田懷香，陳 彬，于海燕，周興鑫，陳 臣

（上海應(yīng)用技術(shù)大學(xué)香料香精技術(shù)與工程學(xué)院，上海 201418）

0 引 言

生鮮乳的質(zhì)量控制是乳制品生產(chǎn)的重要前提。其中，生鮮乳的安全篩查是一個(gè)關(guān)鍵環(huán)節(jié)，關(guān)系著后續(xù)的乳制品生產(chǎn)、收購(gòu)、加工、銷(xiāo)售等多個(gè)階段。近些年發(fā)生的一系列乳及乳制品安全事故警醒著公眾[1]，生鮮乳中的獸藥殘留問(wèn)題理應(yīng)得到更多的關(guān)注。目前，生鮮乳中獸藥殘留主要包括抗菌類(lèi)、抗寄生蟲(chóng)類(lèi)、消炎鎮(zhèn)痛類(lèi)、農(nóng)藥除蟲(chóng)類(lèi)、消化系統(tǒng)類(lèi)和其他類(lèi)六大類(lèi)，“中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部公告第235 號(hào)”[2]（以下簡(jiǎn)稱(chēng)為農(nóng)業(yè)部235 號(hào)公告）中作出了明確的限量要求，但違規(guī)使用獸藥的情況仍然非常嚴(yán)重。

隨著生鮮乳獸藥殘留監(jiān)測(cè)的種類(lèi)與范圍不斷擴(kuò)大，監(jiān)測(cè)的方法也越來(lái)越方便和快捷[3]，從原來(lái)的免疫分析法[4-5]、微生物學(xué)分析法[6-7]逐步發(fā)展到了以具有高靈敏度的儀器分析方法為主的階段，包括氣相色譜[8-9]、液相色譜[10-11]、氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用[12-13]和液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)[14-15]，甚至一些結(jié)合高分辨功能組件的串聯(lián)技術(shù)[16-18]。其中，高效液相色譜-串聯(lián)飛行時(shí)間質(zhì)譜法（High Performance Liquid Chromatography-high Resolution Time-of-flight Tandem Mass Spectrometry，HPLC-TOF-MS/MS）相比低分辨率的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法而言，不僅縮短了分析時(shí)間，還大大增加了可分析的化合物數(shù)目，適合大通量的獸藥殘留篩查。

此外，生鮮乳生產(chǎn)是一個(gè)動(dòng)態(tài)的、連續(xù)的過(guò)程，每天的品質(zhì)都有可能出現(xiàn)新的變化，而對(duì)即時(shí)數(shù)據(jù)的檢測(cè)分析無(wú)法對(duì)將來(lái)或一段時(shí)間內(nèi)的獸藥殘留發(fā)展趨勢(shì)作出準(zhǔn)確的預(yù)判，也不能對(duì)風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行一定程序上的控制，因此屬于一種“過(guò)時(shí)”的判定。因此，探索一種基于歷史數(shù)據(jù)分析，在風(fēng)險(xiǎn)發(fā)生之前作出準(zhǔn)確判斷的安全預(yù)警方法是非常有必要的。常見(jiàn)的安全預(yù)警方法包括人工神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)模型[19]、支持向量機(jī)模型[20]、休哈特控制圖等。其中，休哈特控制圖（Shewhart control charts）又稱(chēng)管理圖，是由來(lái)自美國(guó)貝爾實(shí)驗(yàn)室的休哈特于1924 年正式發(fā)表的一種統(tǒng)計(jì)工具，也是進(jìn)行“動(dòng)態(tài)控制”工序的主要手段[21-22]。該理論由于其廣泛的適用性，常應(yīng)用于質(zhì)量狀況的動(dòng)態(tài)控制。

本研究利用HPLC-TOF-MS/MS 方法對(duì)上海市牧場(chǎng)生鮮乳進(jìn)行獸藥殘留篩查，基于篩查結(jié)果，探索并構(gòu)建了一種安全預(yù)警方法，對(duì)生鮮乳中獸藥殘留情況進(jìn)行識(shí)別、控制與評(píng)價(jià)，以便在風(fēng)險(xiǎn)發(fā)生之前作出準(zhǔn)確判斷。本研究針對(duì)生鮮乳中獸藥殘留難以預(yù)警和預(yù)警過(guò)時(shí)的問(wèn)題提出解決方案，也為開(kāi)展生鮮乳的品質(zhì)監(jiān)控提供一定的借鑒。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1）生鮮乳樣品

本試驗(yàn)所用生鮮乳樣品來(lái)自上海各牧場(chǎng)。

2）標(biāo)準(zhǔn)品

為了構(gòu)建篩查譜庫(kù)，共選擇174 種獸藥化合物標(biāo)準(zhǔn)品，包括β-內(nèi)酰胺類(lèi)、β-興奮劑、阿維菌素類(lèi)、苯并咪唑類(lèi)、大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)、非甾體類(lèi)消炎藥、磺胺類(lèi)、抗球蟲(chóng)劑、喹諾酮類(lèi)、類(lèi)固醇類(lèi)、林可酰胺類(lèi)、氯霉素類(lèi)、四環(huán)素類(lèi)、糖皮質(zhì)類(lèi)、硝基咪唑類(lèi)、鎮(zhèn)靜劑和其他類(lèi)，共17 類(lèi)（均購(gòu)自美國(guó)Sigma Aldrich 公司）。

所有獸藥化合物的標(biāo)準(zhǔn)品用甲醇或水配制成一定濃度的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，于-20 ℃儲(chǔ)存。中間液用甲醇配制，質(zhì)量濃度為10 μg/mL，于-20 ℃儲(chǔ)存；在檢測(cè)前配制成質(zhì)量濃度為200 ng/mL 的混合標(biāo)準(zhǔn)工作液，于-20 ℃儲(chǔ)存。

3）試劑

HPLC-TOF-MS/ MS 法所用到的有機(jī)溶劑包括甲醇、乙腈、乙酸乙酯、二氯甲烷甲酸（美國(guó)Thermo 公司），氯化鈉、無(wú)水硫酸鈉（德國(guó)Merck 公司）均為HPLC 色譜純。超純水由Milli-Q 超純水系統(tǒng)生產(chǎn)。

4）儀器與設(shè)備

Triple TOF TM 5600 質(zhì)譜儀（美國(guó) AB SCIEX 公司），配有電噴霧離子源；Waters 高效液相色譜儀（美國(guó)Waters公司），SORVALL ST 16R 離心機(jī)（美國(guó)Thermo 公司），旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（中國(guó)IKA 公司），氮?dú)鉂饪s儀（中國(guó)ANPEL公司），漩渦振蕩器（中國(guó)Talbys 公司），Milli-Q 超純水制造儀（美國(guó)Millipore 公司），超高壓均質(zhì)機(jī)（北京天恩瀚拓科技有限公司），渦旋分離器（上海達(dá)姆實(shí)業(yè)有限公司），超聲波清洗儀（寧波新芝生物科技股份有限公司），電子天平（賽多利斯科學(xué)儀器（北京）有限公司）。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 生鮮乳樣品的選擇

生鮮乳樣品的抽樣應(yīng)該符合統(tǒng)計(jì)學(xué)原理，本研究采用系統(tǒng)抽樣對(duì)上海市生鮮乳中獸藥殘留污染狀況進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。將上海市50 個(gè)牧場(chǎng)的生鮮乳樣品作為需要抽樣的總體；將總體分成50 份（即各個(gè)牧場(chǎng)），采用簡(jiǎn)單隨機(jī)抽樣法從各個(gè)部分中抽取樣品，將所得到的樣品合并得到最終的篩查樣本。具體為在5、6 月份對(duì)上海市50 個(gè)牧場(chǎng)的生鮮乳樣品每周各抽取1 個(gè)生鮮乳樣品，連續(xù)抽檢6個(gè)星期，共計(jì)300 個(gè)篩查樣本，以這些生鮮乳樣品的獸藥殘留篩查結(jié)果為代表，反映上海市的生鮮乳在抽樣時(shí)間段內(nèi)獸藥殘留污染狀況。具體試驗(yàn)流程安排見(jiàn)圖1。

1.2.2 前處理方法

前處理方法參照文獻(xiàn)[23]，具體步驟如下：①精確稱(chēng)取生鮮乳樣品2.00 g 于50 mL 離心管中，混合振蕩3 min后靜置10 min；②加入1.0 g 氯化鈉和1.0 g 無(wú)水硫酸鈉，振蕩1 min；③準(zhǔn)確加入10 mL的乙腈，渦旋振蕩處理5 min，于10 000 r/min 離心5 min，轉(zhuǎn)移上清液至另一50 mL 離心管中；④再加入10 mL 的乙腈溶液重新提取一次，同樣條件離心后上清液合并；⑤再加入10 mL 乙酸乙酯提取一次，同樣離心條件離心后合并上清液，于50 ℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至最小體積，用1 mL 甲醇復(fù)溶；⑥于-20℃冷凍除脂除雜2 h 以上，取出10 000 r/min 離心5 min，過(guò)0.22 μm 有機(jī)濾膜，供高效液相色譜-高分辨飛行時(shí)間串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)。

圖1 生鮮乳中獸藥殘留篩查流程圖 Fig.1 Flow chart of screening of veterinary drug residues in raw milk

1.2.3 高效液相色譜-高分辨飛行時(shí)間串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)

1）色譜條件

色譜柱為 Poroshell 120 EC-C18（3.0×150 mm，2.7 μm）；柱溫為30 ℃；流動(dòng)相A 為0.1 甲酸-水溶液，B 為甲醇；流速為350 μL/min；進(jìn)樣量：5 μL；線性梯度洗脫程序見(jiàn)表1。

表1 線性梯度洗脫程序 Table 1 Linear gradient elution program

2）質(zhì)譜條件

離子源為電噴霧離子源（electron spray ionization，ESI）；掃描模式為正離子掃描（ESI+）；檢測(cè)方式為全離子掃描；掃描范圍為100～1 000m/z；電噴霧電壓為5 500 V；氣簾氣流速為35 L/h；霧化氣流量（GSl）和輔助氣流量（GS2）均為55 L/h；離子源溫度為600 ℃。去簇電壓為80 V：碰撞能量為10 V；離子累積加速時(shí)間為0.25 s。在此質(zhì)譜條件下，增加了信息相關(guān)掃描（Information Dependent Acquisition，IDA），進(jìn)一步用于監(jiān)測(cè)響應(yīng)值超過(guò)1 000 的化合物，得到其子離子信息，掃描范圍為 50 ～1 000 m/z，去簇電壓（Declustering Potential，DP）為60 V；碰撞電壓（Collision Energy，CE）為（35±15）V；離子累積加速時(shí)間為0.1 s。

一級(jí)全掃描獲得的高質(zhì)量精確質(zhì)譜數(shù)據(jù)用于篩選及定性分析，IDA 全掃描獲得的二級(jí)碎片離子信息用于進(jìn)一步定性確證。

1.2.4 風(fēng)險(xiǎn)預(yù)警控制圖分析方法

對(duì)比分析6 個(gè)批次共300 個(gè)生鮮乳樣品中篩查出的獸藥殘留種類(lèi)，發(fā)現(xiàn)潑尼松（Prednisone，Pre）的檢出率較高，具有普遍代表性，因此選擇生鮮乳中潑尼松構(gòu)建休哈特控制圖。因本研究未對(duì)上海市各牧場(chǎng)生鮮乳中獸藥殘留進(jìn)行定量分析，且每個(gè)批次所收集篩查的生鮮乳樣本數(shù)量一定，故采用潑尼松的檢出數(shù)（Number of Prednisone Detected，Pn）控制圖進(jìn)行構(gòu)建風(fēng)險(xiǎn)預(yù)警體系。

2 結(jié)果與分析

2.1 生鮮乳中多種獸藥殘留的快速篩查

2.1.1 篩查結(jié)果統(tǒng)計(jì)

試驗(yàn)檢測(cè)方法采用前期研究建立并優(yōu)化的方法[24]，圖2 展示了300 個(gè)生鮮乳樣品中篩查出的獸藥種類(lèi)和數(shù)量。由圖2 可知，所有獸藥殘留共計(jì)42 種，涉及到的獸藥種類(lèi)共12 類(lèi)。類(lèi)固醇類(lèi)獸藥是所有生鮮乳獸藥殘留篩查中檢出種類(lèi)最多的獸藥，共12 種；其次是糖皮質(zhì)激素類(lèi)，共6 種；鎮(zhèn)靜劑與喹諾酮類(lèi)各5 種。6 批生鮮乳樣品中，每批次都篩查出的獸藥有6 種，包括噻苯噠唑（Thiabendazole，Thi）、烯丙孕素（Altrenogest，Alt）、倍氯米松（Beclomethasone，Bec）、咔唑心安（Carazolol，Car）、甲基睪酮（Methyltesterone，Met）、諾乙雄龍（Norethandrolon，Nor）。具體的獸藥檢出匯總情況見(jiàn)表2。

圖2 上海市牧場(chǎng)生鮮乳樣品獸藥殘留檢出種類(lèi)和數(shù)量分布 Fig.2 Type and quantity distribution of veterinary drug residues detected of raw milk samples from Shanghai pastures

表2 各批次上海市牧場(chǎng)生鮮乳樣品獸藥殘留檢出匯總 Table. 2 Summary of veterinary drug residues detected in raw milk samples from Shanghai pastures by batch

續(xù)表

2.1.2 污染分析

根據(jù)不同獸藥的使用情況和對(duì)人體的危害，對(duì)7 大類(lèi)獸藥殘留進(jìn)行分析，并結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)和農(nóng)業(yè)部公告等，分析各類(lèi)獸藥監(jiān)測(cè)的必要性。

1）類(lèi)固醇類(lèi)

類(lèi)固醇類(lèi)獸藥是本次生鮮乳獸藥殘留篩查中檢出種類(lèi)最多的獸藥，共12 種。類(lèi)固醇類(lèi)獸藥主要用于調(diào)節(jié)奶牛體內(nèi)雌性激素的平衡以及促進(jìn)生長(zhǎng)，同時(shí)對(duì)奶牛生殖疾患治療也起著重要作用。就本研究檢出的類(lèi)固醇類(lèi)獸藥的危害而言，甲基睪酮在人體內(nèi)的累積，可增加水腫、低血糖、腎臟毒性發(fā)生的概率；玉米赤霉醇藥物及其代謝產(chǎn)物在人體中的殘留會(huì)引起人體性激素機(jī)能紊亂和影響第二性征的正常發(fā)育，并且經(jīng)過(guò)誘導(dǎo)還可能致癌。農(nóng)業(yè)部235 號(hào)公告[2]中明確指出，甲基睪酮、玉米赤霉醇、己烷雌酚等都是禁止用于所有食品動(dòng)物的獸藥，且不得在生鮮乳中檢出；另外，在NY/T 5030[25]《獸藥使用準(zhǔn)則》中明確規(guī)定禁止甲基睪酮作為促生長(zhǎng)用獸藥。

2）糖皮質(zhì)類(lèi)

其次是糖皮質(zhì)類(lèi)獸藥，本次篩查共檢出6 種。糖皮質(zhì)類(lèi)獸藥主要用于奶牛體內(nèi)或體外感染的炎癥治療，以及牛的酮病[26]的治療。糖皮質(zhì)類(lèi)藥物即使微量攝入，也會(huì)引起水、鹽、糖、脂肪和蛋白質(zhì)的代謝紊亂，并引起免疫和發(fā)育毒性等[27]。在本次篩查中，各個(gè)批次中檢出率較高的潑尼松正是糖皮質(zhì)類(lèi)藥物，潑尼松常被用于治療奶牛體內(nèi)或體外感染疾病，以及奶牛酮病等。潑尼松在人體內(nèi)的短期累積會(huì)導(dǎo)致人血糖含量增高，此外，過(guò)量攝入潑尼松可引起抑郁或加重抑郁癥狀，甚至引起骨質(zhì)疏松、青光眼、白內(nèi)障等疾病，這為接下來(lái)預(yù)警體系的構(gòu)建提供了依據(jù)。就本研究篩查出的6 種糖皮質(zhì)類(lèi)獸藥而言，農(nóng)業(yè)部235 號(hào)公告[2]中并沒(méi)有做出清晰的使用和限量規(guī)定，但是在“中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部公告第1031號(hào)”[28]中涉及到了牛奶中倍氯米松、氫化可的松與氟氫可的松的檢測(cè)，證明了檢測(cè)此類(lèi)藥物的必要性。

3）鎮(zhèn)靜劑

本次篩查共檢出5 種鎮(zhèn)靜劑。鎮(zhèn)靜劑藥物在總檢出獸藥中比例較大，此類(lèi)藥物具有抑制躁狂的作用，采樣期間正是上海天氣悶熱的季節(jié)，奶牛因此會(huì)產(chǎn)生熱應(yīng)激，出現(xiàn)狂躁、不受控制的情況；同時(shí)加上產(chǎn)奶高強(qiáng)度需求，奶?？赡軙?huì)因?yàn)閿D奶器的擠壓出現(xiàn)“鬧脾氣”的狀況，此時(shí)便會(huì)使用注射用鎮(zhèn)靜藥劑緩解應(yīng)激反應(yīng)。鎮(zhèn)靜劑對(duì)于人類(lèi)的危害極大，在人體中的殘留會(huì)引起過(guò)敏、心悸、體內(nèi)各種器官病變等后果。本研究共檢出5 種鎮(zhèn)靜劑藥物，在總檢出獸藥中比例較大，這也符合當(dāng)前天氣使用鎮(zhèn)靜劑藥物的規(guī)律；盡管農(nóng)業(yè)部235 號(hào)公告[2]中對(duì)于被檢出的5 種鎮(zhèn)靜劑沒(méi)有做出清晰明確的規(guī)定，但此類(lèi)藥物的污染狀況仍然值得關(guān)注。

4）喹諾酮類(lèi)

本次篩查出5 種喹諾酮類(lèi)藥物，所占比例偏大。除了具有抗菌作用強(qiáng)、范圍廣的特點(diǎn)以外，喹諾酮類(lèi)獸藥還具有高效、低毒、價(jià)廉等特點(diǎn)[29-30]。然而，喹諾酮類(lèi)藥物在被攝入人體后，可導(dǎo)致胃腸疾病、頭痛、頭暈，誘發(fā)癲癇，影響軟骨發(fā)育，長(zhǎng)期累積會(huì)引起肝損害等副作用，造成不可逆的傷害。此次檢出的5 種喹諾酮藥物為環(huán)丙沙星、達(dá)氟沙星、氧氟沙星、萘啶酸、洛美星，農(nóng)業(yè)部235 號(hào)公告[2]中規(guī)定環(huán)丙沙星和恩諾沙星總殘留限量為100 μg/kg，達(dá)氟沙星殘留限量為30 μg/kg。

5）磺胺類(lèi)

本研究篩查出3 種磺胺類(lèi)藥物：甲氧芐啶、磺胺噁唑、磺胺甲基嘧啶?；前奉?lèi)藥物結(jié)構(gòu)類(lèi)似對(duì)氨基苯甲酸，可以和細(xì)菌競(jìng)爭(zhēng)二氫葉酸合成酶，影響細(xì)菌核蛋白的合成，從而達(dá)到殺死細(xì)菌的作用，因此，該類(lèi)藥物是現(xiàn)在最常用的抑菌類(lèi)獸藥[31]。磺胺類(lèi)對(duì)人體最嚴(yán)重的傷害是隨著量的累積引起人體腎功能衰退[32]。對(duì)于磺胺類(lèi)藥物的限量要求，農(nóng)業(yè)部235 號(hào)公告[2]中規(guī)定其在牛/奶中限量不得超過(guò)100 μg/kg，這和國(guó)際食品法典會(huì)、歐盟以及一些歐美國(guó)家對(duì)磺胺類(lèi)的限量一致。

6）β-興奮劑

本研究共檢測(cè)出3 種此類(lèi)藥物：沙美特羅、噴布特羅、沙丁胺醇。為了提高飼養(yǎng)動(dòng)物的瘦肉率，使動(dòng)物更加精壯[33]，不少飼養(yǎng)者也會(huì)將此類(lèi)藥物添加到飼料當(dāng)中。然而，β-興奮劑是一種明確被中國(guó)和歐盟禁止用于動(dòng)物飼養(yǎng)過(guò)程中的獸藥，但是常被違規(guī)作為生長(zhǎng)促進(jìn)劑使用；其次，人體攝入β-興奮劑，會(huì)出現(xiàn)一系列毒副作用，如腹部劇烈疼痛、肌肉不受控制震顫、心跳和呼吸加促等[34]。在農(nóng)業(yè)部235 號(hào)公告[2]中明文規(guī)定禁止沙丁胺醇用于所有動(dòng)物源性食品，且不得在所有可食用組織中檢出。沙丁胺醇相比其他類(lèi)型獸藥，在促生長(zhǎng)、提高瘦肉率、降低脂肪等方面具有明顯的優(yōu)勢(shì)，所以使用的頻率較高，此類(lèi)藥物的殘留狀況需引起足夠的重視。

7）其他類(lèi)

除此之外，本研究還檢出了其他類(lèi)型的獸藥：阿莫西林、莫能菌素、噻苯噠唑、吡利霉素、美托洛爾、鹽霉素、羅硝唑。阿莫西林和莫能菌素都是一種抗菌類(lèi)β-內(nèi)酰胺藥物，農(nóng)業(yè)部235 號(hào)公告[2]中規(guī)定阿莫西林在牛奶中的最高殘留限量為10 μg/kg，莫能菌素為50 μg/kg。噻苯噠唑是一種苯并咪唑藥物，常用于驅(qū)腸蟲(chóng)、促消化。吡利霉素是一類(lèi)林可酰胺藥物，常用于抗菌。鹽霉素屬抗球蟲(chóng)劑，主要用于皮膚表面球蟲(chóng)感染疾病[35]，也被添加到飼料中促進(jìn)生長(zhǎng)。羅硝唑?qū)傧趸溥蝾?lèi)，是一種高效抗原蟲(chóng)藥物[36]。針對(duì)這幾種獸藥的殘留，國(guó)內(nèi)外相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)和公告均沒(méi)有做出明確的限量規(guī)定，但是其安全性仍需進(jìn)一步通過(guò)長(zhǎng)時(shí)間觀察和監(jiān)測(cè)進(jìn)行確定。美托洛爾用于奶牛的情況并不常見(jiàn)，應(yīng)屬于其他類(lèi)污染。

2.2 風(fēng)險(xiǎn)預(yù)警體系的構(gòu)建

2.2.1 休哈特控制圖的創(chuàng)建

根據(jù)本次試驗(yàn)的篩查情況，本研究采用潑尼松檢出數(shù)（Number of prednisone detected，Pn）控制圖進(jìn)行構(gòu)建風(fēng)險(xiǎn)預(yù)警體系。具體構(gòu)建步驟如下：

1）數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

按照采樣順序，以每星期50 個(gè)生鮮乳樣作為一個(gè)樣本，統(tǒng)計(jì)6 個(gè)批次中潑尼松的檢出個(gè)數(shù)，分別為2、5、1、2、4、3。

2）數(shù)據(jù)分析

計(jì)算6 個(gè)批次中心線值（Center Limit，CL）：CL==2.83；

計(jì)算6 個(gè)批次控制上限值（Upper Control Limit，UCL）

3）Pn 控制圖分析

本研究以樣品批次為橫坐標(biāo)，潑尼松檢出數(shù)（Pn）為縱坐標(biāo)，構(gòu)建1～6 周上海市生鮮乳中潑尼松檢出數(shù)的休哈特控制圖，見(jiàn)圖3。

圖3 1～6 周生鮮乳中潑尼松檢出數(shù)（Pn）控制圖 Fig.3 Shewhart control chart of screening numbers of prednisone (Pn) of 6 weeks

由圖3 可知，1～6 周的生鮮乳中潑尼松檢出數(shù)（Pn）均未超出UCL 值（7.72），且在CL 線兩端面分布均勻，未呈現(xiàn)不規(guī)律現(xiàn)象，說(shuō)明1～6 周上海市牧場(chǎng)生鮮乳中的危險(xiǎn)源——潑尼松殘留呈現(xiàn)一個(gè)相對(duì)穩(wěn)定的狀態(tài)，不需要觸發(fā)風(fēng)險(xiǎn)預(yù)警。

2.2.2 生鮮乳中獸藥殘留風(fēng)險(xiǎn)預(yù)警預(yù)測(cè)

試驗(yàn)對(duì)第7 周上海市生鮮乳中潑尼松檢出個(gè)數(shù)進(jìn)行預(yù)測(cè)，分別假設(shè)檢出數(shù)為6 和10 個(gè)。

1）假設(shè)1：第7 周生鮮乳中潑尼松檢出數(shù)為6 個(gè)（Pn=6），重新進(jìn)行休哈特控制圖的計(jì)算以確定控制中值與控制上限，分析如下。

根據(jù)假設(shè)1，7 個(gè)批次中潑尼松的檢出個(gè)數(shù)分別為2、5、1、2、4、3、6。

計(jì)算7 個(gè)批次控制上限UCL 值：UCL=8.55；

以樣本批次為橫坐標(biāo)，潑尼松檢出數(shù)Pn 為縱坐標(biāo)，構(gòu)建1～7 周上海市生鮮乳中潑尼松檢出數(shù)的休哈特控制圖，見(jiàn)圖4。

由圖4 可知，1～7 周的生鮮乳中潑尼松的檢出個(gè)數(shù)都沒(méi)有超出控制上限（8.55），說(shuō)明此期間該獸藥化合物的檢出呈現(xiàn)一個(gè)穩(wěn)定的狀態(tài)，不需要觸發(fā)風(fēng)險(xiǎn)預(yù)警。

2）假設(shè)2：第7 周生鮮乳中潑尼松檢出數(shù)為10 個(gè)（Pn=10），重新進(jìn)行休哈特控制圖的計(jì)算以確定控制中值與控制上限，分析如下：

根據(jù)假設(shè)2，7 個(gè)批次中潑尼松的檢出個(gè)數(shù)分別為2、5、1、2、4、3、10。

圖4 假設(shè)1 潑尼松檢出數(shù)（Pn）控制圖 Fig.4 Shewhart control chart of screening numbers of prednisone (Pn) under hypothesis 1

7 個(gè)批次控制上限UCL 值：UCL=9.52；

以樣本批次為橫坐標(biāo)，潑尼松檢出數(shù)Pn 為縱坐標(biāo)，構(gòu)建1～7 周上海市生鮮乳中潑尼松檢出數(shù)的休哈特控制圖，見(jiàn)圖5。

圖5 假設(shè)2 潑尼松檢出數(shù)（Pn）控制圖 Fig.5 Shewhart control chart of screening numbers of prednisone (Pn) under hypothesis 2

由圖 5 可知，第 7 周生鮮乳中潑尼松檢出數(shù)Pn=10＞UCL=9.52，說(shuō)明這個(gè)周的陽(yáng)性檢出數(shù)已經(jīng)與前6個(gè)星期的歷史數(shù)據(jù)有了顯著性的差異，超出了控制圖的控制范圍，表現(xiàn)出了異常，使控制圖失去了控制平衡。此現(xiàn)象可能導(dǎo)致風(fēng)險(xiǎn)的進(jìn)一步發(fā)生甚至風(fēng)險(xiǎn)的進(jìn)一步擴(kuò)大，所以觸發(fā)了風(fēng)險(xiǎn)預(yù)警。此時(shí)需要判斷此次風(fēng)險(xiǎn)的發(fā)生是偶然原因造成的還是系統(tǒng)產(chǎn)生的，對(duì)生鮮乳樣品的生產(chǎn)流程進(jìn)行追蹤，追溯其獸藥使用用量、使用時(shí)間、使用過(guò)程，并通過(guò)人、物、環(huán)境三大因素，分析問(wèn)題存在的原因，找出解決問(wèn)題的方法，防止風(fēng)險(xiǎn)的增長(zhǎng)甚至從根本上防止風(fēng)險(xiǎn)的再次發(fā)生。

3 結(jié) 論

利用高效液相色譜-高分辨飛行時(shí)間串聯(lián)質(zhì)譜（HPLC-TOF-MS/MS）方法共從300 個(gè)生鮮乳樣品中篩查出42 種獸藥殘留，涉及類(lèi)固醇類(lèi)（12 種）、糖皮質(zhì)類(lèi)（6 種）和鎮(zhèn)靜劑（5 種）等12 大類(lèi)。以生鮮乳中潑尼松殘留檢出數(shù)為例，利用休哈特控制圖構(gòu)建風(fēng)險(xiǎn)預(yù)警體系。在篩查的6 個(gè)星期中，潑尼松的檢出數(shù)未超過(guò)對(duì)應(yīng)的控制上限值7.72，潑尼松檢出數(shù)控制圖呈現(xiàn)穩(wěn)定的狀態(tài)；第7 周的預(yù)警狀態(tài)，則會(huì)根據(jù)該周的檢出數(shù)不同發(fā)生變化：當(dāng)潑尼松的檢出數(shù)為6 時(shí)，不觸發(fā)風(fēng)險(xiǎn)預(yù)警；當(dāng)潑尼松的檢出數(shù)為10 時(shí)，觸發(fā)風(fēng)險(xiǎn)預(yù)警。利用HPLC-TOF-MS/ MS 可以對(duì)生鮮乳樣品進(jìn)行高通量的獸藥殘留篩查，休哈特控制圖結(jié)合歷史數(shù)據(jù)可以對(duì)生鮮乳樣品的獸藥殘留進(jìn)行有效的風(fēng)險(xiǎn)監(jiān)測(cè)和預(yù)警。