;提取液30 ℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)回收乙醇后,殘留物用甲醇定容10 mL,備用。

        1.2 儀器與試劑

        儀器:智能樣品處理器(VB24 UP,天津泰斯特儀器有限公司);消解罐(ETHOS UP,Milestone公司);原子吸收分光光度計(ICE 3000 SERIES,賽默飛世爾科技公司)。

        試劑:硝酸,優(yōu)級純(國藥集團化學試劑有限公司);銅標準溶液(標準值1 000 μg/mL GBW(E)080121);水為超純水。

        2 方法與結果

        2.1 儀器條件

        銅的測定:采用火焰原子吸收分光光度法測定Cu的含量,檢測波長為324.7 nm,工作燈電流為15 mA,帶寬為0.2 nm,采用空氣-乙炔火焰。

        2.2 Cu貯備液的制備

        精密量取1 000 μg/mL的銅標準溶液適量,用2%的硝酸分別配成每1 mL含銅10 μg的貯備液。

        2.3 樣品溶液的制備

        取供試品粗粉0.2 g,精密稱定,置于聚四氟乙烯消解管內(nèi),加硝酸8 mL混勻,在智能樣品處理器上90 ℃進行預處理,待不再有棕黃色煙冒出時取出,蓋好內(nèi)蓋旋緊外套,并擦干外壁水,置于微波消解儀內(nèi)按照儀器規(guī)定程序進行消解[5-8]。消解完全后,取消解罐置于處理器上90 ℃緩緩加熱,濃縮至液體只剩2~3 mL,冷卻,用水轉(zhuǎn)入50 mL容量瓶中,稀釋至刻度,搖勻即得供試品,同法制備試劑空白溶液。

        2.4 方法學考察

        1)線性關系考察。分別精密吸取銅貯備液適量,用2%硝酸將銅配成每1 mL分別含銅0,0.05,0.2,0.4,0.6,0.8 μg的溶液對銅進行測定,以吸光度y對濃度x求出線性回歸方程為:y=0.1753x+0.0016,R2= 0.9998,結果表明銅元素濃度在0~0.8 μg/mL范圍內(nèi)與吸光度呈良好的線性關系。銅的標準曲線如圖1所示。

        圖1 銅的標準曲線

        2)精密度試驗。精密吸取同一對照品溶液20 μL,連續(xù)進樣5次,計算銅濃度的相對標準偏差RSD為1.54%,表明儀器的精密度良好。

        3)穩(wěn)定性試驗。取同一供試品溶液,分別于0,4,8,12,24 h進樣測定,計算銅濃度的RSD為1.39%,表明供試品溶液在配制后的24 h內(nèi)基本穩(wěn)定。

        4)重復性試驗。分別精密稱取雷公藤根樣品粉末5份,每份約0.2 g,按供試品溶液制備方法制備,依法測定,計算銅濃度的RSD為2.36%,表明本法重復性良好。

        5)加樣回收試驗。雷公藤根粉末0.2 g,共6份,精密稱定,精密加入銅貯備液1 mL,2 mL各3份[7],按“2.3”方法制備供試液。分別代入銅回歸方程,計算銅的平均回收率為99.74%,RSD為1.53%,銅加樣回收試驗結果見表1。

        表1 銅加樣回收試驗結果(n=3)

        2.5 樣品含量測定

        稱取土壤、雷公藤根、雷公藤根85%乙醇回流提取后的藥渣、青葙等樣品粗粉0.2 g和提取液1 mL,精密稱定,按“2.3”方法制備供試液,按“2.1”儀器條件測定,分別代入銅的回歸方程。各樣品中Cu的含量見表2。

        表2 各樣品中Cu的含量(n=3)

        3 討論

        3.1 測定方法的影響

        相對砷汞而言,銅離子2%硝酸溶液性質(zhì)穩(wěn)定,用火焰原子吸收分光光度法測定,操作簡便,重現(xiàn)性好。

        3.2 Cu超標原因

        由表2數(shù)據(jù)可知,種植地土壤、生長3年的雷公藤根及基地常見的1年生草本植物青葙中的Cu含量都已超出《中國藥典》標準,但是符合土壤環(huán)境質(zhì)量二級標準(≤50 mg/kg)。雷公藤藥材中銅偏高的主要原因是土壤中含銅量偏高所致。數(shù)據(jù)顯示3年生雷公藤根中Cu含量高出一年生青葙13.571 mg/kg,說明雷公藤根對土壤中的銅也有一定的富集作用。

        3.3 雷公藤制劑安全性評價

        由表2數(shù)據(jù)可知,盡管藥材中Cu的含量超標,但提取液中Cu的含量在安全范圍內(nèi)。因為雷公藤的生長周期是6年,而本研究選取的是生長3年的雷公藤根,故應嚴密關注雷公藤生長過程中Cu的富集情況,確保雷公藤制劑用藥安全。

        4 結束語

        測定結果顯示,Cu在雷公藤種植基地的土壤中含量為26.282 8 mg/kg,青葙中含量為23.171 6 mg/kg,3年生雷公藤根中含量為36.742 2 mg/kg,藥渣中含量為20.883 3 mg/kg,提取液中含量為6.975 0 mg/kg。除提取液外,其他樣品中Cu的含量均超出了《中國藥典》標準20 mg/kg,超標的主要原因是土壤中銅的含量過高,但雷公藤制劑中Cu含量在安全范圍內(nèi)。

        在藥材種植中,土壤、環(huán)境中有毒重金屬的含量超標會影響藥材的質(zhì)量。因此,在種植藥材選址過程中,應該加大對土壤、水中有毒重金屬含量的檢測和控制[9]。

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