趙麗萍 毛琳 劉光斌

摘要：目的：優(yōu)化九味生化顆粒的制備工藝。方法：先采用單因素試驗，以休止角、吸濕性、臨界相對濕度為考察指標，再選用正交試驗的方法篩選最佳料液比、提取次數(shù)、提取時間，干燥溫度及時間，并確定裝量。結(jié)果：最佳制備工藝為料液比1：6，水浸泡40min，提取2h，提取3次，提取液濃縮為100mL的濃縮液。輔料蔗糖粉過80目篩，采用60℃干燥所得顆粒硬度適中，容易溶散，顆粒得率最高。16目篩整粒，鋁塑復(fù)合膜包裝，裝量為10g。臨界相對濕度為72%。結(jié)論：該中藥制劑的制備工藝流程合理、可操作性強，可成為批量生產(chǎn)有效的參考依據(jù)。

關(guān)鍵詞：九味生化顆粒;制備工藝;正交試驗;

中圖分類號：TQ461 文獻標志碼：A

九味生化顆粒是在生化湯的基礎(chǔ)上加減而來。方中重用全當歸補血活血，化瘀生新，行滯止痛，為君藥。川芎活血行氣，桃仁活血祛瘀，均為臣藥。炮姜人血散寒，溫經(jīng)止痛。益母草、紅花、山楂等用以活血通經(jīng)祛瘀止痛。炙甘草和中緩急，調(diào)和諸藥，用來為使。

該方臨床需求量較大，但由于湯劑煎煮麻煩，服用量較大、口味不佳，造成患者服用不便，因此在不改變其處方組成的基礎(chǔ)上將傳統(tǒng)經(jīng)驗方九味生化湯制成顆粒劑。因顆粒劑含糖分較多，易吸潮且粘度大，故本研究中以臨界相對濕度、吸濕性、休止角為考察指標，對料液比、提取時間、提取次數(shù)采用正交試驗的方法確定最終工藝。通過對九味生化顆粒的制備工藝的優(yōu)化，為廣大患者提供一種安全有效、易于服用的中藥制劑。

1儀器與試劑

儀器：日本島津LC-2010AHT型高效液相色譜儀;WF-30B型粉碎機（南京軒邈制藥設(shè)備有限公司）;CH-150槽型混合機（南京軒邈制藥設(shè)備有限公司）;ZL-250顆粒機（江陰市宏達粉體設(shè)備有限公司）;wG-ZF 1.2Js蒸汽復(fù)合式中藥粉滅菌器（江陰濱江醫(yī)療設(shè)備有限公司）;KAT-微電腦自動包裝機（安徽省亳州市歐邁威機械設(shè)備有限公司）;RXH-7C熱風(fēng)循環(huán)烘箱（南京軒邈制藥設(shè)備有限公司）;AUw220D分析天平（日本島津）。

對照品：阿魏酸對照品（批號：110773-201614）;購自中國食品藥品檢定研究院，為供含量測定用。

試劑：乙腈、磷酸、甲醇為色譜純，超純水。

樣品：酒鋼醫(yī)院院內(nèi)制劑，批號為20180321、20180322、20180323。

2方法與結(jié)果

2.1提取工藝研究

2.1.1提取工藝評價體系的建立

九味生化方中君藥為當歸，臣藥為川芎。兩者均含阿魏酸，同時阿魏酸也是2015年版《中國藥典》規(guī)定的含量測定的指標成分，故選總阿魏酸含量作為評價指標之一。此外，浸膏得率也是控制制劑質(zhì)量的一個重要指標，用浸膏得率控制提取藥液的濃縮程度。因此，以這兩種指標綜合評價九味生化顆粒劑提取工藝。

（1）浸膏得率的測定

按《中國藥典》附錄0831干燥失重測定法項下規(guī)定，取各試驗所得浸膏約2g，精密稱定，置于105℃烘箱中干燥5h，放置干燥器中冷卻半小時，快速精密稱定質(zhì)量，再置于105℃烘箱中干燥1h，冷卻稱定質(zhì)量，直至兩次稱重的重量差異不超過0.3mg為止。記錄質(zhì)量，計算浸膏得率。

（2）總阿魏酸含量測定

按《中國藥典》一部當歸項下阿魏酸含量測定項下規(guī)定：

色譜條件：色譜柱Agilent Extend C 18（4.6mmx²50mm，5Ixm）;流動相：0.085%磷酸水溶液-乙腈（83：17），流速為1.0mL·min^-1;進樣量10ul;柱溫35℃;檢測波長為316nm。

標準溶液的制備：取阿魏酸標準品0.67mg精密稱定后，放置于25mL容量瓶中，加70%甲醇溶解并定容至刻度，即得標準品溶液（阿魏酸26.80ug·mL^-1），按以上色譜條件進樣分析。

樣品溶液的制備：精密稱取正交試驗所得干浸膏約0.5g，放置于具塞錐形瓶中，精密量取70%甲醇20mL，加入密塞，稱定重量，超聲30min，放至室溫，再稱定重量，用70%甲醇補足減失的重量，混合均勻，放置沉淀后，取上清液濾過，棄去初濾液，取續(xù)濾液，即得，放置于4℃冰箱保存。

樣品測定：分別精密吸取標準品溶液與樣品溶液各10uL，進樣，測定，即得，如圖1所示。

2.1.2飲片吸水率考察

按處方比例稱取飲片，加入8倍量水浸泡，每隔半小時觀察一次浸透情況，直至吸水量不再增加，濾出沒有被吸收的水液，稱量吸水后的濕藥材，按吸水率公式計算：

經(jīng)計算，本處方藥材吸水率為250%。

2.1.3正交試驗優(yōu)化提取工藝

結(jié)合實際生產(chǎn)，以L9（3⁴）正交試驗對影響九味生化顆粒提取效果的因素如：料液比（A）、提取時間（B）、提取次數(shù)（c）優(yōu)選，浸膏得率和總阿魏酸含量作為指標綜合評價，以各指標的最大值作為參照對同一指標各數(shù)據(jù)進行標準化處理，即Yn=Yn/Ymax，式中Yn為實際值，Ymax為最大值;按照九味生化方君臣佐使組方原則，賦予總阿魏酸含量（Y1）和浸膏得率（Y2）的權(quán)重系數(shù)分別為0.6，0.4。計算公式為：綜合評分=（Y1x0.6+Y2x0.4）x100，見表1所列。

由方差分析結(jié)果（見表2、表3）加上直觀分析可知，九味生化顆粒提取工藝對浸膏得率的影響大小因素為c>A>B，提取次數(shù)對其具有顯著影響（P<0.05）;對總阿魏酸含量的影響大小順序為A>B>c，各因素對其結(jié)果影響的差異均無統(tǒng)計學(xué)意義。綜合評價后，各因素對綜合得分的影響順序為c>A>B。最終得到的最佳條件為A183C3，即料液比1：6，提取2h，提取3次。