段紅玲，孫新剛，張咪咪，侯雅芝

(1.山西醫(yī)科大學(xué)，山西 太原 030001；2.山西醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院，山西 太原 030001；3.山西省心血管病醫(yī)院，山西太原 030024)

腦組織炎癥反應(yīng)是影響自發(fā)性腦出血(ICH)患者預(yù)后不佳的重要機(jī)制[1]。髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1(TREM-1)是介導(dǎo)炎癥發(fā)生與放大的關(guān)鍵介質(zhì)[2]，但與ICH后腦組織炎癥反應(yīng)的關(guān)系尚無研究。本研究擬觀察TREM-1在大鼠ICH后血腫周圍腦組織中的表達(dá)及其與腦組織炎癥反應(yīng)形成的關(guān)系，報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組

選取健康雄性SD大鼠36 只，由山西醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供，體質(zhì)量250～300 g。采用隨機(jī)數(shù)字表法將大鼠分為假手術(shù)組和ICH后1d，2d，3 d，5 d，7 d組，每組6 只。

1.2 動(dòng)物模型制作

參照文獻(xiàn)[3]方法，將100 μL自體新鮮股動(dòng)脈血注入大鼠尾狀核，制作大鼠ICH模型，ICH組大鼠分別于術(shù)后相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)處死。假手術(shù)組采用相同手術(shù)過程但不注血，于術(shù)后3 d處死。

1.3 TREM-1及炎癥因子表達(dá)檢測

取出-70 ℃冰箱中保存的標(biāo)本，按說明書依次進(jìn)行提取總RNA，合成第1、第2鏈，電泳分析等步驟。凝膠圖像分析系統(tǒng)檢測灰度，分別以TREM-1，IL-1β，TNF-α與β-actin的比值表示其相對(duì)水平。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié) 果

2.1 大鼠腦組織中的TREM-1表達(dá)水平

RT-PCR法檢測顯示，與假手術(shù)組相比，ICH組血腫周圍腦組織中TREM-1的相對(duì)水平在造模后第1天即升高(t=9.378，P<0.001)，并于造模后第3 天時(shí)達(dá)到高峰(t=9.248，P<0.001)，此后呈下降趨勢(shì)，至第7天時(shí)最低，但仍明顯高于假手術(shù)組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=7.327，P<0.001)(見圖1)。

2.2 大鼠腦組織中炎癥因子的表達(dá)水平

依據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案，在TREM-1表達(dá)最高時(shí)間點(diǎn)即造模后3 d時(shí)采用RT-PCR檢測IL-1β及TNF-α，結(jié)果顯示與假手術(shù)組相比，IL-1β(82.60±1.92 VS 16.61±1.08，t=22.330，P<0.001)及TNF-α(1.45±0.24 VS 0.62±0.16，t=6.564，P<0.001)均明顯升高。

2.3 大鼠腦組織中TREM-1與炎癥因子表達(dá)水平的相關(guān)性分析

ICH后3 d，TREM-1與IL-1β(r=0.604 5，P=0.007 9)及TNF-α(r=0.646 9，P=0.003 7)呈正相關(guān)(見圖2～圖3)。

3 討 論

自發(fā)性ICH是一種神經(jīng)系統(tǒng)急危重癥，具有高發(fā)病率及致殘率的特點(diǎn)[1]。研究結(jié)果表明[4]，ICH后血腫周圍腦組織炎癥反應(yīng)的形成可能與其不良預(yù)后密切相關(guān)，積極探討其形成機(jī)制并予以干預(yù)，臨床意義重大。TREM-1表達(dá)于髓系細(xì)胞表面，近年來在炎癥反應(yīng)中的作用受到關(guān)注。最初有關(guān)TREM-1的研究主要是針對(duì)急性微生物感染[2，5]，但后續(xù)研究發(fā)現(xiàn)TREM-1在急性非微生物感染、慢性感染性病變及自身免疫疾病的發(fā)病過程中均起重要作用[6-8]，并與腫瘤及動(dòng)脈粥樣硬化等多種病變的炎性發(fā)病機(jī)制密切相關(guān)[9-10]。因此，TREM-1廣泛參與多種疾病微環(huán)境的炎性進(jìn)程，并與疾病的發(fā)生、轉(zhuǎn)歸及預(yù)后密切相關(guān)。本研究結(jié)果顯示，TREM-1在ICH后血腫周圍腦組織中表達(dá)增高，并與炎癥因子的表達(dá)有關(guān)，提示TREM-1可能亦與ICH后腦組織炎癥反應(yīng)的形成密切相關(guān)。

近年來有多種炎癥因子被證實(shí)參與了ICH后腦組織炎癥反應(yīng)的形成[11-12]，但針對(duì)這些炎癥因子實(shí)施干預(yù)后其效果并不理想。本研究結(jié)果提示TREM-1與ICH后腦組織炎癥反應(yīng)形成有關(guān)，而TREM-1是介導(dǎo)多種炎癥反應(yīng)發(fā)生與放大的關(guān)鍵介質(zhì)，這就有望為臨床改善ICH的不良預(yù)后提供藥物作用新靶點(diǎn)。