康四和，譚靜玲，江珍玉，鄧海英?

（1.湖北省藥品監(jiān)督檢驗(yàn)研究院，湖北 武漢430075； 2.武漢科技大學(xué)醫(yī)學(xué)院／職業(yè)危害識(shí)別控制湖北省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，湖北 武漢430065）

鼠婦蟲(chóng)為我國(guó)傳統(tǒng)中藥材，已有2 000 多年的使用歷史，具有破瘀消癥、通經(jīng)利水、解毒止痛作用，用于久瘧瘧母、血瘀經(jīng)閉、癥瘕、小便不通、驚風(fēng)撮口、牙齒疼痛、鵝口瘡等。該藥材主要含有蛋白類(lèi)、多肽類(lèi)及多糖類(lèi)等成分［1-2］，現(xiàn)代藥效學(xué)研究表明，鼠婦蟲(chóng)具有鎮(zhèn)痛、抗炎、活血、抗腫瘤及抗病原微生物等作用，對(duì)癌性劇痛有較好的治療作用，且廣泛用于多種疣性皮膚病的治療［3-9］。鼠婦蟲(chóng)為鱉甲煎丸、消乳癖膠囊、紅金消結(jié)片等多個(gè)中成藥品種處方中重要藥味，但我國(guó)對(duì)鼠婦蟲(chóng)藥材的基礎(chǔ)研究較為薄弱，系統(tǒng)性研究尚未見(jiàn)開(kāi)展，文獻(xiàn)報(bào)道雖對(duì)其質(zhì)量控制方法進(jìn)行研究，并被多省藥材標(biāo)準(zhǔn)收載［10-13］，但其藥用基源及種類(lèi)尚不確定，標(biāo)準(zhǔn)控制指標(biāo)簡(jiǎn)單，難以有效控制藥材質(zhì)量，導(dǎo)致藥材種類(lèi)混淆、藥材及其成藥制劑質(zhì)量良莠不齊等現(xiàn)象長(zhǎng)期存在，制約了鼠婦蟲(chóng)藥用資源開(kāi)發(fā)與有效利用。本研究對(duì)我國(guó)鼠婦蟲(chóng)藥材的基源種類(lèi)和品質(zhì)進(jìn)行探討，為鼠婦蟲(chóng)藥材及其制劑的質(zhì)量評(píng)價(jià)和資源開(kāi)發(fā)利用提供依據(jù)。

1 鼠婦蟲(chóng)應(yīng)用的歷史沿革

鼠婦蟲(chóng)又名潮蟲(chóng)、鼠婦、西瓜蟲(chóng)、濕生蟲(chóng)、地虱婆等，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》： “主氣癃，不得小便，女人月閉，血癥，癇痓，寒熱，利水道。生平谷”，并列為下品，后世本草多有記載?！稜栄拧?言“鼠多在坎中，背粘負(fù)之，故曰鼠負(fù)”。諸多本草對(duì)其生長(zhǎng)環(huán)境及形態(tài)進(jìn)行了詳細(xì)描述?！睹t(yī)別錄》 記載，“鼠婦，生魏郡及人家地上。五月五日取”?！侗静輬D經(jīng)》 云： “今處處有之，多在下濕處，翁器底及土坎中”。寇宗奭曰： “濕生蟲(chóng)，多足，其色如蚓，背有橫紋蹙起，大者長(zhǎng)三四分，在處有之，磚翁及下濕處多。用處絕少”。李時(shí)珍謂之“鼠負(fù)，因濕化生，故俗名濕生蟲(chóng)。形似衣魚(yú)稍大，灰色”。由上述可見(jiàn)，鼠婦蟲(chóng)在我國(guó)歷代均有應(yīng)用，按其生境形態(tài)，古代鼠婦與現(xiàn)今所用鼠婦為同類(lèi)動(dòng)物，其種類(lèi)來(lái)源并非一種，在顏色上有灰色和蚯蚓色，但并未明確到具體物種［2，14］。

2 鼠婦類(lèi)動(dòng)物生境與分布

鼠婦類(lèi)動(dòng)物隸屬于甲殼綱等足目潮蟲(chóng)亞目，潮蟲(chóng)亞目是等足目動(dòng)物中的最主要陸生類(lèi)型，故陸生等足類(lèi)動(dòng)物通常也被統(tǒng)稱(chēng)為“潮蟲(chóng)”。該類(lèi)動(dòng)物主要生活于熱帶、亞熱帶地區(qū)，溫帶地區(qū)種類(lèi)較少［15-16］，其腹肢具有特殊的偽氣管，可在陸地上呼吸，是少數(shù)完全脫離水域生活的陸生小型甲殼綱動(dòng)物。該類(lèi)動(dòng)物具有向濕性和負(fù)趨光性，多喜歡生活在陰暗潮濕的環(huán)境，棲息于朽木、腐葉或石塊下，有時(shí)出現(xiàn)在居民村落的房屋、庭院內(nèi)及其附近農(nóng)田、果園、菜園的磚石、朽木及垃圾堆中，有的還生活于水邊或海邊石下。

鼠婦類(lèi)動(dòng)物在世界各地分布廣泛，在我國(guó)主要分布于華北、華東、華中、華南等地區(qū)，江蘇、浙江、山東、河北等省為鼠婦蟲(chóng)藥材的主要產(chǎn)區(qū)，道地產(chǎn)區(qū)主要為江蘇蘇州、無(wú)錫、常州及浙江杭州、湖州等地，山東泰安、臨沂、濰坊、煙臺(tái)等也有一定產(chǎn)量。由于鼠婦類(lèi)動(dòng)物種類(lèi)眾多，雜居現(xiàn)象普遍，在形態(tài)上具有一定的相似性，一般情況下難以區(qū)分，故鼠婦類(lèi)動(dòng)物通常也多以鼠婦或潮蟲(chóng)相稱(chēng)，這也是造成鼠婦蟲(chóng)藥材基源混亂的原因之一，在商品藥材樣品中，常可見(jiàn)混有多個(gè)種類(lèi)來(lái)源。

3 鼠婦類(lèi)動(dòng)物種類(lèi)鑒定

我國(guó)對(duì)陸生等足類(lèi)動(dòng)物的研究起步較晚，對(duì)其分類(lèi)研究不夠深入，學(xué)者早期曾對(duì)潮蟲(chóng)亞目動(dòng)物進(jìn)行過(guò)簡(jiǎn)單的分類(lèi)，將能卷曲成球形的種類(lèi)統(tǒng)稱(chēng)為鼠婦，定義為鼠婦科；而將不能卷曲成球形的種類(lèi)統(tǒng)稱(chēng)為潮蟲(chóng)，定義為潮蟲(chóng)科，這種分類(lèi)方法對(duì)該類(lèi)動(dòng)物后期正確分類(lèi)常造成一定的影響［16］。

隨著國(guó)內(nèi)外對(duì)該類(lèi)動(dòng)物種類(lèi)記述和研究的增多，其科屬劃分逐漸完善。目前我國(guó)陸生等足類(lèi)動(dòng)物共有11 科、29屬、72 種［15］，其中除喜濕蟲(chóng)科、氣肢蟲(chóng)科及卷殼蟲(chóng)科為我國(guó)陸生等足類(lèi)動(dòng)物最主要類(lèi)群外，卷甲蟲(chóng)科、鼠婦科及潮蟲(chóng)科是其重要類(lèi)群。卷甲蟲(chóng)科動(dòng)物在我國(guó)僅發(fā)現(xiàn)1 屬4 種，卷甲蟲(chóng)屬的普通卷甲蟲(chóng)Armadillidium vulgare（Latreille） 為其代表種類(lèi)，分布廣泛，數(shù)量較多。鼠婦科動(dòng)物在我國(guó)主要有4 屬7 種，鼠婦屬的光滑鼠婦Porcellio laevisLatreille、臘鼠婦屬的多霜臘鼠婦Porcellionides pruinosus（Brandt） 為世界廣布種，在我國(guó)各地均能采集，數(shù)量眾多。粗糙鼠婦Porcellio scaberLatreille 原僅分布于歐洲南部，后因人類(lèi)活動(dòng)而廣泛遷移于世界各地，如美洲、非洲、大洋洲及亞洲等，在我國(guó)部分地區(qū)有分布。潮蟲(chóng)科動(dòng)物在我國(guó)僅發(fā)現(xiàn)有1 屬3 種，以卡氏雅潮蟲(chóng)為代表，主要分布于我國(guó)亞熱帶和暖溫帶地區(qū)。

雖然我國(guó)歷史文獻(xiàn)描述了鼠婦蟲(chóng)的生境與形態(tài)，但并未明確鼠婦蟲(chóng)藥材的基源種類(lèi)，后期文獻(xiàn)逐步將其基源確定為普通卷甲蟲(chóng)和粗糙鼠婦［17-19］，并被多數(shù)標(biāo)準(zhǔn)沿用［11-13］。由于受早期分類(lèi)方法的影響，其基源種的科屬歸類(lèi)一直以來(lái)較為混亂，常有卷甲蟲(chóng)科、平甲蟲(chóng)科、鼠婦科、潮蟲(chóng)科等不同歸類(lèi)表述，如多將粗糙鼠婦定義為平甲蟲(chóng)科粗糙鼠婦或潮蟲(chóng)科鼠婦。根據(jù)現(xiàn)代分類(lèi)學(xué)研究，卷甲蟲(chóng)科和鼠婦科動(dòng)物的主要區(qū)別在于卷甲蟲(chóng)科動(dòng)物能卷曲成球狀，尾肢及尾節(jié)后緣圍成半圓形，而鼠婦科動(dòng)物不能卷曲成球狀，尾肢棒狀，長(zhǎng)于尾節(jié)。潮蟲(chóng)科動(dòng)物雖然也不能卷曲成球狀，卻與鼠婦科動(dòng)物分別歸為不同的科，并未作為鼠婦蟲(chóng)藥材來(lái)源被收載。根據(jù)形態(tài)學(xué)特征，二者應(yīng)分別屬于卷甲蟲(chóng)科和鼠婦科［15-16］，本研究將二者分類(lèi)基源擬定為卷甲蟲(chóng)科普通卷甲蟲(chóng)和鼠婦科粗糙鼠婦。

根據(jù)形態(tài)特征差異，本研究將收集樣品分為不同類(lèi)型，并對(duì)不同類(lèi)型樣本種類(lèi)進(jìn)行鑒定，結(jié)合文獻(xiàn)記述，建立了鼠婦蟲(chóng)藥材基源種類(lèi)及其主要近似種的形態(tài)鑒別檢索表，見(jiàn)表1。

4 質(zhì)量研究

4.1 性狀鑒別

4.1.1 普通卷甲蟲(chóng) 本品全體橢圓形而稍扁，多卷曲成近球形或半球形，體長(zhǎng)0.5～1.2 cm，長(zhǎng)約為寬的2 倍。表面灰色至暗褐色，部分具灰白色與灰黑色相間斑紋，略具光澤。頭部近長(zhǎng)方形，陷于第一胸節(jié)，前緣有復(fù)眼一對(duì)，觸角兩對(duì)，第一觸角細(xì)小，不易觀察，第二觸角較長(zhǎng)，觸柄5 節(jié)，觸鞭2 節(jié)，末節(jié)長(zhǎng)于近體節(jié)，多脫落。全體由多數(shù)近平行的環(huán)節(jié)構(gòu)成，呈覆瓦狀排列。背部隆起，平滑，腹部?jī)?nèi)陷。胸節(jié)7，寬廣，腹節(jié)5，腹部和胸部背板幾等長(zhǎng)，兩者側(cè)緣連成一弧線，第1、2 節(jié)窄，側(cè)緣被第7 胸節(jié)覆蓋。各體節(jié)具同形足1 對(duì)，胸肢7 對(duì)，腹肢5 對(duì)。尾節(jié)呈倒梯形，末端平直，尾肢扁平，外肢節(jié)背面觀呈三角形，末端與尾節(jié)嵌合齊平。第三至第五腹節(jié)側(cè)緣與尾節(jié)、尾肢后緣圍成半圓形。質(zhì)脆易碎，氣腥臭，味微咸（見(jiàn)圖1A）。

4.1.2 粗糙鼠婦 體稍大，長(zhǎng)約1～1.5 cm，橢圓形，扁平，有的稍卷曲，但不呈球狀。背部顆粒狀，粗糙，散有淺黃色斑紋，兩側(cè)緣斑紋連續(xù)成一淺黃色條帶。尾節(jié)倒三角形，內(nèi)肢節(jié)較短，較尾節(jié)稍長(zhǎng)，外肢節(jié)呈長(zhǎng)錐形，長(zhǎng)于尾節(jié)（見(jiàn)圖1B）。

4.2 顯微鑒別 取樣品粉末，置顯微鏡下觀察，體壁碎片橙色或黃色，表面具不規(guī)則紋理，有的可見(jiàn)具點(diǎn)狀小圓孔。部分碎片上可見(jiàn)多數(shù)剛毛，無(wú)色透明。肌纖維無(wú)色或淡黃色，多碎斷，具波狀紋理。棘刺淺黃色，多斷裂，具縱直紋理，見(jiàn)圖2。

表1 鼠婦蟲(chóng)基源動(dòng)物及其近似種形態(tài)鑒別

圖1 鼠婦蟲(chóng)藥材

4.3 薄層色譜鑒別 取本品粉末1 g，加水20 mL，超聲處理20 min，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀? mL 使溶解，取上清液作為供試品溶液。另取鼠婦蟲(chóng)對(duì)照藥材1 g，同法制成對(duì)照藥材溶液。再取苯丙氨酸、纈氨酸對(duì)照品適量，加水制成每1 mL 含1 mg 的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法（2015 年版《中國(guó)藥典》 四部通則0502） 試驗(yàn)，吸取上述2 種溶液各5 μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G 薄層板上，以正丁醇-冰醋酸-水（12 ∶5 ∶4） 為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以茚三酮試液，在105 ℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品及對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)，見(jiàn)圖3。由薄層色譜可以看出，不同產(chǎn)地鼠婦蟲(chóng)藥材樣品與鼠婦蟲(chóng)對(duì)照樣品在薄層圖譜上斑點(diǎn)基本一致，且與苯丙氨酸、纈氨酸對(duì)照品呈現(xiàn)一致斑點(diǎn)，表明不同產(chǎn)地樣品中含有基本一致的化學(xué)成分。

4.4 浸出物測(cè)定 取樣品粉末2～3 g，照醇溶性浸出物測(cè)定法（2015 年版《中國(guó)藥典》 四部通則2201） 項(xiàng)下的熱浸法測(cè)定，用稀乙醇作溶劑，測(cè)定10 批鼠婦蟲(chóng)藥材樣品的浸出物，每批樣品測(cè)定3 次，測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表2。根據(jù)測(cè)定結(jié)果，10 批鼠婦蟲(chóng)藥材樣品浸出物測(cè)定值為13.57%～18.85%，平均值為16.21%。

表2 鼠婦蟲(chóng)藥材信息及浸出物測(cè)定結(jié)果表（n＝3）

圖2 鼠婦蟲(chóng)藥材粉末顯微圖

5 討論

鼠婦蟲(chóng)為我國(guó)傳統(tǒng)少常用蟲(chóng)類(lèi)藥材，作用明確，療效顯著，但長(zhǎng)期以來(lái)其基源種類(lèi)不明確，多數(shù)文獻(xiàn)或標(biāo)準(zhǔn)對(duì)其品種分類(lèi)記載較為混亂，常有卷甲蟲(chóng)科、平甲蟲(chóng)科、鼠婦科、潮蟲(chóng)科等不同歸類(lèi)方法，如將普通卷甲蟲(chóng)定義為潮蟲(chóng)科，將粗糙鼠婦定義為平甲蟲(chóng)科粗糙鼠婦或潮蟲(chóng)科鼠婦等［1-2，11-13］，該基源歸類(lèi)是沿用我國(guó)早期不完善的分類(lèi)方法的結(jié)果。隨著對(duì)該類(lèi)動(dòng)物研究的深入，其種類(lèi)分類(lèi)逐漸完善，本研究根據(jù)現(xiàn)代分類(lèi)方法對(duì)鼠婦類(lèi)動(dòng)物分類(lèi)情況進(jìn)行了梳理，建立了鼠婦蟲(chóng)藥材基源種與主要近似種的鑒別檢索表，并將鼠婦蟲(chóng)藥材基源種類(lèi)擬定為卷甲蟲(chóng)科普通卷甲蟲(chóng)和鼠婦科粗糙鼠婦。

圖3 鼠婦蟲(chóng)薄層色譜圖

本研究根據(jù)形態(tài)差異將所收集樣品分為不同類(lèi)型，并對(duì)不同類(lèi)型樣品進(jìn)行鑒定，結(jié)果所有樣品中均包含多個(gè)種類(lèi)來(lái)源，其中普通卷甲蟲(chóng)、光滑鼠婦占有較高比例，而粗糙鼠婦僅占較小比例，另外還包含有一些其他種類(lèi)來(lái)源。鼠婦科光滑鼠婦是原產(chǎn)于東亞地區(qū)的品種之一，在我國(guó)各地廣為分布，文獻(xiàn)記載其亦供藥用［16，20］，而粗糙鼠婦原產(chǎn)于歐洲，現(xiàn)僅在部分地區(qū)有分布。相較于粗糙鼠婦，光滑鼠婦樣品應(yīng)更易獲得，但各類(lèi)現(xiàn)代文獻(xiàn)均僅將粗糙鼠婦作為中藥鼠婦蟲(chóng)的來(lái)源之一，而未收載光滑鼠婦，這種現(xiàn)象與樣品實(shí)際情況并不相符。二者到底哪種應(yīng)為我國(guó)鼠婦蟲(chóng)藥材歷史沿用種類(lèi)，需進(jìn)一步開(kāi)展品種考證。

研究結(jié)果表明，鼠婦蟲(chóng)藥材基源混亂現(xiàn)象較為普遍。長(zhǎng)期以來(lái)，鼠婦蟲(chóng)藥材質(zhì)量控制方法過(guò)于簡(jiǎn)單，導(dǎo)致藥材正偽品混用現(xiàn)象普遍，嚴(yán)重影響了藥材質(zhì)量，增加了藥材使用的安全風(fēng)險(xiǎn)。本研究在分類(lèi)鑒定的基礎(chǔ)上，對(duì)鼠婦蟲(chóng)藥材基源種類(lèi)的性狀、顯微、薄層及浸出物等指標(biāo)項(xiàng)目進(jìn)行研究，建立了藥材質(zhì)量控制方法，以期能對(duì)藥材質(zhì)量進(jìn)行有效控制和評(píng)價(jià)。