陳招芳，李恒剛，許軻，黃金秋，汪志輝,，吳林，王迅*

1(四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 園藝學(xué)院，四川 成都，611130)2(四川農(nóng)業(yè)大學(xué)果蔬研究所，四川 成都，611130) 3(四川省園藝作物技術(shù)推廣總站，四川 成都，610041)4(吉林農(nóng)業(yè)大學(xué) 園藝學(xué)院，吉林 長春，130118)

藍(lán)莓(Vacciniumspp.)又名越橘，屬于杜鵑花科 越橘屬，為多年生落葉或常綠灌木或小灌木樹種。藍(lán)莓果實(shí)為小型漿果，風(fēng)味獨(dú)特、果肉細(xì)膩、酸甜適口、香氣宜人，富含花色苷、有機(jī)酸、維生素等營養(yǎng)成分，被譽(yù)為“眾果之王”、“超級水果”[1]。藍(lán)莓商業(yè)化種植經(jīng)濟(jì)效益高，發(fā)展迅速，空間巨大。近年來，各地開展了大量的引種和選育工作，對品種表現(xiàn)進(jìn)行相關(guān)研究，旨在篩選出適宜當(dāng)區(qū)的優(yōu)良品種[2]。吳林等[3]在吉林省進(jìn)行了多個(gè)品種的引種試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)矮叢藍(lán)莓和半高叢藍(lán)莓的豐產(chǎn)性和果實(shí)品質(zhì)表現(xiàn)良好，謝國芳等[4]評價(jià)了貴州引種的12個(gè)早熟藍(lán)莓品種的品質(zhì)特征，表明‘瑞卡’、‘早藍(lán)’、‘北陸’等5個(gè)品種的綜合品質(zhì)較好，適合在貴州進(jìn)一步栽培推廣。楊夫臣等[5]對湖北引進(jìn)的14個(gè)藍(lán)莓品種的生物學(xué)特征進(jìn)行觀測，篩選出‘藍(lán)豐’、‘公爵’等8個(gè)優(yōu)良品種。王朝文等[6]在云南麗江進(jìn)行藍(lán)莓果實(shí)品質(zhì)的試驗(yàn)分析，初步證明‘藍(lán)豐’、‘北陸’、‘布里吉塔’和‘燦爛’更適宜在云南麗江栽培推廣。宋明華等[7]在重慶地區(qū)進(jìn)行了‘藍(lán)雨’與‘萊克西’的引種試驗(yàn)，2個(gè)品種均表現(xiàn)出較強(qiáng)的適應(yīng)性。

四川地區(qū)藍(lán)莓引種開始于2004年左右[8]，主栽類型為南高品種、少量北高品種和兔眼品種。近年來，四川藍(lán)莓商業(yè)化種植面積不斷擴(kuò)大，品種引入的力度和渠道也不斷加大和擴(kuò)寬，但很多品種栽種數(shù)年后出現(xiàn)產(chǎn)量低、品質(zhì)低、抗性差等問題，嚴(yán)重影響了產(chǎn)業(yè)發(fā)展。新品種引進(jìn)后，往往難以迅速判斷其在四川氣候生態(tài)條件下種植的優(yōu)劣。因此，有必要為新引進(jìn)品種樹立品比標(biāo)準(zhǔn)，便于快速分辨新品種的品種優(yōu)劣，為新品種的推廣提供理論依據(jù)。本試驗(yàn)以‘奧尼爾’、‘布里吉塔’、‘燦爛’為試驗(yàn)材料，3個(gè)品種在四川地區(qū)引種較早、表現(xiàn)穩(wěn)定、品質(zhì)良好，目前推廣面積廣泛。試驗(yàn)通過測定藍(lán)莓品種果實(shí)生長發(fā)育過程中外觀指標(biāo)、風(fēng)味指標(biāo)、質(zhì)地指標(biāo)和營養(yǎng)指標(biāo)等，以了解不同藍(lán)莓品種果實(shí)綜合品質(zhì)隨生長發(fā)育的變化情況，旨在為四川地區(qū)藍(lán)莓的引種與選育提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

供試材料均采自四川省邛崍市藍(lán)莓種植基地。選取常規(guī)管理、樹勢健壯、樹冠大小基本一致、生長結(jié)果正常的早熟品種‘奧尼爾’(O’Neal)、中熟品種‘布里吉塔’(Brigitta)和晚熟品種‘燦爛’(Britewell)為試材，3個(gè)藍(lán)莓品種均是四川地區(qū)大面積推廣種植的代表性品種?！畩W尼爾’樹勢強(qiáng)，開張型，果實(shí)5月上旬成熟，果實(shí)大、扁圓形；‘布里吉塔’樹勢強(qiáng)，樹姿直立，果實(shí)6月上旬成熟，果實(shí)大、圓形；‘燦爛’樹勢中等，果實(shí)7月上中旬成熟，果實(shí)小、圓形。

沒食子酸、蘆丁、矢車菊素-3-葡萄糖苷、抗壞血酸、福林-酚試劑，Sigma公司；其他化學(xué)試劑均為國產(chǎn)分析純；所用水為蒸餾水。

1.2 儀器與設(shè)備

分光光度計(jì)UV-1800型，日本島津公司；TD-45手持?jǐn)?shù)顯糖度計(jì)，遼寧栢益儀器銷售有限公司；CR-400型色差儀，日本美能達(dá)公司；高速冷凍離心機(jī)Avanti-J-E型，德國貝克曼公司；電子數(shù)顯游標(biāo)卡尺，上海量刃具廠。

1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)于2019年4月開始采樣，根據(jù)果實(shí)發(fā)育階段[9-10]，分為幼果期(YF)、綠果期(GF)、大果期(BF)、粉果期(PKF)、紫果期(PEF)和成熟期(MF)，共6個(gè)時(shí)期，依次在盛花期后25、35、42、49、56、63 d采樣，隨機(jī)選自生長發(fā)育一致、大小均勻一致且無病蟲害的果實(shí)，每次采樣果實(shí)總質(zhì)量不低于300 g，直至果實(shí)成熟。樣品采集后，一部分用于鮮樣指標(biāo)測定，另一部分用刀片將果皮和果肉分離，隨后立即用液氮速凍，保存于-80 ℃冰箱。

1.4 測定方法

1.4.1 藍(lán)莓果實(shí)外觀品質(zhì)測定

單果重：隨機(jī)稱取30個(gè)藍(lán)莓果實(shí)，測定其質(zhì)量，計(jì)算每個(gè)品種果實(shí)單果重的平均值；采用數(shù)顯游標(biāo)卡尺分別測量果實(shí)縱徑橫徑并計(jì)算果形指數(shù)，果形指數(shù)=果實(shí)縱徑/果實(shí)橫徑；隨機(jī)取20個(gè)藍(lán)莓果實(shí)，采用CR-400型色差儀測定赤道線上分布均勻的3個(gè)部位的L*值、a*值、b*值。各指標(biāo)均重復(fù)測定3次(下同)。

1.4.2 藍(lán)莓果實(shí)風(fēng)味品質(zhì)測定

可溶性固形物(total soluble solid，TSS)：采用TD-45型數(shù)顯式手持糖度計(jì)測定，以鮮重(FW)計(jì)；可溶性糖(water soluble sugar, WSS)：采用蒽酮試劑法測定[11]，以鮮重計(jì)；可滴定酸(titratable acidity，TA)：參照GB/T 12456—2008《食品中總酸的測定方法》測定，以鮮重計(jì)；通過可溶性糖含量和可滴定酸含量的比值計(jì)算糖酸比。

1.4.3 藍(lán)莓果實(shí)質(zhì)地品質(zhì)測定

采用手持便攜硬度計(jì)測定果實(shí)硬度，測定時(shí)果實(shí)去皮，以最大破裂的力為核定果實(shí)硬度；果膠含量參考DENG等咔唑比色法，略加改動(dòng)[12]，以鮮重計(jì)，分別提取可溶性果膠(water soluble pectin, WSP)、EDTA溶解性果膠(EDTA soluble pectin, ESP)和Na2CO3溶解性果膠(Na2CO3soluble pectin, NSP)。

1.4.4 藍(lán)莓果實(shí)營養(yǎng)品質(zhì)測定

VC含量：采用1,10-菲羅琳分光光度計(jì)法測定[11]，以鮮重計(jì)；可溶性蛋白質(zhì)含量：采用考馬斯亮藍(lán)染色法測定，以100 g鮮樣中所含牛血清蛋白量(mg)表示[11]；花色苷含量：采用pH示差法測定，以每克鮮樣中所含矢車菊素-3-葡萄糖苷量(mg)表示[13]；類黃酮含量：采用硝酸鋁比色法測定，以100 g鮮樣中所含蘆丁量(mg)表示[11]；總酚含量：采用福林-酚比色法測定，以100 g鮮樣中所含沒食子酸量(mg)表示[11]；單寧含量：采用EDTA 絡(luò)合滴定法測定[14]，以鮮重計(jì)。

1.5 試驗(yàn)處理與分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Microsoft Excel 2010軟件進(jìn)行初步分析并制作相應(yīng)的趨勢圖，用SPSS 20.0軟件進(jìn)行差異顯著性分析，多重比較采用Student-Newman-Keuls (SNK)q檢驗(yàn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同藍(lán)莓品種果實(shí)發(fā)育過程中外觀品質(zhì)的動(dòng)態(tài)變化

藍(lán)莓果實(shí)生長指標(biāo)表明，3種藍(lán)莓在果實(shí)發(fā)育過程中都呈現(xiàn)2個(gè)迅速生長期，分別在綠果期至紫果期(日均增長量達(dá)到0.052 g)和紫果期至成熟期(日均增長量達(dá)到0.035 g)(表1)。在大果期至成熟期，3個(gè)藍(lán)莓品種單果重含量差異顯著，‘奧尼爾’的單果重整體高于‘布里吉塔’與‘燦爛’(P<0.05)。隨著藍(lán)莓果實(shí)的生長發(fā)育，其橫徑和縱徑以一定比例增加，但果形指數(shù)呈現(xiàn)下降趨勢(表1)。在果實(shí)成熟期，3個(gè)藍(lán)莓品種果實(shí)橫徑均值為11.32 mm，縱徑均值為15.44 mm，其中‘奧尼爾’的橫徑與縱徑均顯著高于其他2個(gè)品種(P<0.05)。在藍(lán)莓果實(shí)發(fā)育過程中，‘奧尼爾’與‘布里吉塔’的果實(shí)形狀由圓形逐漸變?yōu)楸鈭A形，而‘燦爛’果實(shí)始終保持為近圓形。

表1 不同藍(lán)莓品種果實(shí)發(fā)育過程中外觀品質(zhì)的變化Table 1 Appearance quality changes in different cultivars of blueberry fruit at different development stages

注：同列不同小寫字母表示同一指標(biāo)的同一發(fā)育時(shí)期不同品種間差異顯著(P<0.05)(下同)

2.2 不同藍(lán)莓品種果實(shí)發(fā)育過程中果實(shí)色澤的動(dòng)態(tài)變化

隨著果實(shí)發(fā)育果皮顏色變化如圖1所示，‘燦爛’的轉(zhuǎn)色速度較快，但轉(zhuǎn)色周期長；‘布里吉塔’轉(zhuǎn)色期最早，轉(zhuǎn)色周期次之；‘奧尼爾’的轉(zhuǎn)色速度較慢，但轉(zhuǎn)色周期短。3個(gè)藍(lán)莓品種果實(shí)發(fā)育過程中，代表果實(shí)亮度的L*值均呈先升后降的趨勢(圖2-A)，三者L*值均在大果期達(dá)到最大值，在果實(shí)成熟期，三者的L*值相近。代表果實(shí)紅綠偏向的a*值在3個(gè)品種中變化趨勢相似，均呈現(xiàn)出上升下降的波動(dòng)(圖2-B)，a*值均在紫果期達(dá)到最大值，成熟期時(shí)數(shù)值有所下降，a*值最大的為‘奧尼爾’。代表果實(shí)黃藍(lán)偏向的b*值呈現(xiàn)出由高到低的變化趨勢(圖2-C)，b*值最高值均出現(xiàn)在大果期，而最低值均出現(xiàn)在最終的成熟期，‘布里吉塔’的b*值最大，而‘奧尼爾’與‘燦爛’無明顯差異。

圖1 不同藍(lán)莓品種果實(shí)發(fā)育過程中果實(shí)顏色的變化
Fig.1 Color changes in different cultivars of blueberry fruit at different development stages

A-L*;B-a*;C-b*
圖2 不同藍(lán)莓品種果實(shí)發(fā)育過程中果皮色差指標(biāo)的變化
Fig.2 Skin color indicators in different cultivars of blueberry fruit at different development stages

2.3 不同藍(lán)莓品種果實(shí)發(fā)育過程中風(fēng)味品質(zhì)的動(dòng)態(tài)變化

3個(gè)藍(lán)莓品種的可溶性固形物含量均呈逐漸上升趨勢(表2)。在幼果期至粉果期，3個(gè)藍(lán)莓品種的TSS含量差異顯著(P<0.05)；在果實(shí)成熟期，‘燦爛’的TSS含量最高，為(14.27±0.06)%，而‘奧尼爾’與‘布里吉塔’含量相近。果實(shí)可溶性糖含量變化趨勢與TSS的變化趨勢一致(表2)，果實(shí)成熟期時(shí)，3個(gè)藍(lán)莓品種的WSS含量為11.62%～14.09%，均值為12.62%，其中‘燦爛’含糖量最高。果實(shí)可滴定酸含量呈先增后降趨勢(表2)，3個(gè)品種均在大果期達(dá)到最大值，‘奧尼爾’含量最高[(3.81±0.14)%]，‘燦爛’含量最低[(1.54±0.06)%]。在果實(shí)成熟期，三者的TA含量差異顯著(P<0.05)，其中‘布里吉塔’含量最高，‘燦爛’含量最低。3個(gè)品種果實(shí)的糖酸比在果實(shí)發(fā)育至成熟期均逐漸上升，‘燦爛’上升幅度最大，‘奧尼爾’次之，‘布里吉塔’較為平穩(wěn)。

表2 不同藍(lán)莓品種果實(shí)發(fā)育過程中風(fēng)味品質(zhì)的變化Table 2 Flavor quality changes in different cultivars of blueberry fruit at different development stages

2.4 不同藍(lán)莓品種果實(shí)發(fā)育過程中質(zhì)地品質(zhì)的動(dòng)態(tài)變化

藍(lán)莓果實(shí)硬度呈持續(xù)下降趨勢(表3)。在綠果期至粉果期，果實(shí)硬度下降速度較快，而在粉果期至成熟期，下降速度相對緩慢。在果實(shí)綠果期和大果期，‘燦爛’硬度最高，‘奧尼爾’硬度最低；在果實(shí)成熟期，‘布里吉塔’硬度最高，‘燦爛’與‘奧尼爾’相近。果膠含量如表3所示，3個(gè)藍(lán)莓品種的WSP含量呈逐漸上升趨勢。其中‘燦爛’的上升速率最快，由(幼果期)的(0.07±0.01) mg/g上升到(成熟期)的(0.33±0.03) mg/g，增加了0.26 mg/g，在果實(shí)成熟期，‘燦爛’的WSP含量最高[(0.33±0.03) mg/g]，‘布里吉塔’不及‘燦爛’含量的1/2。果實(shí)ESP含量緩慢增加。除幼果期，‘燦爛’各時(shí)期的ESP含量均高于‘布里吉塔’和‘奧尼爾’，‘奧尼爾’含量相對最低。NSP含量在3種藍(lán)莓果實(shí)中均呈下降趨勢，NSP含量的變化趨勢與WSP含量呈負(fù)相關(guān)關(guān)系。在果實(shí)成熟期，‘燦爛’NSP含量最高，‘布里吉塔’含量最低。

注：“—”表示未檢出(下同)

2.5 不同藍(lán)莓品種果實(shí)發(fā)育過程中營養(yǎng)品質(zhì)的動(dòng)態(tài)變化

3個(gè)藍(lán)莓品種果實(shí)在粉果期時(shí)開始積累花色苷，至紫果期和成熟期時(shí)，花色苷含量快速上升(表4)。在果實(shí)成熟期，三者的花色苷含量相近，其中‘燦爛’的含量相對較高，為(0.69±0.02)mg/g。藍(lán)莓果實(shí)中VC含量整體呈下降趨勢。在果實(shí)成熟期，‘燦爛’的VC含量顯著高于其他2個(gè)品種(P<0.05)，而‘奧尼爾’與‘布里吉塔’含量相差不大(表4)。各品種果實(shí)的可溶性蛋白質(zhì)含量在大果期時(shí)最高。果實(shí)成熟時(shí)，三者含量差異顯著(P<0.05)，‘布里吉塔’含量最高，‘奧尼爾’含量最低。類黃酮含量隨著果實(shí)生長發(fā)育緩慢增加(表4)，果實(shí)成熟時(shí)，‘燦爛’含量最高，‘奧尼爾’與‘布里吉塔’含量相近。各品種藍(lán)莓果實(shí)發(fā)育過程中總酚和單寧含量隨著果實(shí)生長發(fā)育逐漸上升(表4)。各品種的總酚與單寧含量在成熟期差異顯著(P<0.05)，其中‘奧尼爾’中的總酚含量最低，‘布里吉塔’最高；‘奧尼爾’的單寧含量最高，‘燦爛’最低。

3 討論與結(jié)論

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，藍(lán)莓果實(shí)發(fā)育呈現(xiàn)2個(gè)迅速生長期(雙‘S’生長曲線)，與大多數(shù)漿果果實(shí)的生長曲線類似[15-16]。果實(shí)發(fā)育過程中，藍(lán)莓果實(shí)縱徑與橫徑增大速度存在差異，果形指數(shù)逐漸下降，使果實(shí)趨于扁圓形?！畩W尼爾’果形變化明顯，成熟果實(shí)呈明顯扁圓形，‘燦爛’果形變化不明顯，成熟果實(shí)呈近圓形[17]。果實(shí)色差值L*值結(jié)果顯示，‘燦爛’果實(shí)表皮色彩略深于‘布里吉塔’和‘奧尼爾’；根據(jù)色差值b*值結(jié)果，‘布里吉塔’果實(shí)表皮藍(lán)色更加突出。韓斯等[18]測定了山東省主栽藍(lán)莓品種的果實(shí)色澤，其中‘奧尼爾’與‘布里吉塔’的L*值差異不顯著，a*、b*值存在顯著差異性，與本研究的結(jié)果一致。

表4 不同藍(lán)莓品種果實(shí)發(fā)育過程中營養(yǎng)品質(zhì)的變化Table 4 Nutritional quality changes in different cultivars of blueberry fruit at different development stages

糖酸含量是影響藍(lán)莓品質(zhì)的重要指標(biāo)。本研究結(jié)果顯示，隨著果實(shí)發(fā)育成熟可溶性糖逐漸上升，且‘布里吉塔’在果實(shí)發(fā)育成熟過程中的可溶性糖含量顯著高于‘燦爛’和‘奧尼爾’，而可滴定酸含量不斷下降，其中，‘燦爛’的可滴定酸含量顯著低于其他品種，與前人對藍(lán)莓果實(shí)品質(zhì)的測定結(jié)果類似[19-20]。藍(lán)莓果實(shí)的風(fēng)味主要由糖酸比決定的，3種藍(lán)莓的糖酸比均在成熟期達(dá)到了最大值，但差異顯著，‘燦爛’因其糖酸比最大，風(fēng)味較佳，‘布里吉塔’因其糖酸比最低，風(fēng)味相對平淡。

果實(shí)質(zhì)地是影響果實(shí)品質(zhì)的因素之一[21]，質(zhì)地較硬更有利于減少采摘、包裝、運(yùn)輸過程中的損壞。3種藍(lán)莓的果實(shí)硬度逐漸下降，在未成熟時(shí)差異明顯，但成熟時(shí)差異不明顯。果膠是維持果實(shí)硬脆度的重要細(xì)胞壁物質(zhì)[22]。水溶性果膠是果實(shí)中可溶性果膠成分，其含量越高，說明細(xì)胞壁降解越嚴(yán)重，果實(shí)軟化程度越高；相反，Na2CO3溶解性果膠是不可溶性的果膠成分，含量越低，果實(shí)軟化程度越高[23]。本實(shí)驗(yàn)中3種藍(lán)莓果實(shí)的水溶性果膠含量呈逐漸上升趨勢，EDTA溶解性果膠含量緩慢增加，而Na2CO3溶解性果膠含量基本呈下降趨勢。其中，水溶性果膠含量在果實(shí)成熟后期顯著增加，與果實(shí)硬度呈顯著負(fù)相關(guān)系，而Na2CO3溶解性果膠含量與水溶性果膠含量呈正相關(guān)，與果實(shí)硬度呈顯著負(fù)相關(guān)。

果實(shí)營養(yǎng)品質(zhì)是保證果實(shí)經(jīng)濟(jì)價(jià)值和加工附加值的重要因素[24]。本研究結(jié)果表明果實(shí)中花色苷含量與果實(shí)色澤密切相關(guān)，韓斯等[18]研究表明，果實(shí)色澤越佳，其花色苷含量相對較高。成熟果實(shí)中，‘燦爛’的花色苷含量相對較高，可能因?yàn)椤疇N爛’是晚熟品種，果實(shí)發(fā)育成熟期長，利于積累更多花青素[19]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示藍(lán)莓果實(shí)VC的積累主要在幼果期，這與裴嘉博等[19]對越橘果實(shí)中VC的測定結(jié)果類似。有研究報(bào)道指出，‘布里吉塔’果實(shí)VC含量相對較低[17]，本研究結(jié)果進(jìn)一步證明此結(jié)論。類黃酮與總酚屬于多酚類物質(zhì)，是藍(lán)莓果實(shí)中重要的功能性成分。在果實(shí)生長發(fā)育過程中，總酚含量逐漸上升，變化幅度不大，但在不同品種中含量差異較大[25-26]。本實(shí)驗(yàn)也觀察到3種藍(lán)莓果實(shí)總酚含量差異顯著，‘布里吉塔’含量在成熟期遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于‘燦爛’和‘奧尼爾’。在果實(shí)生長發(fā)育過程中，類黃酮含量變化趨勢與總酚一致，其中，‘奧尼爾’的類黃酮含量比其他品種最先達(dá)到最大值，這應(yīng)該和該品種是早熟品種有關(guān)，生長發(fā)育較早。有研究表明，隨著果實(shí)的發(fā)育成熟，苯丙烷類代謝途徑中合成類黃酮和總酚的關(guān)鍵酶及其調(diào)控因子的活性增加[27]，有利于類黃酮和總酚的合成積累。單寧是酚類物質(zhì)的一種，本研究測定的果實(shí)單寧含量與總酚含量變化趨勢相似，隨著果實(shí)的生長發(fā)育緩慢上升。