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        豬繁殖與呼吸綜合征病毒抗體水平測(cè)定與分析

        2020-05-16 00:53:10
        中國(guó)豬業(yè) 2020年2期
        關(guān)鍵詞:毒苗活苗免疫抗體

        (福建省寧德市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心,福建寧德 352100)

        豬繁殖與呼吸綜合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS),是一種由豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)誘發(fā)的急性、高度接觸性傳染病,也稱為“豬藍(lán)耳病”,該病主要引起妊娠母豬繁殖障礙以及仔豬的呼吸道癥狀[1]。PRRS于1987年在美國(guó)首次被發(fā)現(xiàn),于1991年在荷蘭首次分離出病毒,世界動(dòng)物衛(wèi)生組織(OIE)將其列為B類傳染??;在我國(guó)于1996年首次被發(fā)現(xiàn),并于2006年在全國(guó)20多個(gè)省份呈暴發(fā)式流行,我國(guó)將該病列為一類動(dòng)物傳染病,在2008年將其列入我國(guó)強(qiáng)制免疫接種病種。

        自從2017年國(guó)家取消對(duì)豬藍(lán)耳病的強(qiáng)制免疫以及2018年8月非洲豬瘟傳入我國(guó)之后,由于疫苗費(fèi)用及生物安全等因素,大部分豬場(chǎng)工作重心都有所轉(zhuǎn)移,致使豬藍(lán)耳病有抬頭的趨勢(shì)。

        鑒于豬藍(lán)耳病為免疫抑制性疾病,感染該病的豬群極易繼發(fā)細(xì)菌性疾病,導(dǎo)致死亡率驟升,從而造成很大的經(jīng)濟(jì)損失。為了解在取消強(qiáng)制免疫之后豬藍(lán)耳病的免疫狀況,準(zhǔn)確掌握豬群的豬藍(lán)耳病免疫抗體水平,筆者對(duì)福建省寧德市2017年秋至2019年春季豬藍(lán)耳病免疫抗體進(jìn)行監(jiān)測(cè),同時(shí)對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析,以便及時(shí)發(fā)現(xiàn)工作中存在的問(wèn)題,為今后更好地開展疫病防控工作提供參考依據(jù)?,F(xiàn)將免疫抗體監(jiān)測(cè)結(jié)果作如下報(bào)告。

        1 材料與方法

        1.1 材料

        1.1.1 樣品來(lái)源

        在福建省寧德市9縣(市、區(qū))規(guī)模豬場(chǎng)內(nèi)隨機(jī)抽取78場(chǎng)(次),共采集1 230份豬全血,冷藏送至實(shí)驗(yàn)室,分離血清,4℃保存待檢。豬繁殖與呼吸綜合征滅活疫苗,由齊魯動(dòng)物保健品有限公司及上海海利生物技術(shù)股份有限公司生產(chǎn);豬繁殖與呼吸綜合征弱毒疫苗,由勃林格殷格翰動(dòng)物保健品有限公司及哈爾濱維科生物技術(shù)開發(fā)公司生產(chǎn)。

        1.1.2 檢測(cè)試劑

        豬繁殖與呼吸綜合征病毒抗體ELISA檢測(cè)試劑盒,購(gòu)自北京愛德士元亨生物科技有限公司。

        1.1.3 主要設(shè)備

        高速臺(tái)式冷凍離心機(jī),SW-CJ凈化工作臺(tái),電熱恒溫培養(yǎng)箱,酶標(biāo)儀,可調(diào)微量移液器。

        1.2 方法

        1.2.1 檢測(cè)方法

        按照GB/T 18090-2008,使用間接ELISA方法進(jìn)行檢測(cè),結(jié)合檢測(cè)試劑盒使用說(shuō)明書進(jìn)行。

        1.2.2 結(jié)果判定

        試驗(yàn)成立條件,即陽(yáng)性對(duì)照平均OD650-陰性對(duì)照平均OD650≥0.150,而且陰性對(duì)照平均OD650≤0.150。結(jié)果用S/P表示,S/P=[(樣品OD650-陰性對(duì)照平均OD650)]/[(陽(yáng)性對(duì)照平均OD650-陰性對(duì)照平均OD650)]*100。S/P<0.4表示陰性,S/P≥0.4表示陽(yáng)性。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 豬藍(lán)耳病整體免疫抗體陽(yáng)性率

        由表1可以看出,自2017年秋至2019年春,從9個(gè)縣(市、區(qū))共采集樣品1 230份,其中陽(yáng)性樣品1 045份,平均陽(yáng)性率為84.96%。G縣的陽(yáng)性率最高,為93.33%;陽(yáng)性率最低的是H縣,為70.00%。各縣(市、區(qū))免疫抗體陽(yáng)性率均達(dá)到國(guó)家規(guī)定的陽(yáng)性率(70%)以上,說(shuō)明該病整體免疫水平較為良好,但各縣(市、區(qū))之間的抗體水平差異較為明顯。

        表1 2017年秋至2019年春各縣 (市、區(qū))豬藍(lán)耳病免疫抗體陽(yáng)性率

        2.2 各縣 (市、區(qū))豬藍(lán)耳病免疫抗體陽(yáng)性率

        自2017年秋至2019年春,共采集血液樣品4次,分別為270份、270份、420份、270份;除2018年秋以外,每個(gè)縣(市、區(qū))采集的樣品均為30份。由圖1可以看出,這4批樣品中,不同縣(市、區(qū))檢測(cè)得到的陽(yáng)性率均不盡相同;部分縣(市、區(qū))4次檢測(cè)所得抗體合格率也存在明顯差異,這說(shuō)明了其免疫水平不夠穩(wěn)定,而且C、E、H 3縣的免疫抗體合格率均有低于國(guó)家規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)(70%)的情況出現(xiàn),需要引起重視。

        2.3 4批次豬藍(lán)耳病病毒免疫抗體檢測(cè)結(jié)果

        由表2可以看出,2017年秋豬藍(lán)耳病免疫抗體陽(yáng)性率為87.41%;2018年春豬藍(lán)耳病免疫抗體陽(yáng)性率為86.67%;2018年秋豬藍(lán)耳病免疫抗體陽(yáng)性率為85.00%;2019年春豬藍(lán)耳病免疫抗體陽(yáng)性率為80.74%。4批次抗體均達(dá)到農(nóng)業(yè)農(nóng)村部規(guī)定的70%以上合格率的標(biāo)準(zhǔn)。

        表2 2017年秋至2019年春豬藍(lán)耳病免疫抗體檢測(cè)結(jié)果

        2.4 豬藍(lán)耳病一免與二免抗體陽(yáng)性率比較

        根據(jù)采樣單,此4批次共1 230份豬血清樣品中,有745份僅免疫1次,剩余485份免疫2次。一免樣品的豬藍(lán)耳病抗體平均陽(yáng)性率為77.72%,二免樣品的豬藍(lán)耳病抗體平均陽(yáng)性率為96.08%??梢钥闯觯庖?次后豬藍(lán)耳病抗體平均陽(yáng)性率高于免疫1次,而且二者的抗體平均陽(yáng)性率差異極顯著(<0.01) (表 3)。

        2.5 豬藍(lán)耳病滅活苗與弱毒苗免疫效果比較

        在1 230份豬血清樣品中,有410份豬血清樣品來(lái)自采用滅活苗免疫的豬只,剩余的820份血清樣品來(lái)源的豬只采用弱毒苗免疫。滅活苗免疫的樣品豬藍(lán)耳病抗體平均陽(yáng)性率為83.41%,弱毒苗免疫的樣品豬藍(lán)耳病抗體平均陽(yáng)性率為86.59%。可以看出,滅活苗免疫后豬藍(lán)耳病抗體平均陽(yáng)性率略高于弱毒苗免疫后豬藍(lán)耳病抗體平均陽(yáng)性率,二者的抗體平均陽(yáng)性率差異不顯著(>0.05) (表 4)[2]。

        3 討論

        豬藍(lán)耳病與豬瘟、口蹄疫一樣,是當(dāng)前豬場(chǎng)流行的主要傳染病之一,對(duì)養(yǎng)殖業(yè)來(lái)說(shuō),該病極具毀滅性。2008—2017年,國(guó)家對(duì)豬藍(lán)耳病實(shí)行強(qiáng)制免疫。雖然2017年后該病退出強(qiáng)制免疫,但不代表著豬藍(lán)耳病消失,廣大養(yǎng)殖場(chǎng)(戶)切不可掉以輕心。豬藍(lán)耳病主要引起懷孕母豬的流產(chǎn),及豬群整體(特別是仔豬)的呼吸系統(tǒng)疾病。豬藍(lán)耳病病原為豬藍(lán)耳病病毒,是一種易重組、變異頻率高的RNA病毒。該病毒極易引起豬群免疫抑制,從而引起繼發(fā)性感染,促使死亡率增高。在非洲豬瘟流行環(huán)境下,為提高豬群整體抵抗力,規(guī)模豬場(chǎng)更應(yīng)當(dāng)繼續(xù)按照早前國(guó)家制定的強(qiáng)制免疫計(jì)劃、方案進(jìn)行免疫。

        表3 豬藍(lán)耳病一免與二免抗體陽(yáng)性率比較

        表4 豬藍(lán)耳病滅活苗與弱毒苗免疫抗體陽(yáng)性率比較

        按照國(guó)家免疫計(jì)劃要求,我市于2017年開始取消了對(duì)豬藍(lán)耳病的強(qiáng)制免疫。本文選取2017年秋季以來(lái)我市規(guī)模豬場(chǎng)進(jìn)行監(jiān)測(cè)及分析,用以了解強(qiáng)制免疫取消后我市豬藍(lán)耳病免疫情況。

        從以上檢測(cè)及統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果可以看出,對(duì)采集的1 230份豬血清樣品進(jìn)行免疫抗體水平檢測(cè),結(jié)果顯示全市豬藍(lán)耳病免疫抗體平均水平為84.96%,雖然達(dá)到農(nóng)業(yè)農(nóng)村部規(guī)定的免疫抗體合格率最低要求(70%),但E、H兩縣平均抗體合格率僅74%、70%,未達(dá)到我省早前所規(guī)定“春秋防期間,免疫抗體合格率需要達(dá)到80%”的要求。此外,各縣(市、區(qū))陽(yáng)性率參差不齊,存在一定差異。如C、E、H等3縣,豬藍(lán)耳病合格率最高時(shí)分別達(dá)到96.67%、96.67%、93.33%,最低時(shí)僅有46.67%、33.33%、53.33%,差異顯著,存在重大動(dòng)物疫情漏洞,作為疫控工作人員,需引起注意,及時(shí)提醒相關(guān)養(yǎng)殖場(chǎng)(戶)人員,及時(shí)補(bǔ)免。

        本研究對(duì)全市9個(gè)縣(市、區(qū))從2017年秋至2019年春,分4批次抽血、檢測(cè)。雖然每次檢測(cè)所得豬藍(lán)耳病平均抗體合格率均在80%以上,但是通過(guò)觀察可以發(fā)現(xiàn):豬藍(lán)耳病平均抗體合格率從2017年秋的87.41%,到2019年春的80.74%,一直處于下降狀態(tài),且隨著時(shí)間的推移,下降的幅度越來(lái)越大。這可能與以下兩個(gè)方面的原因有關(guān):一方面,隨著國(guó)家對(duì)豬藍(lán)耳病強(qiáng)制免疫取消的時(shí)間推移,部分養(yǎng)殖場(chǎng)(戶)人員思想上有所松懈,認(rèn)為該病免疫不再重要,造成免疫效果不佳;另一方面,從2018年秋季開始,全國(guó)暴發(fā)非洲豬瘟疫情,使得各養(yǎng)殖場(chǎng)(戶)工作重心轉(zhuǎn)移至非洲豬瘟防控上,而無(wú)暇顧及豬藍(lán)耳病等疫病的防控與免疫。

        就豬群豬藍(lán)耳病疫苗免疫次數(shù)而言,根據(jù)檢測(cè)結(jié)果分析可得,二免的血清樣品平均抗體陽(yáng)性率比一免的血清樣品平均抗體陽(yáng)性率高很多,差異極顯著。只免疫1次的血清樣品豬藍(lán)耳病平均抗體陽(yáng)性率為77.72%,而進(jìn)行2次免疫后平均抗體陽(yáng)性率迅速提升至96.08%,這說(shuō)明在豬場(chǎng)實(shí)際生產(chǎn)活動(dòng)過(guò)程中,一免的豬群免疫抗體合格率較二免而言,有所差距。此次監(jiān)測(cè)還發(fā)現(xiàn),我市進(jìn)行豬藍(lán)耳病二免的數(shù)量?jī)H為39.43%;雖然一免的合格率能達(dá)到70%以上,但為提高豬群抵抗力及群體保護(hù)力,我們應(yīng)當(dāng)向廣大養(yǎng)殖場(chǎng)(戶)大力推廣二免,以提高免疫抗體合格率。

        根據(jù)采樣調(diào)查表可以發(fā)現(xiàn),相比豬繁殖與呼吸綜合征滅活苗,豬繁殖與呼吸綜合征弱毒苗在我市的使用范圍更廣。此次所采集的1 230份血清樣品中,有三分之二使用的疫苗為弱毒苗。檢測(cè)結(jié)果顯示,弱毒苗及滅活苗二者所得平均抗體陽(yáng)性率分別為86.59%、83.41%,弱毒苗使用效果會(huì)比滅活苗效果好一些,但二者差異不顯著。弱毒苗具有免疫力強(qiáng)、效果好、持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)等優(yōu)點(diǎn),多用來(lái)對(duì)母豬進(jìn)行免疫,使新生仔豬獲得較多的母源抗體,從而能夠提高仔豬成活率。與此同時(shí),由于減毒的原因使得抗原性減弱,會(huì)導(dǎo)致其免疫原性受到限制;也會(huì)由于減毒不夠徹底,導(dǎo)致臨床感染、免疫抑制。此外,母源抗體極易對(duì)弱毒苗的免疫過(guò)程產(chǎn)生影響。滅活苗不會(huì)有散毒、毒力返強(qiáng)而造成新疫源地的風(fēng)險(xiǎn),安全性高;母源抗體對(duì)滅活苗的免疫過(guò)程影響極少;但其效果較弱毒苗差,持續(xù)時(shí)間也較短??偠灾?,豬場(chǎng)在實(shí)際生產(chǎn)中應(yīng)該根據(jù)豬群的藍(lán)耳病病毒感染情況、豬群階段等因素,而選擇使用弱毒疫苗或者滅活疫苗免疫。

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