李 勇，徐 飛，方詩琪，任碧瓊△

(1.湖南省第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，湖南長沙 410007；2.成都中醫(yī)藥大學(xué)，四川成都 610075)

腦卒中是人類疾病死亡的三大原因之一[1]。H型高血壓是指伴有同型半胱氨酸(Hcy)升高的一類高血壓(Hcy≥10 μmol/L)，是腦卒中最重要的高風(fēng)險(xiǎn)因素之一[2]。H型高血壓早期診斷和風(fēng)險(xiǎn)監(jiān)測(cè)是腦卒中防治工作中急需解決的難題。有研究表明：炎性反應(yīng)伴隨著高血壓的發(fā)生與發(fā)展[3]。熱休克蛋白70(eHSP70) 是熱休克蛋白家族中的一種，被稱之為“分子伴侶”，這種“分子伴侶”不僅存在于細(xì)胞內(nèi)，還可以通過不同的機(jī)制從細(xì)胞內(nèi)釋放到細(xì)胞外，進(jìn)入體液中，扮演與細(xì)胞內(nèi)完全不同的角色[4]。國內(nèi)外對(duì)Hcy及細(xì)胞eHSP70的研究尚處于起步階段，尤其對(duì)eHSP70與Hcy之間關(guān)系的研究尚屬空白。本課題試圖通過研究H型高血壓患者血液中eHSP70、C反應(yīng)蛋白(CRP)等炎性指標(biāo)表達(dá)情況來闡明eHSP70、CRP是否可以作為H型高血壓的早期篩查、診斷及風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)，為進(jìn)一步研究其治療預(yù)后以及eHSP70、CRP與Hcy相互作用關(guān)系提供理論依據(jù)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 依據(jù)1999年WHO/ISH的高血壓診斷標(biāo)準(zhǔn)，收集2016年6月至2017年10月在湖南省第二人民醫(yī)院(下稱本院)住院并確診的原發(fā)性高血壓患者165例及體檢健康者60例。從原發(fā)性高血壓患者中選取伴高同型半胱氨酸血癥(Hcy≥10 μmol/L)患者60例為H型高血壓組，其中男34例，女26例，年齡38～73歲，平均(55.0±17.0)歲；同時(shí)選取不伴高同型半胱氨酸血癥(Hcy<10 μmol/L)的原發(fā)性高血壓患者60例為非H型高血壓組；其中男32例，女28例，年齡35～68歲，平均(53.0±14.0)歲。選取體檢健康者60例為健康對(duì)照組，其中男30例，女30例，年齡28～65歲，平均(48.0±13.0)歲。所有入選者除了測(cè)量身高、體質(zhì)量、血壓、血常規(guī)等常規(guī)指標(biāo)外，結(jié)合B超、影像學(xué)檢查排除繼發(fā)性高血壓，心、腦、腎及肝臟等器官的嚴(yán)重并發(fā)癥及其他合并炎癥性疾病。

1.2方法 各組受試者在入院晨間抽取空腹靜脈血5 mL放入普通生化管內(nèi)，2 mL放入血常規(guī)管內(nèi)，血常規(guī)在30 min內(nèi)在邁瑞B(yǎng)C-5390全自動(dòng)血液細(xì)胞分析儀上檢測(cè)白細(xì)胞(WBC)，生化管在1 h內(nèi)分離出血清，并于當(dāng)日檢測(cè)三酰甘油(TG)、總膽固醇(TC)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、CRP及Hcy水平等。生化指標(biāo)均在西門子ADVIA 2400全自動(dòng)生化分析儀上檢測(cè)，相關(guān)試劑盒均為儀器自配試劑盒，嚴(yán)格依照說明書的步驟實(shí)施操作。

1.3eHSP70測(cè)定 血清e(cuò)HSP70采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)法檢測(cè)，試劑為武漢默沙克生物公司的HSP70 ELISA試劑盒。儀器為Thermo Labsystems Multi-skam MK3全自動(dòng)酶標(biāo)儀。

2 結(jié) 果

2.1各組間一般情況比較 3組之間平均年齡及性別構(gòu)成比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；非H型高血壓組和H型高血壓組的收縮壓和舒張壓均明顯高于健康對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，而H型高血壓組和非H型高血壓組之間收縮壓和舒張壓差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

2.2各組之間主要指標(biāo)的表達(dá)比較 各組之間主要指標(biāo)的表達(dá)比較見表1。H型高血壓組和非H型高血壓組eHSP70、CRP、WBC、TG均明顯高于健康對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，而TC、LDL-C、HDL-C差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；非H型高血壓組Hcy與健康對(duì)照組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，H型高血壓組Hcy明顯高于健康對(duì)照組和非H型高血壓組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；與非H型高血壓組比較，H型高血壓組的eHSP70、CRP均顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

表1 各組實(shí)驗(yàn)室主要指標(biāo)比較

續(xù)表1 各組實(shí)驗(yàn)室主要指標(biāo)比較

注:P1為健康對(duì)照組與非H型高血壓組的比較;P2為健康對(duì)照組與H型高血壓組的比較;P3為非H型高血壓組與H型高血壓組的比較*P<0.05。

2.3低風(fēng)險(xiǎn)(10 μmol/L20 μmol/L)組eHSP70、CRP的水平比較 與低風(fēng)險(xiǎn)組比較，高風(fēng)險(xiǎn)組Hcy、eHSP70、CRP均有明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

3 討 論

近年研究表明，在高血壓病程中伴隨著局部和系統(tǒng)性的炎性反應(yīng)，免疫炎癥機(jī)制參與高血壓的發(fā)生與發(fā)展[3]。本研究結(jié)果顯示高血壓患者的eHSP70、CRP、WBC、TG均明顯高于健康對(duì)照組，而TC并無明顯差異；CRP、WBC這些常見的炎性指標(biāo)的升高說明在高血壓病程中伴隨著一定的炎性反應(yīng)，這與其他學(xué)者的研究結(jié)果一致[5]。TG是血脂的重要成分，TG在血管內(nèi)皮的堆積是引起高血壓的重要誘因，且有研究表明TG與炎性反應(yīng)的嚴(yán)重程度呈正相關(guān)關(guān)系[6]。

eHSP70是一種可通過幫助新生的和變性的蛋白質(zhì)正確折疊，促進(jìn)不可恢復(fù)的變性蛋白質(zhì)的降解，對(duì)蛋白質(zhì)和細(xì)胞起質(zhì)量控制作用的“分子伴侶”。eHSP70不僅存在于細(xì)胞內(nèi)，還可以通過不同的機(jī)制從細(xì)胞內(nèi)釋放到細(xì)胞外，進(jìn)入體液中，扮演與細(xì)胞內(nèi)完全不同的角色。有研究發(fā)現(xiàn)eHSP70家族有刺激人類單核細(xì)胞的TLR-2/TLR-4以及CD14相關(guān)路徑的能力，導(dǎo)致核轉(zhuǎn)錄因子κB(NF-κB)及干擾素調(diào)節(jié)因子(IRF)信號(hào)通路的活化，這種伴侶分子功能通過包括白細(xì)胞介素1(IL-1)，IL-6以及腫瘤壞死因子α(TNF-α)等前炎癥因子的分泌刺激固有免疫系統(tǒng)[7-8]。本文的前期研究基礎(chǔ)顯示eHSP70作為免疫系統(tǒng)警示因子在急性創(chuàng)傷、腫瘤以及感染性疾病患者外周血中明顯升高，是疾病診斷和預(yù)后判斷的血清學(xué)標(biāo)志物[9-12]。本研究中筆者發(fā)現(xiàn)H型高血壓組較非H型高血壓組和健康對(duì)照組eHSP70顯著升高。表明H型高血壓患者較非H型高血壓患者存在更加明顯的炎性反應(yīng)，這可能是由于高濃度eHSP70的釋放作為一種類似于病原體的危險(xiǎn)信號(hào)與Toll樣受體結(jié)合通過上調(diào)黏附分子、共刺激分子、細(xì)胞因子和趨化因子分泌觸發(fā)促炎反應(yīng)[13]。CRP是機(jī)體受到微生物入侵或組織損傷等炎癥性刺激時(shí)肝細(xì)胞合成的急性時(shí)相蛋白。有研究表明CRP亦可介導(dǎo)某些炎癥的發(fā)生[14]。本文發(fā)現(xiàn)H型高血壓患者較非H型高血壓患者和健康對(duì)照組CRP亦有顯著升高，這可能是由于高濃度CRP可直接參與局部和全身炎性反應(yīng)并導(dǎo)致血管內(nèi)皮細(xì)胞的損傷，使血管對(duì)內(nèi)皮依賴性舒血管物質(zhì)的反應(yīng)性減弱，血管阻力進(jìn)一步增加，從而加重動(dòng)脈血管損傷，增加炎性反應(yīng)的發(fā)生率[15]。

研究表明，血漿Hcy是導(dǎo)致腦卒中發(fā)生的一個(gè)重要危險(xiǎn)因素，血清Hcy每升高5 μmoL/L，腦血管疾病的風(fēng)險(xiǎn)增加59%，冠心病的風(fēng)險(xiǎn)增加32%；而Hcy每下降3 μmol/L，腦卒中的風(fēng)險(xiǎn)下降19%，缺血性心臟病的風(fēng)險(xiǎn)下降11%。而且高血壓與高Hcy具有強(qiáng)烈的協(xié)同作用，可導(dǎo)致血管疾病的風(fēng)險(xiǎn)遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于高Hcy和其他危險(xiǎn)因素聯(lián)合作用的風(fēng)險(xiǎn)[14-15]。本文根據(jù)Hcy的水平高低將H型高血壓分為高風(fēng)險(xiǎn)(Hcy≥20 μmol/L)組和低風(fēng)險(xiǎn)(10 μmol/L≤Hcy<20 μmol/L)組，比較兩組eHSP70、CRP表達(dá)水平，高風(fēng)險(xiǎn)組較低風(fēng)險(xiǎn)組eHSP70、CRP水平均顯著升高，這提示eHSP70、CRP可作為一項(xiàng)有效的生物標(biāo)志物用于H型高血壓的風(fēng)險(xiǎn)監(jiān)測(cè)。

4 結(jié) 論

H型高血壓患者血清e(cuò)HSP70和CRP等炎性指標(biāo)較非H型高血壓患者和健康者均有顯著升高，且與風(fēng)險(xiǎn)程度呈正相關(guān)關(guān)系，可將其作為H型高血壓的臨床診斷和風(fēng)險(xiǎn)監(jiān)測(cè)的實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)。eHSP70和CRP對(duì)于H性高血壓的療效及預(yù)后的判斷，以及它們的水平和Hcy的代謝之間存在怎樣的相互作用機(jī)制還有待進(jìn)一步研究。