沈紅衛(wèi) 麻建平

(建德市第一人民醫(yī)院呼吸內(nèi)科，浙江 建德 311600)

重癥肺炎是呼吸系統(tǒng)常見的一種危重癥，其發(fā)病率呈逐年上升趨勢，常累及器官，具有進(jìn)展快、死亡率高及病情危重等特點，且常見于老年人〔1,2〕。因此，針對老年重癥肺炎患者，采取及時有效的診斷和治療方法尤為重要〔3,4〕?，F(xiàn)階段對于重癥肺炎發(fā)病機制尚未完全闡明，多數(shù)認(rèn)為炎癥反應(yīng)是促進(jìn)重癥肺炎病情進(jìn)展的重要因素，可溶性細(xì)胞間黏附分子(sICAM)-1、白細(xì)胞介素-1受體1型(IL-1R1)、腫瘤壞死因子相關(guān)激活蛋白(CD40L)等作為炎癥指標(biāo)，可反映或評估體內(nèi)炎癥反應(yīng)程度，從而評估感染性病情的嚴(yán)重程度〔5〕。重癥肺炎發(fā)病免疫學(xué)機制中最重要為Th1/Th2平衡失調(diào)，而其中發(fā)現(xiàn)在調(diào)節(jié)Th1和Th2細(xì)胞分化的反饋機制中TBX21基因處于重要地位〔6〕。本研究探討老年重癥肺炎與sICAM-1、IL-1R1、CD40L及TBX21基因多態(tài)性的相關(guān)性，為臨床診斷和治療老年重癥肺炎提供參考。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇建德市第一人民醫(yī)院2016年12月至2017年12月老年重癥肺炎患者120例納入觀察組，符合《中國成人獲得性肺炎診斷和治療指南(2016年版)》〔7〕中相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)。納入標(biāo)準(zhǔn)：①年齡65～85歲，符合重癥肺炎診斷標(biāo)準(zhǔn)；②得知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn)：①既往有肝纖維化、肺結(jié)核者；②既往有惡性腫瘤、血液疾病者；③精神疾病者；④合并肝腎嚴(yán)重異常者。觀察組男68例，女52例；年齡65～79〔平均(72.34±5.41)〕歲。另選擇同期老年普通肺炎患者113例納入對照組，男62例，女51例；年齡65～78〔平均(71.63±4.98)〕歲。兩組一般資料比較無明顯差異(P>0.05)。

1.2方法

1.2.1肺功能檢測 第1秒最大呼吸容積(FEV1)、用力肺活量(FVC)及最高呼氣流速(PEF)采用肺功能儀(捷斯特)測定。

1.2.2血清sICAM-1、IL-1R1和CD40L水平檢測 所有患者入院24 h內(nèi)抽取外周靜脈血3 ml，分離血清，離心半徑15 cm，離心10 min，分離血清，置于-20℃下保存待測。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗測定sICAM-1、IL-1R1和CD40L表達(dá)，人sICAM-1試劑盒、人IL-1R1試劑盒、人CD40L試劑盒來源于南京森貝伽生物科技有限公司。

1.2.3TBX21基因多態(tài)性檢測 所有患者入院24 h內(nèi)抽取外周靜脈血3 ml，采用EDTA2-Na抗凝，白細(xì)胞基因組DNA提取嚴(yán)格根據(jù)全血DNA提取試劑盒說明書標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行操作，置于-20℃下保存待測。根據(jù)Genbank數(shù)據(jù)庫提供的全序列，采用引物設(shè)計軟件對各位點所需PCR引物及相應(yīng)的內(nèi)切酶進(jìn)行設(shè)計。針對選擇TBX21的s16947078位點，嚴(yán)格根據(jù)目標(biāo)序列片段，rs16947078多態(tài)性位點基因分型利用MassARRAY SNP分型技術(shù)檢測。

1.3觀察指標(biāo) ①比較兩組肺功能變化；②比較兩組血清sICAM-1、IL-1R1和CD40L水平變化；③比較兩組TBX21基因位點rs16947078等位基因分布情況；④比較兩組TBX21基因位點rs16947078基因頻率分布。

1.4統(tǒng)計學(xué)方法 運用SPSS22.0統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行χ2及t檢驗。

2 結(jié) 果

2.1兩組肺功能比較 觀察組FEV1、FVC和PEF明顯低于對照組(P<0.05)。見表1。

表1 兩組肺功能比較

2.2兩組血清sICAM-1、IL-1R1和CD40L水平比較 觀察組血清sICAM-1、IL-1R1和CD40L水平明顯高于對照組(P<0.05)。見表2。

表2 兩組血清sICAM-1、IL-1R1和CD40L水平比較

2.3兩組TBX21基因位點rs16947078等位基因分布比較 觀察組TBX21基因位點rs16947078等位基因G分布明顯高于對照組，而等位基因A分布明顯低于對照組(P<0.05)。見表3。

表3 兩組TBX21基因位點rs16947078等位基因分布比較〔n(%)〕

2.4兩組TBX21基因位點rs16947078基因頻率分布比較 觀察組TBX21基因位點rs16947078基因型GG頻率明顯高于對照組而基因型AG頻率明顯低于對照組(P<0.05)；而兩組TBX21基因位點rs16947078基因型AA比較無明顯差異(P>0.05)。見表4。

表4 兩組TBX21基因位點rs16947078基因頻率分布比較〔n(%)〕

3 討 論

重癥肺炎是具有嚴(yán)重并發(fā)癥或者重度癥狀的一種肺炎，若不采取及時有效的治療重癥肺炎方法，會威脅患者生命安全〔8～12〕。因此，采取及時有效的診斷和治療重癥肺炎方法尤為重要。重癥感染性疾病的不斷進(jìn)展，不僅與炎癥反應(yīng)本身相關(guān)，并且與調(diào)控炎癥反應(yīng)進(jìn)行的相關(guān)因子密切相關(guān)。免疫球蛋白超家族成員，主要分布在淋巴細(xì)胞、白細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞及上皮細(xì)胞等表面，在自身免疫反應(yīng)、炎癥及哮喘等病理狀態(tài)下，其表達(dá)增多，致使細(xì)胞間黏附分子(ICAM)-1水平上升。sICAM-1是細(xì)胞表面糖蛋白脫落后形成的溶解狀態(tài)的一種黏附分子。在重癥肺炎中的炎癥應(yīng)答過程從肺泡毛細(xì)血管游走到支氣管、氣管而發(fā)揮作用〔13〕。重癥肺炎時，ICAM-1上升可能主要是由于嗜酸性粒細(xì)胞、肥大細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等浸潤及上皮細(xì)胞損傷，損傷的上皮細(xì)胞及這些炎癥浸潤細(xì)胞釋放組胺、白三烯等大量細(xì)胞因子和炎癥介質(zhì)〔14〕。IL-1R1可通過誘導(dǎo)下游細(xì)胞炎癥因子如IL-6、IL-10等表達(dá)，促進(jìn)單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等對肺泡上皮組織的浸潤或損傷，從而促進(jìn)病情的進(jìn)展。IL-1R1在加劇細(xì)胞的不穩(wěn)定性或者促進(jìn)氧化應(yīng)激損傷等方面發(fā)揮了重要作用。研究表明，IL-1R1可通過影響細(xì)胞膜上離子通道的開放，加劇炎癥性損傷和肺泡組織缺血〔15〕。CD40L在免疫反應(yīng)中發(fā)揮重要作用。近年來研究發(fā)現(xiàn)，CD40L在細(xì)菌性肺炎中呈高表達(dá)〔16，17〕。CD40L與CD40結(jié)合后能夠激活體內(nèi)抗原提呈細(xì)胞(APC)，進(jìn)一步使炎癥反應(yīng)與T細(xì)胞得以激活。本研究表明，老年重癥肺炎患者血清sICAM-1、IL-1R1及CD40L高表達(dá)。

研究發(fā)現(xiàn)TBX21與哮喘的易感性相關(guān)，其調(diào)控特異性轉(zhuǎn)錄因子T-bet可調(diào)控CD4+細(xì)胞的原始細(xì)胞Th的分化〔18〕。與此同時，T-bet蛋白表達(dá)下降能夠反映機體對病毒感染反應(yīng)性的下降，而其表達(dá)升高與炎癥反應(yīng)相關(guān)〔19〕。本研究表明，TBX21基因位點rs16947078等位基因G可能為重癥肺炎易感基因。