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        花生紅衣中原花青素的研究進(jìn)展

        2020-06-05 06:55:34張睿宋璇于建麗孟婉星李超
        食品研究與開發(fā) 2020年12期
        關(guān)鍵詞:研究

        張睿,宋璇,于建麗,孟婉星,李超

        (天津科技大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院,天津300457)

        堅(jiān)果和油籽(例如:花生)的產(chǎn)品及其副產(chǎn)品均是 世界上公認(rèn)的酚類化合物來(lái)源[1]。目前,花生(Arachis hypogea linn)的全球產(chǎn)量為4 229萬(wàn)噸,中國(guó)是花生主要生產(chǎn)國(guó),其次是印度、尼日利亞和美國(guó)?;ㄉt衣作為花生加工業(yè)的副產(chǎn)品,全球每年生產(chǎn)超過(guò)93萬(wàn)噸[2],其中不僅含有豐富的營(yíng)養(yǎng)成分(如蛋白質(zhì)含量為178 g/kg),還含有大量酚類物質(zhì)(如原花青素含量為128 g/kg)[3]。

        花生紅衣(peanut skin,PS),又稱長(zhǎng)果衣、花生皮,是油料作物花生的種皮,常呈紅色或粉紅色且具有苦澀味[4]。其中含有的原花青素(peanut skin procyanidins,PSPc),又稱縮合單寧,由兒茶素(catechins,Cat)和表兒茶素(epicatechin,EC)單體聚合而成的多聚物,是普遍存在于植物之中的一種多酚類物質(zhì)[5]。研究表明,PSPc不僅具有較強(qiáng)的抗氧化功能,可以清除人體自由基、延緩衰老、防止細(xì)胞的退行性改變[6-8];還具有強(qiáng)化毛細(xì)血管、促進(jìn)血液循環(huán)的功效,有助于提高視力、改善關(guān)節(jié)的靈活性、增強(qiáng)心臟活力,預(yù)防大腦病變等[9-10]。眾多研究顯示,PSPc有可能成為未來(lái)膳食補(bǔ)充劑和功能性成分的可持續(xù)來(lái)源[11]。

        原花青素(procyanidins,Pc)通常分為 A 型(Pc-A)與B型(Pc-B)[12],其中Pc-A更穩(wěn)定并且在人體內(nèi)具有更高的生物利用度。研究表明,葡萄籽Pc中多為Pc-B[13],而PSPc中多為Pc-A[14]。目前,葡萄籽Pc已被廣泛研究,但是對(duì)于PSPc的研究尚不充分[15]。因此,本文針對(duì)PSPc的組成結(jié)構(gòu)、功能活性以及提取方法的研究概況進(jìn)行綜述,旨在為PSPc的合理開發(fā)與利用提供一定的理論基礎(chǔ)。

        1 PSPc的組成結(jié)構(gòu)

        PSPc組成單體結(jié)構(gòu)圖見圖1。

        圖1 PSPc組成單體結(jié)構(gòu)圖Fig.1 The single structure of PSPc

        早期的研究已證實(shí)PS中主要含有Pc-A,構(gòu)建單元包括Cat和EC[16],并且PSPc主要由單體、二聚體、三聚體及四聚體組成[6]。進(jìn)一步研究顯示PSPc中主要包括2種單體、7種A型與5種B型二聚體、5種A型與3種B型三聚體、4種A型與2種混合型四聚體以及極少數(shù)不可定量的高聚體[17],其平均聚合度約為3.2[18]。現(xiàn)有部分文獻(xiàn)對(duì)不同品種PS中活性物質(zhì)的組成進(jìn)行了分離與對(duì)比分析,結(jié)果表明不同種類PS中的Pc組成與含量差別較大,PSPc含量隨PS顏色的加深逐漸升高[19]。此外,PSPc的組成結(jié)構(gòu)還與植株自身的生長(zhǎng)環(huán)境、代謝方式等因素密切相關(guān)[20]。目前,國(guó)內(nèi)外專家學(xué)者已對(duì)PSPc的組成、結(jié)構(gòu)及含量進(jìn)行了分析研究[21],但受研究者所在地區(qū)、原料以及方法條件等方面的影響,其試驗(yàn)結(jié)果存在一定差異。本文綜合大量文獻(xiàn)對(duì)PSPc的組分結(jié)構(gòu)、名稱及含量進(jìn)行總結(jié),如表1、表2所示。

        PSPc 主要由 (+)-Cat、(-)-EC、CG、ECG 以及EGCG等單體通過(guò)C-C或C-O-C相連而成[15]。其中,四聚體的含量最高(占比為46.06%),其次為三聚體(占比為34.43%),二聚體(占比為17.00%)和單體(占比為2.52%)[6];而高聚體的含量則很低,僅能對(duì)其單體間的連接方式進(jìn)行鑒定,具體的單體構(gòu)成仍不明確(表2),需要專家學(xué)者進(jìn)一步研究。

        表1 低聚PSPc的種類、結(jié)構(gòu)、名稱及含量[6,17-18,22-24]Table 1 Species,structure,name and content of oligomeric procyanidins in peanut-skin

        續(xù)表1 低聚PSPc的種類、結(jié)構(gòu)、名稱及含量[6,17-18,22-24]Continue table 1 Species,structure,name and content of oligomeric procyanidins in peanut-skin

        表2 高聚PSPc的種類及結(jié)構(gòu)[18]Table 2 Species and structure of high polymer procyanidins in peanut-skin procyanidins

        2 PSPc的理化性質(zhì)

        不同結(jié)構(gòu)組成的PSPc具有不同的理化性質(zhì),對(duì)PSPc進(jìn)行理化性質(zhì)方面的研究,有助于探究?jī)?yōu)化其提純方式、制劑形式以及產(chǎn)品貯運(yùn)方式。因此,對(duì)PSPc的理化性質(zhì)進(jìn)行闡明分析,是探究其活性以及實(shí)際生產(chǎn)應(yīng)用中十分重要的一環(huán)。

        2.1 溶解性

        PSPc中含有大量酚羥基,與水親合力好,為強(qiáng)極性物質(zhì),易溶于甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯等中強(qiáng)極性溶劑,微溶或不溶于石油醚、正己烷等弱極性或非極性溶劑[13]。研究表明,PSPc中所含酚羥基的數(shù)量與其水溶性呈正相關(guān);將水與有機(jī)溶劑按一定比例混合會(huì)有助于PSPc從細(xì)胞中流出,進(jìn)而提升得率[25]。目前,研究者提取Pc時(shí)常選用醇的水溶液作為提取劑[26]。此外,PSPc的水溶性也會(huì)直接影響其在機(jī)體內(nèi)被吸收利用的效果。研究表明,PSPc的水溶性越差,機(jī)體利用率越低,進(jìn)而會(huì)導(dǎo)致其在人體內(nèi)發(fā)揮的抗氧化效果降低[27]。因此,維持并提高PSPc的水溶性可以提高其在人體內(nèi)生物利用度。劉睿杰等在研究PSPc的溶解度時(shí),發(fā)現(xiàn)其比葡萄籽Pc的溶解度高8.75%,更有利于人體吸收[28]。其原因是PS中的Pc為通過(guò)共價(jià)雙鍵形成的Pc-A,而葡萄籽Pc多為僅通過(guò)C-C連接的Pc-B,Pc-A較Pc-B的空間結(jié)構(gòu)更加伸展,進(jìn)而更好地與水分子相互結(jié)合[29]。

        2.2 穩(wěn)定性

        Pc的來(lái)源不同,對(duì)光、熱、金屬離子等因素的敏感程度也是存在顯著性差異[28]。已有研究者將PSPc與葡萄籽Pc進(jìn)行了對(duì)比,得出以下兩點(diǎn)結(jié)論,一是PSPc的構(gòu)成單體更穩(wěn)定;二是PSPc的連接方式更復(fù)雜緊密。穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)與緊密的連接方式?jīng)Q定了PSPc對(duì)光、熱、pH值等環(huán)境條件均具有更好的耐受性[26],且受Cu2+、Fe2+、Fe3+等金屬離子的影響程度更低[21]。值得注意的是,盡管PSPc中的γ-吡喃環(huán)內(nèi)的羰基不易與常用的羰基試劑反應(yīng),但經(jīng)堿處理后結(jié)構(gòu)發(fā)生改變,導(dǎo)致其易于氧化成羰基,進(jìn)而發(fā)生降解反應(yīng)。因此,在PSPc的生產(chǎn)加工過(guò)程中,應(yīng)盡量避免使用堿處理。綜上所述,與葡萄籽Pc相比,PSPc在水溶性和穩(wěn)定性方面具有優(yōu)勢(shì),但存放時(shí)還應(yīng)盡可能的將PSPc制品置于黑暗、低溫、弱酸性條件下,防止產(chǎn)品中PSPc的含量降低,進(jìn)而影響產(chǎn)品的活性功能。

        還好,周教授給他們把電話一打,他們問都有哪些人,周教授說(shuō)都有哪些人,然后都很爽快地答應(yīng)了。他們都說(shuō)忙是有點(diǎn)忙,但能和周大教授一起吃個(gè)飯,那是非常榮幸的事情,就是再忙也要抽空兒來(lái)。周教授一一回答說(shuō)好,很好么,事情就這么定了。

        2.3 光譜特性

        PSPc結(jié)構(gòu)中含有苯環(huán),因而在280 nm附近出現(xiàn)強(qiáng)烈的紫外吸收峰?,F(xiàn)有研究表明,PSPc在紫外檢測(cè)范圍內(nèi)有2個(gè)吸收峰,分別是215 nm和280 nm[30]。根據(jù)其光譜特性,使用紫外分光光度儀即可檢測(cè)PSPc的含量,為PSPc在試驗(yàn)與產(chǎn)品開發(fā)等過(guò)程中帶來(lái)了一定的便利。

        2.4 顏色反應(yīng)

        在不同pH值條件下PSPc呈現(xiàn)不同的顏色反應(yīng),并且PSPc的結(jié)構(gòu)與顯色劑存在定性關(guān)系,這種關(guān)系在其與金屬鹽類的絡(luò)合反應(yīng)尤為顯著。因此,可通過(guò)該顏色反應(yīng)對(duì)PSPc的結(jié)構(gòu)進(jìn)行鑒定[31]。

        3 PSPc的生物學(xué)功能

        近年來(lái),PSPc在抗氧化、抑菌、抗癌以及抑制丙烯酰胺等方面均顯示出較好的生物學(xué)功能[28]。隨著研究的不斷深入,關(guān)于PSPc生物學(xué)功能與組成結(jié)構(gòu)、空間構(gòu)型等方面的報(bào)道越來(lái)越多,不僅為相關(guān)活性探究提供理論基礎(chǔ),同時(shí)也為實(shí)際生產(chǎn)與應(yīng)用提供技術(shù)支持。

        3.1 抗氧化活性

        PSPc中含有大量酚羥基,易被氧化成醌類物質(zhì),捕獲環(huán)境中或人體內(nèi)的自由基,進(jìn)而產(chǎn)生很強(qiáng)的抗氧化效果。研究報(bào)道顯示,相比于常見抗氧化劑,PSPc具有更強(qiáng)的清除自由基、抑制脂質(zhì)過(guò)氧化以及螯合金屬離子的能力[31-32]。例如,Yu等從PS提取物中分離出Cat等Pc低聚物,發(fā)現(xiàn)其比維生素C和Trolox具有更高的自由基清除能力[6]。Larrauri等通過(guò)不同有機(jī)溶劑純化出PS提取物(主要由Pc和其二聚體組成),結(jié)果顯示它們對(duì)不同的合成自由基均具有很強(qiáng)的清除能力[33]。Oldoni等從PS中分離純化出抗氧化物質(zhì),分別對(duì)其進(jìn)行生物活性測(cè)定,最終發(fā)現(xiàn)PS中的兩種Pc(Pc-A1、Pc-A2)對(duì)DPPH及FRAP的清除效果顯著優(yōu)于合成抗氧化劑丁基化羥基甲苯,與強(qiáng)效抗氧化劑槲皮素和EC的清除能力相當(dāng)[33]。

        隨著PSPc分離程度的不斷提高,關(guān)于其抗氧化活性的研究也逐漸深入到構(gòu)效功能關(guān)系。現(xiàn)有研究表明,構(gòu)成PSPc的單體、多聚體及其衍生物等均對(duì)DPPH自由基具有一定的清除能力,且單體所達(dá)到的效果最好[23]。進(jìn)一步對(duì)PSPc中二聚體A型與B型的研究發(fā)現(xiàn),與A型EC二聚體相比,B型EC二聚體在DPPH自由基與羥基自由基方面有更強(qiáng)的清除效果,但在細(xì)胞過(guò)氧化體系中具有較弱的抗氧化活性,而兩種PSPc在清除ABTS+自由基與抗血細(xì)胞溶血性試驗(yàn)中能力相當(dāng);并且在以上5種體系中,A型ECG二聚體的活性強(qiáng)于A型EGCG二聚體[6]。根據(jù)上述4種PSPc結(jié)構(gòu)試驗(yàn)結(jié)論推理可知:PSPc的抗氧化效果與其所在的反應(yīng)體系相關(guān),PSPc-A在器官組織及脂質(zhì)體系中所呈現(xiàn)出更強(qiáng)的抗氧化效果,而PSPc-B在水系中表現(xiàn)出更好得清除效果。此外,不同二聚體對(duì)于不同自由基反應(yīng)的敏感程度不同,可能是由于其結(jié)構(gòu)上的沒食子?;c羥基基團(tuán)數(shù)量、單體間的連接方式及分子的空間構(gòu)型間存在顯著性差異,且導(dǎo)致酚羥基、羰基與自由基結(jié)合位點(diǎn)數(shù)量不同,致使它們對(duì)不同自由基的反應(yīng)存在一定差異[34]。

        關(guān)于PSPc應(yīng)用方面的研究顯示,其可以有效降低花生油的過(guò)氧化值,延長(zhǎng)油脂的貨架期[26]。并且,PSPc在具有顯著抗氧化性的同時(shí),還兼具了良好的物理性能和穩(wěn)定性[35]。

        綜上所述,盡管PSPc的抗氧化活性因其組成與結(jié)構(gòu)不同而存在一定差異,但顯著優(yōu)于葡萄籽Pc以及其它合成抗氧化劑。PSPc作為一種安全高效、穩(wěn)定性好、價(jià)廉易得的天然抗氧化劑來(lái)源,具有較大的開發(fā)應(yīng)用價(jià)值[37]。此外,由于合成抗氧化劑對(duì)人體有一定的毒害作用,越來(lái)越多國(guó)家和地區(qū)已經(jīng)明令限制或禁止其使用[36]。這局限了合成抗氧化劑在食品等領(lǐng)域的應(yīng)用,同時(shí)也為PSPc帶來(lái)了新的發(fā)展的機(jī)遇。

        3.2 抑菌活性

        近年來(lái),耐藥性菌株和常規(guī)抗生素藥物的副作用已嚴(yán)重危及了人類生命安全,因此研發(fā)新型天然抗菌劑的需求在急劇增加。目前,眾多研究報(bào)道顯示PSPc在抑菌方面存在一定的應(yīng)用潛力。例如,初麗君等對(duì)PSPc的抑菌譜進(jìn)行了定性和定量研究,顯示其可以顯著抑制金黃色葡萄球菌和大腸桿菌,較顯著抑制枯草芽孢桿菌,但對(duì)真菌類的黑曲霉抑制作用不顯著;其抑菌活性隨著PSPc濃度的增加而增強(qiáng)[38]。另一研究證實(shí),PSPc三聚體可以破壞蠟狀芽孢桿菌的細(xì)胞膜和壁完整性,進(jìn)而治療食物中毒[39]。此外,PSPc在人體內(nèi)還顯示出了調(diào)節(jié)和改善腸道菌群的功效。Zheng等對(duì)給藥PSPc的小鼠糞便微生物進(jìn)行16S rRNA基因測(cè)序,結(jié)果顯示PSPc可顯著增加小鼠腸道微生物群的β-多樣性和擬桿菌門的數(shù)量,降低厚壁菌門和擬桿菌門的比例,進(jìn)而可達(dá)到防止肥胖并改變腸道微生物群組成的有益作用[40]。

        3.3 抗癌活性

        3.4 抑制丙烯酰胺的生成

        丙烯酰胺是一種在食品熱加工過(guò)程中(特別是油炸、焙烤)形成的低分子量的可溶性不飽和酰胺,其作為美拉德反應(yīng)的中間產(chǎn)物,主要通過(guò)氨基酸天冬酰胺和一些還原糖之間的反應(yīng)[44-45]。它通常呈無(wú)味白色晶體,易溶于水、甲醇等極性溶劑,可通過(guò)未破損的皮膚、黏膜、消化道、呼吸道等部位進(jìn)入人體,具有神經(jīng)和生殖毒性,同時(shí)也具有強(qiáng)致癌、致畸性,現(xiàn)已被國(guó)際癌癥研究機(jī)構(gòu)(International Agency for Research on Cancer,IARC)歸為2A級(jí)準(zhǔn)致癌物[46]。因此,從根源上減少或去除食品中的丙烯酰胺是未來(lái)食品行業(yè)發(fā)展的一大趨勢(shì)。眾多研究顯示,PSPc在抗丙烯酰胺的生成方面具有顯著效果。例如,歐陽(yáng)燕琳等以黑花生衣為研究對(duì)象,研究了PSPc與黃酮、異黃酮、花色苷、抗壞血酸等對(duì)油炸馬鈴薯體系中生成丙烯酰胺的抑制情況,結(jié)果顯示PSPc清除羰基化合物(美拉德反應(yīng)的反應(yīng)物)的能力最強(qiáng),對(duì)丙烯酰胺生成的抑制率可達(dá)50.1%~91.9%。另一項(xiàng)研究對(duì)比了PBPc與橙皮苷對(duì)油炸馬鈴薯體系中生成丙烯酰胺的動(dòng)力學(xué)影響,發(fā)現(xiàn)丙烯酰胺生成量最高為在油炸200 s時(shí),而PSPc可以有效抑制此時(shí)丙烯酰胺的生成,抑制效果顯著優(yōu)于橙皮苷[47]。另有學(xué)者將Pc-B1與Pc-B2進(jìn)行對(duì)比,結(jié)果Pc-B2顯示出可以更有效的抑制美拉德反應(yīng)的進(jìn)行,從而減少丙烯酰胺的積累[48]。對(duì)其抑制機(jī)理進(jìn)行深入探討,發(fā)現(xiàn)PSPc中單體芳香環(huán)上的羥基可競(jìng)爭(zhēng)性地與還原糖中的醛基發(fā)生取代反應(yīng)形成共價(jià)鍵,切斷了丙烯酰胺的合成途徑,進(jìn)而能有效防止丙烯酰胺的生成和積累[17]。綜上所述,PSPc是一種高效的丙烯酰胺抑制劑,在未來(lái)食品行業(yè)具有廣闊的應(yīng)用前景[49]。

        3.5 降低體內(nèi)血脂水平

        隨著人們生活水平不斷提高,高血脂和肥胖危及人類的健康生活。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明,PSPc可有效降低血漿中甘油三酯與超低密度脂蛋白的水平,從而降低長(zhǎng)期處于西方典型飲食模式的大鼠血液中游離脂肪酸的含量;進(jìn)一步研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)在降血脂過(guò)程中發(fā)揮關(guān)鍵作用時(shí)PSPc-A,并且其在血漿中的利用率最高[50-51]。此外,Bansode等研究結(jié)果顯示,給藥PSPc可有助于改善處于高膽固醇和脂質(zhì)飲食大鼠的脂質(zhì)穩(wěn)態(tài)[52]。Toomer等也進(jìn)行了類似研究,結(jié)果顯示喂食PSPc的小鼠中,肝臟膽固醇和脂質(zhì)儲(chǔ)存顯著降低,從而更有助于控制體重[53]。MIN等以山羊?yàn)檠芯繉?duì)象,將PS加入山羊的日糧中,每天喂食一次動(dòng)物,每3 d~4 d調(diào)整攝入量,在第 0、12、23、41 天采集數(shù)據(jù),結(jié)果表明補(bǔ)充PS的山羊平均日增重降低[54];進(jìn)一步研究表明,PBPc-B2通過(guò)調(diào)節(jié)細(xì)胞功能調(diào)控的重要轉(zhuǎn)錄因子(transcription factor EB,TFEB)介導(dǎo)的溶酶體途徑和氧化還原狀態(tài)減弱了游離脂肪酸誘導(dǎo)的肝脂肪變性,這對(duì)治療肝臟脂肪變性具有重要意義[55]。結(jié)合上述研究,PBPc作為新型藥物在預(yù)防或治療高血脂、肥胖癥以及非酒精性脂肪性肝病中具有較好的應(yīng)用前景;此外,還可以考慮將其作為一種非藥物手段應(yīng)用于營(yíng)養(yǎng)保健品中。

        3.6 改善體內(nèi)血糖水平

        眾多研究表明,PSPc對(duì)降低血糖水平也有一定促進(jìn)作用。通過(guò)對(duì)PS中多酚物質(zhì)的進(jìn)行分析,發(fā)現(xiàn)Pc-A與Pc-B均能有效抑制α-淀粉酶的活性,從而可以減少機(jī)體對(duì)碳水化合物的吸收利用率,延緩體內(nèi)血糖濃度的升高,在一定程度上治療糖尿病與肥胖癥[23]。研究顯示,在小鼠飲食中添加PSPc后,可以降低其肝糖原和血漿葡萄糖水平,有利于小鼠控制體重[53]。對(duì)PSPc的中具體起降血糖作用的結(jié)構(gòu)進(jìn)行深入研究顯示,兒茶素丙酮衍生物及Cat與Pc-A1的丙酮縮合物具有較強(qiáng)的抑制α-葡萄糖苷酶活性,而Cat與Pc-A1本身幾乎沒有抑制活性[56]。因此,可以考慮將PSPc、兒茶素丙酮衍生物及Cat與Pc-A1的丙酮縮合物作為主成分,開發(fā)Ⅱ型糖尿病或肥胖癥的治療藥物。

        3.7 生物利用度

        PSPc不僅在體外具有顯著的功能活性,并且在體內(nèi)具有較高的吸收利用度,其優(yōu)勢(shì)體現(xiàn)在分子聚合度上。研究顯示,只有當(dāng)Pc的聚合度≤3時(shí),才可被人體完全吸收利用,聚合度≥5的Pc不能被人體吸收利用[57]。與葡萄籽Pc的聚合度相比,PSPc的平均聚合度更低:僅為3.2,因此PSPc更益于人體吸收利用。原因是低聚的PSPc更容易在胃的酸性環(huán)境中解聚成表兒茶素單體和二聚體的混合物,進(jìn)而易被小腸吸收利用。體外和體內(nèi)實(shí)驗(yàn)表明,腸細(xì)胞壁對(duì)PSPc二聚體和三聚體是可滲透的[58-59]。另一研究證實(shí)了,Pc二聚物B1(表兒茶素-(4β→8)-兒茶素)和 B2(表兒茶素-(4β→8)-表兒茶素)可以在人的血漿中被檢測(cè)出來(lái)[43]。類似的,Serra等也在其實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),Pc二聚體在血清中被檢測(cè)出來(lái)的含量更高,而Pc三聚體幾乎未檢測(cè)到[60]。由此可知,Pc的聚合度越低,對(duì)于人體的吸收及利用越有利;盡管有些高聚體Pc在體外和細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中顯示較強(qiáng)的生物活性,但實(shí)際應(yīng)用中還應(yīng)結(jié)合人類的生物利用度進(jìn)行探討。

        4 PSPc的提取方法

        4.1 溶劑提取法(solvent extraction,SLE)

        SLE是PSPc最常用的提取方法。由于PSPc為多酚類物質(zhì),通常具有較強(qiáng)的極性,因此應(yīng)采用強(qiáng)極性溶劑作為提取劑;常用的提取溶劑有水、乙醇、甲醇、丙酮、乙醚、異丙醇和乙酸乙酯等。與水為溶劑相比,利用有機(jī)溶劑進(jìn)行提取使PSPc的得率更高,但會(huì)帶來(lái)一定的操作危險(xiǎn)性,也會(huì)對(duì)食品安全造成威脅。姚永志等曾經(jīng)分別研究了水和乙醇對(duì)PSPc的提取效果,水提法最優(yōu)提取工藝為:料液比1∶75(g/mL)、提取時(shí)間60 min、水浴溫度40℃,得率為6.40%;乙醇提取的最優(yōu)工藝為:乙醇濃度為55%、料液比為1∶37.5(g/mL)、提取時(shí)間 30 min、水浴溫度 60℃,得率為7.858%[61]。劉曼等比較了蒸餾水、乙醇、丙酮3種不同提取劑對(duì)PSPc粗提的影響,研究結(jié)果表明60%乙醇提取的效果最優(yōu)[62]。

        4.2 微波輔助浸提法(microwave-assisted extraction,MAE)

        MAE技術(shù)是在微波輔助儀器,對(duì)PSPc進(jìn)行提取的一種綠色新技術(shù)[63]。它在提取方面較SLE具有諸多優(yōu)勢(shì),如縮短提取時(shí)間、降低提取劑用量、提高得率等[64]。溫志英等通過(guò)單因素及響應(yīng)面法優(yōu)化了微波輔助提取PSPc的生產(chǎn)工藝,最佳工藝條件為:花生紅衣粒度為80目(0.198 mm),提取劑為75%乙醇,料液比 1∶40(g/mL),微波時(shí)間 120 s,微波功率 240 W,PSPc的提取得率達(dá)到11.38%[65]。

        4.3 超聲輔助浸提法(ultrasonic-assisted extraction,UAE)

        UAE是一種先進(jìn)的綠色清潔的非熱食品加工技術(shù),作為傳統(tǒng)加工技術(shù)的替代或輔助方法,其受到越來(lái)越多的關(guān)注[66-67]。UAE主要通過(guò)在生物基質(zhì)中產(chǎn)生空化氣泡起作用,進(jìn)而提高被提取物質(zhì)的得率。與MAE法相比,UAE法產(chǎn)生的熱量較小,有效防止PSPc的氧化和降解,完整保留其生物活性,并且超聲波生產(chǎn)設(shè)備操作簡(jiǎn)便、危險(xiǎn)性較低、節(jié)能減排,適用于大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)。王菲等采用UAE法提取PSPc,通過(guò)單因素以及Box-Behnken響應(yīng)面法優(yōu)化其提取條件,得到最佳提取工藝為:乙醇體積分?jǐn)?shù)70%、料液比為1∶50(g/mL)、超聲功率 153 W、超聲時(shí)間 8 min、水浴溫度60℃、水浴時(shí)間50 min、提取次數(shù)1次,PSPc的得率可達(dá)153.63 mg/g,與模型預(yù)期值154.33 mg/g十分接近[66]。童愈元等也做了同樣的工藝優(yōu)化研究,其研究結(jié)果為:提取劑為70%乙醇,液料比為1∶25(g/mL)、超聲時(shí)間40 min、提取溫度55℃,最終提取率為22.78%,PSPc含量為35.98 mg/g[68]。由此可見,UAE較SLE的得率得到較大提升,且可以帶來(lái)經(jīng)濟(jì)與環(huán)境的雙重效益,具有較大的開發(fā)和應(yīng)用價(jià)值。

        4.4 超臨界提取法(subcritical water extraction,SWE)

        近年來(lái),SWE作為綠色提取方法,已逐漸被應(yīng)用于提取各種天然產(chǎn)物[69]。SWE是指在100℃(水的沸點(diǎn))和374℃(水的臨界點(diǎn))之間的溫度范圍內(nèi)的水的凝聚相區(qū)域,水體仍然保持在液體狀態(tài);它可以通過(guò)改變溫度來(lái)調(diào)節(jié)水的介電常數(shù),進(jìn)而改變水的極性[70]。它與以上3種提取方法相比,有著顯著的優(yōu)越性,克服了傳統(tǒng)或輔助有機(jī)溶劑提取法得率較低、選擇性差、后續(xù)要進(jìn)一步純化等問題。由于,世界各地的食品法規(guī)通常會(huì)禁止使用大多數(shù)的有機(jī)溶劑,而SWE法提取過(guò)程中無(wú)有機(jī)試劑且得率更高。多項(xiàng)研究結(jié)果已經(jīng)證實(shí)使用SWE工藝,從PS中獲得抗氧化酚類化合物的可行性[71]。Bodoira等針對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)測(cè)試?yán)碚撃P?,?yōu)化了PSPc的提取工藝,即在萃取溫度220℃和溶劑流速7 g/min下,使用60.5%乙醇作為共溶劑,實(shí)現(xiàn)了PSPc的最大得率[72]。

        綜上所述,SLE操作簡(jiǎn)便且成本低廉;MAE和UAE大大提升了PSPc的提取效率;SWE成本雖提高,但得率和純度也顯著提高,并且可食用安全性也被保證。SWE在未來(lái)功能性成分提取中具有較大的優(yōu)勢(shì)。

        5 小結(jié)

        PS資源豐富且具有獨(dú)特地保健價(jià)值。近年來(lái),國(guó)內(nèi)外專家學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)從PS中提取出地PSPc具有諸多的生物學(xué)活性,例如抗氧化、抗腫瘤、抑制丙烯酰胺生成、降低人體內(nèi)血脂血糖等功能。與葡萄籽Pc相比,PSPc具有更優(yōu)的功能特性。但是我國(guó)研究重點(diǎn)偏向于葡萄籽Pc,對(duì)于PSPc組成結(jié)構(gòu)以及功能活性機(jī)理研究的研究尚不充分,并且PSPc的實(shí)際應(yīng)用與產(chǎn)品開發(fā)也處于初級(jí)階段。

        針對(duì)上述問題,在未來(lái)還需從以下幾方面對(duì)PSPc展開深入研究。一是加強(qiáng)對(duì)PSPc提取分離及純化工藝方面的研究,避免提取過(guò)程中活性損失,進(jìn)一步簡(jiǎn)化生產(chǎn)工藝和提高得率。二是需進(jìn)一步研究PSPc的構(gòu)效關(guān)系和作用機(jī)理,闡明其中主要起功能活性作用的關(guān)鍵結(jié)構(gòu)及官能團(tuán),明確量效關(guān)系。三是對(duì)PSPc的不同結(jié)構(gòu)和單體之間是否存在協(xié)同或拮抗作用進(jìn)行深入研究,闡明其相互關(guān)系將有助于PSPc更有效地開發(fā)與應(yīng)用,目前我國(guó)對(duì)于此方面的研究較為匱乏。四是要進(jìn)一步完善關(guān)于PSPc生物利用度的相關(guān)研究,明確其在人體的實(shí)際轉(zhuǎn)化率。五是要加強(qiáng)關(guān)于PSPc安全性方面的評(píng)價(jià),PSPc是良好的功能食品及保健品天然原料,因此在研究過(guò)程中應(yīng)重視PSPc的毒理學(xué)研究,確保其在實(shí)際應(yīng)用中的安全性。

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