張曉冉，李欣悅，于 水，王詩(shī)雯，刁全平

(鞍山師范學(xué)院 化學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院，遼寧 鞍山 114007)

在中國(guó)傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)中，中藥配伍使用是其顯著特點(diǎn)之一，也是中藥發(fā)揮特殊療效的重要原因[1-2]。從現(xiàn)代藥物藥理角度分析，每味中藥均含有多種化學(xué)成分，多味中藥配伍使用時(shí)化學(xué)成分更多。在藥湯的熬制過(guò)程中，多種化學(xué)成分之間可能會(huì)發(fā)生多種目前尚不明確的化學(xué)變化或者物理變化，或有效成分在溶出時(shí)相互影響[3-5]，不同化學(xué)成分的溶出量發(fā)生不同的變化。采用現(xiàn)代分析方法對(duì)中藥配伍使用前后不同化學(xué)成分溶出量的變化進(jìn)行研究，有利于中藥藥理的進(jìn)一步研究。

大黃是多種廖科大黃屬的多年生植物的根莖，大黃的主要活性成分為蒽醌類(lèi)化合物，具有抗腫瘤、抗菌等效能，還具有利尿、利瀉、消炎等作用[6-7]。人參為多年生草本植物，能大補(bǔ)元?dú)?，益血生津，安神益智，為虛勞?nèi)傷第一要藥[8]。二藥配對(duì)，大黃瀉下通便以攻其邪，人參益氣生津以培其本，相反相成，攻補(bǔ)兼施，益氣活血，泄?jié)峤舛?。按照千金方?duì)大黃和人參進(jìn)行配伍，HPLC法測(cè)定配伍前后化學(xué)成分的含量，為大黃與人參配伍用藥研究提供一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器與試劑

1525型高效液相色譜儀，配2996型二極管陣列檢測(cè)器(美國(guó)Waters公司)，AL-204電子天平(梅特勒-托利多)。

甲醇(色譜純)，磷酸為分析純，水為二次蒸餾水(自制)，中藥大黃、人參購(gòu)自北京同仁堂鞍山有限責(zé)任公司。

1.2 色譜條件

色譜柱為Kromasil C18柱(5μm，250 mm×4.6 mm)；流動(dòng)相為A、B兩相混合梯度洗脫，A相為V(甲醇)∶V(0.5%磷酸水溶液)=1∶9，B相為乙腈，梯度洗脫程序：自0～10min，A相為91%，B相為9%；10～30min，A相由91%～80%，B相由9%～20%；30～50min，A相由80%～68%，B相由20%～32%；50～60min，A相由68%～55%，B相由32%～45%；60～70min，A相由55%～40%，B相由45%～60%；70～85min，A相由40%～ 10%，B相由60%～90%。流速1.0mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)230nm；進(jìn)樣量為10μL。

1.3 實(shí)驗(yàn)步驟

樣品充分干燥后粉碎，過(guò)孔徑為0.425 mm篩，備用。

精密稱(chēng)取大黃3.0 g、人參6.0 g，分別置于250 mL圓底燒瓶中，按照料液比1∶10加入蒸餾水，稱(chēng)重。輕輕搖勻后加熱微沸，熱回流提取2 h，冷卻后稱(chēng)重，補(bǔ)足水分，過(guò)濾，將兩份濾液混合得大黃與人參配伍前混合水煎液(A)。

精密稱(chēng)取大黃3.0 g、人參6.0 g，混合后置于250 mL圓底燒瓶中，按照料液比1∶10加入蒸餾水，稱(chēng)重。輕輕搖勻后加熱微沸，熱回流提取2 h，冷卻后稱(chēng)重，補(bǔ)足水分，過(guò)濾得大黃與人參配伍后水煎液(B)。

將中藥水煎液A和B用HPLC法按照步驟1.2條件測(cè)定。

2 結(jié)果與討論

2.1 樣品溶液色譜圖

圖1 大黃與人參配伍前水煎液(A)色譜圖

圖2 大黃與人參配伍后水煎液(B)色譜圖

從色譜圖中選擇14個(gè)具有代表性的色譜峰，水煎液(A)中色譜峰的峰面積均定為1，水煎液(B)中色譜峰的峰面積大小如表1所示。

表1 大黃與人參配伍前后14種化學(xué)成分含量

由表1可見(jiàn)，大黃與人參配伍后14種化學(xué)成分中，11種化合物溶出量增加，3種化合物溶出量減少。由此可見(jiàn)，中藥配伍后化學(xué)成分的溶出量并非單位藥材各化學(xué)成分的溶出量的簡(jiǎn)單加和，說(shuō)明配伍中藥中各味中藥中的化學(xué)成分在熱水浸提過(guò)程中發(fā)生了某些化學(xué)作用或者物理作用，導(dǎo)致成分含量發(fā)生變化，甚至化學(xué)成分的種類(lèi)也發(fā)生了變化，所以中藥配伍是一種較復(fù)雜的藥理體系，能夠使得配伍中藥相須、相使、相畏、相殺、相惡、相反。

3 結(jié)論

中藥配伍使用在治療疾病中的過(guò)程中起到了至關(guān)重要作用，但其體系非常復(fù)雜，具體藥理機(jī)理有待于進(jìn)一步研究。本文采用高效液相色譜法對(duì)大黃和人參配伍前后化學(xué)成分的變化進(jìn)行測(cè)定，為進(jìn)一步探明大黃與人參配伍后藥效及化學(xué)成分之間的關(guān)系提供一定的數(shù)據(jù)支持。