鞍山市腫瘤醫(yī)院檢驗(yàn)科 （遼寧 鞍山 114001）

內(nèi)容提要： 目的：探究分析VITEK 2Compact微生物分析儀法在細(xì)菌耐藥表型檢測(cè)中的應(yīng)用價(jià)值。方法：研究時(shí)間為2018年1月～2019年4月，隨機(jī)選擇本院細(xì)菌室分離保存的大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、肺炎克雷伯桿菌，各選取70株，對(duì)各類菌株耐藥表型進(jìn)行檢測(cè)，分別采取常規(guī)紙片擴(kuò)散法、VITEK 2Compact微生物分析儀法，對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行分析，評(píng)估VITEK 2Compact微生物分析儀法應(yīng)用價(jià)值。結(jié)果：VITEK 2Compact微生物分析儀法ESBLs陽性率、MRSA陽性率、克林霉素誘導(dǎo)試驗(yàn)陽性率分別為74.29%、51.42%、48.57%，與常規(guī)紙片擴(kuò)散法72.86%、50.00%、48.57%相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＞0.05，但兩種方式在ESBLs檢測(cè)和NRSA檢測(cè)結(jié)果方面稍有差異。結(jié)論：在致病菌耐藥表型檢測(cè)過程中，VITEK 2Compact微生物分析儀法檢測(cè)準(zhǔn)確性、特異度、靈敏度較為理想。

細(xì)菌感染對(duì)人類健康威脅較多，目前臨床多采取抗生素進(jìn)行預(yù)防與處理，隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)和藥學(xué)研究的發(fā)展，臨床上存在多種不同機(jī)制的抗生素，但是現(xiàn)階段感染率控制效果不理想，且細(xì)菌耐藥性情況較為突出，同時(shí)隨著抗生素的廣泛使用，耐藥機(jī)制日趨復(fù)雜，很多學(xué)者預(yù)言人類存在無抗生素所用的危險(xiǎn)可能，因此在細(xì)菌感染控制過程中快速、準(zhǔn)確提供抗生素藥敏結(jié)果至關(guān)重要[1]。目前臨床檢測(cè)技術(shù)不斷發(fā)展，耐藥表型檢測(cè)工作得以更好地推進(jìn)，其中常規(guī)紙片擴(kuò)散法、VITEK 2Compact微生物分析儀法應(yīng)用廣泛，但具體應(yīng)用價(jià)值仍需進(jìn)一步探究。本文對(duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、肺炎克雷伯桿菌進(jìn)行了藥敏試驗(yàn)，旨在找尋一種更為敏感的檢測(cè)方式，做出如下報(bào)道。

1.資料與方法

1.1 一般資料

研究時(shí)段確定為2018年1月～2019年4月，隨機(jī)選擇本院細(xì)菌室分離保存的大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、肺炎克雷伯桿菌，各選取70株，質(zhì)控株確定為金黃色葡萄球菌ATCC29213和大腸桿菌ATCC25922。

1.2 方法

1.2.1 常規(guī)紙片擴(kuò)散法

藥敏紙片由Oxoid提供，血培養(yǎng)基、M-H培養(yǎng)基、麥康鈣培養(yǎng)基由北京同立海源生物科技有限公司提供。具體檢測(cè)如下：①超廣譜β-內(nèi)酰胺酶（ESBLs）試驗(yàn)，取大腸桿菌、肺炎克雷伯桿菌，在麥康凱培養(yǎng)基中復(fù)種，取3～4個(gè)克隆，配置而成懸濁液（0.5麥?zhǔn)蠁挝粷舛龋?，于M-H平板上涂抹，取30μg頭孢噻肟、30μg頭孢噻肟和10μg克拉維酸、30μg頭孢他啶、30μg頭孢他啶和10μg克拉維酸紙片，放置在M-H平板上，孵育24h，溫度控制為35°C；②耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）檢測(cè)，復(fù)種、配置混懸液、混懸液涂抹同上，隨后取30μg頭孢西丁、1μg苯唑西林，放置在M-H平板上，孵育如上；③紅霉素耐藥克林霉素誘導(dǎo)試驗(yàn)，取黃金色葡萄球菌，復(fù)種、混懸液處理等如①，取15μg紅霉素紙片、2μg克林霉素紙片，貼于M-H平板，兩者中心間距15mm，培養(yǎng)24h。

1.2.2 VITEK 2Compact

微生物分析儀法，配置大腸桿菌、肺炎克雷伯桿菌混懸液，濃度為0.5麥?zhǔn)蠁挝粷舛龋褂妹防锇ST-GN13藥敏檢測(cè)板，隨后再配置黃金色葡萄球菌混懸液，濃度如上，選取梅里埃AST-GP67藥敏檢測(cè)板進(jìn)行檢測(cè)。

1.3 觀察指標(biāo)與判定標(biāo)準(zhǔn)

統(tǒng)計(jì)比較兩種方式檢測(cè)結(jié)果，參照如下標(biāo)準(zhǔn)：①ESBLs陽性：2組紙片或其中1組加克拉維酸制片抑菌圈直徑＞未加克拉維酸紙片抑菌直徑，且差值＞5mm；②MRSA陽性：苯唑西林抑菌環(huán)＜11mm或者頭孢西丁抑菌環(huán)＜19mm；③克林霉素誘導(dǎo)試驗(yàn)陽性：根據(jù)克林霉素抑菌環(huán)是否出現(xiàn)截平現(xiàn)象判斷，即是否有“D”型環(huán)形成，有則為陽性[2]。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

數(shù)據(jù)處理使用SPSS24.0軟件，計(jì)數(shù)資料，表示為n、%，χ2值進(jìn)行檢驗(yàn)，統(tǒng)計(jì)學(xué)意義指標(biāo)：P＜0.05。

2.結(jié)果

2.1 檢測(cè)陽性率比較

VITEK 2Compact微生物分析儀法ESBLs陽性率、MRSA陽性率、克林霉素誘導(dǎo)試驗(yàn)陽性率分別為74.29%、51.42%、48.57%，與常規(guī)紙片擴(kuò)散法72.86%、50.00%、48.57%相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＞0.05，見表1。

2.2 檢測(cè)結(jié)果分析

兩種方法檢測(cè)陽性率統(tǒng)計(jì)比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，但在ESBLs、MRSA檢測(cè)方面存在細(xì)微差異，其中ESBLs中，常規(guī)紙片擴(kuò)散法檢測(cè)陰性菌株為38例，而VITEK 2Compact微生物分析儀法檢測(cè)其中2例為陽性，常規(guī)制片擴(kuò)散法在MRSA檢測(cè)中檢出陰性菌株為35例，而2VITEK 2Compact微生物分析儀法檢測(cè)其中1例為陽性。

表1. 兩種方法檢測(cè)陽性率比較(n/%)

3.討論

抗生素在細(xì)菌感染控制中發(fā)揮著重要的作用，但是目前細(xì)菌種類明顯增多，且抗生素存在濫用情況，耐藥性成為臨床關(guān)注的重點(diǎn)問題，且耐藥機(jī)制日益復(fù)雜，對(duì)臨床抗生素使用提出了更高要求。在耐藥性問題解決過程中，藥敏試驗(yàn)發(fā)揮著重要作用，對(duì)于耐藥表型檢測(cè)，臨床多應(yīng)用常規(guī)紙片擴(kuò)散法和微生物分析儀法，對(duì)二者檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行探究分析，明確檢測(cè)結(jié)果，進(jìn)而確定更為敏感的檢測(cè)方式[3]。

本次研究結(jié)果顯示：微生物分析儀法與常規(guī)紙片擴(kuò)散法檢出陽性率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但兩種方式在ESBLs檢測(cè)和NRSA檢測(cè)結(jié)果方面稍有差異。具體原因分析如下：常規(guī)紙片擴(kuò)散法在應(yīng)用過程中容易受多種因素影響，常見因素為培養(yǎng)基種類、細(xì)菌接種量、菌液濃度等，影響抑菌圈大小，從而影響結(jié)果判斷準(zhǔn)確性，同時(shí)在結(jié)果讀取時(shí)紙片法讀取最終結(jié)果，而微生物分析儀法可實(shí)現(xiàn)每隔15min讀取1次結(jié)果，可實(shí)現(xiàn)動(dòng)態(tài)觀察，進(jìn)而提高了檢測(cè)的敏感性和特異性，此外微生物分析儀法檢測(cè)時(shí)間較短，以ESBLs檢測(cè)為例，僅需5～9h，更利于耐藥試驗(yàn)開展[4]。

綜上所述，在致病菌耐藥表型檢測(cè)過程中，VITEK 2Compact微生物分析儀法檢測(cè)準(zhǔn)確性、特異度、靈敏度較為理想。