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        一例小鵝瘟的診斷與治療

        2020-06-02 07:29:14王麗芹邢程盧松巖
        吉林畜牧獸醫(yī) 2020年4期

        王麗芹 ,邢程 ,盧松巖

        1.吉林省動物疫病預(yù)防控制中心,吉林長春 130062;2.吉林省磐石市動物疫病預(yù)防控制中心,吉林磐石 132300

        小鵝瘟,又稱鵝細(xì)小病毒感染,是由鵝細(xì)小病毒引起的一種急性或亞急性的敗血性傳染病[1]。主要經(jīng)消化道傳染,與病鵝直接接觸或接觸病鵝排泄物污染的場地、設(shè)備用具、飲水和飼料可感染。主要感染雛鵝和雛番鴨,雛雞和雛鴨等具有較強(qiáng)抵抗力[2]。1956年,方定一教授等人發(fā)現(xiàn)小鵝瘟,并于1961年成功分離病毒。此后,歐洲、亞洲等多個養(yǎng)鵝業(yè)發(fā)達(dá)的國家相繼報道小鵝瘟流行,我國廣東、浙江、安徽、四川、內(nèi)蒙古、河北、吉林等多省份相繼報告小鵝瘟疫情,造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失,嚴(yán)重危害鵝養(yǎng)殖業(yè)持續(xù)健康發(fā)展[3]。

        2019年8月,吉林省磐石市某養(yǎng)鵝場引進(jìn)10日齡雛鵝5 000只,飼養(yǎng)至15日齡時,部分雛鵝精神萎靡,食量減少或不食,流漿液性鼻液,排灰白色水樣稀糞,個別出現(xiàn)抽搐、癱瘓等神經(jīng)癥狀,感染數(shù)量日益增多并不斷死亡。剖檢可見肝臟腫大、質(zhì)脆,小腸黏膜充血出血,腸腔內(nèi)有大量的纖維素性凝塊和碎片;未見小腸中下段明顯膨大,腸腔內(nèi)形成“臘腸狀”栓子等小鵝瘟典型病理變化。發(fā)病之初,養(yǎng)鵝場投放頭孢拉定進(jìn)行治療,癥狀無明顯改善。為進(jìn)一步明確病原,養(yǎng)鵝場采集病死雛鵝組織樣品進(jìn)行實驗室檢測。

        1 檢測方法

        1.1 材料及處理

        采集病死雛鵝肝臟、脾臟、腸管等組織作為病料,1:5加入無菌PBS置入離心管,經(jīng)反復(fù)凍融后研磨制成細(xì)胞懸液,-20 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

        1.2 試劑與儀器

        無菌PBS,DNA提取試劑盒,PCR擴(kuò)增試劑盒,PCR產(chǎn)物回收試劑盒,PCR儀,電泳儀,凝膠成像系統(tǒng)。

        1.3 核酸提取

        使用DNA提取試劑盒,提取組織懸液DNA,按說明書步驟操作,洗脫產(chǎn)物-20 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

        1.4 引物設(shè)計

        根據(jù)GenBank中小鵝瘟B株VP3基因設(shè)計兩對引物,引物序列見表1。

        表1 PCR引物序列

        1.5 PCR擴(kuò)增

        使用50 μL體系進(jìn)行反應(yīng),體系中包含核酸提取液 2 μL,DNTP 2 μL,Buffer 2 μL,上、下游引物各 1 μL,Taq 酶 0.5 μL,ddH2O 38.5 μL。反應(yīng)條件:95 ℃預(yù)變性5min,94 ℃預(yù)變性1 min,51 ℃退火 1 min,72 ℃延伸2 min,30個循環(huán)后72 ℃ 10 min,4 ℃保存。經(jīng)1%瓊脂糖凝膠電泳分析結(jié)果。

        2 診斷

        PCR擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳顯示經(jīng)擴(kuò)增獲得大小為173 bp的產(chǎn)物,與預(yù)期大小相同,經(jīng)切膠回收鑒定,可判定鵝細(xì)小病毒核酸陽性。

        通過臨床癥狀、病理變化和PCR方法檢測結(jié)果,確診為小鵝瘟。

        3 治療

        做好病死鵝無害化處理,對育雛舍、設(shè)備用具使用聚維酮碘和稀戊二醛消毒,健康雛鵝與發(fā)病雛鵝分群且隔離飼養(yǎng),全部雛鵝一鵝一針頭地注射小鵝瘟精制蛋黃抗體,飲水中添加板藍(lán)根多糖、黃芪多糖,飼料中添加硫酸粘桿菌素,用以增加鵝群免疫力,控制繼發(fā)感染。經(jīng)過治療,雛鵝20日齡時,癥狀明顯改善,無新增發(fā)病,雛鵝群逐漸恢復(fù)健康,存活雛鵝4 500只。

        4 討論

        小鵝瘟預(yù)防重于治療。為種鵝注射疫苗,使得雛鵝具有母源抗體,切斷垂直傳播;對種蛋、孵化和育雛環(huán)節(jié)嚴(yán)格清潔消毒,切斷水平傳播;為雛鵝注射小鵝瘟精制蛋黃抗體,使之得到有效保護(hù)。

        2018年12月13日,吉林省市場監(jiān)督管理廳發(fā)布吉林省地方標(biāo)準(zhǔn)DB22/T 2941-2018《種鵝場小鵝瘟凈化技術(shù)規(guī)程》。有條件的種鵝場可應(yīng)用此標(biāo)準(zhǔn)開展小鵝瘟凈化工作,在種源環(huán)節(jié)凈化,切斷傳播途徑,最大程度降低發(fā)病率,對促進(jìn)養(yǎng)鵝業(yè)持續(xù)健康發(fā)展具有重要意義。

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