鐘愷欣 張欣宗 葉桂芳 伍欣 林維新 錢潔友 王奇玲

TORCH是可引起宮內(nèi)感染而導(dǎo)致新生兒畸形或發(fā)育異常的一組病原體的英文名稱縮寫，其中T(Toxoplasma，TOX)是弓形蟲，O(Other)是其它病原體，R(Rubella virus，RV)是風(fēng)疹病毒，C(Cytomegalovirus，CMV)是巨細胞病毒，H(Herpes simplex virus，HSV)是單純皰疹病毒[1]。孕婦感染TORCH后，病原體可通過胎盤及產(chǎn)道進入胎兒身體，引起宮內(nèi)感染和新生兒感染，嚴重時可導(dǎo)致流產(chǎn)、早產(chǎn)、死胎、胎兒畸形及胎兒發(fā)育障礙等各種結(jié)果[2]。人體感染TORCH后能產(chǎn)生特異性抗體，IgM抗體陽性提示機體近期感染，而IgG抗體陽性是既往感染的標志，表明機體有一定免疫力，傳播感染的風(fēng)險較小。因此，為做好優(yōu)生優(yōu)育工作，降低新生兒的出生缺陷率，提高人口素質(zhì)，TORCH的檢測十分必要。TORCH相關(guān)病原體可通過多種方式傳播，如飛沫傳播、接觸傳播等[3]，在臨床實踐中，男性也會感染TORCH。按照《人類精子庫基本標準和技術(shù)規(guī)范》中的健康檢查標準，人類精子庫必須對捐精志愿者進行TORCH檢測?，F(xiàn)對廣東省人類精子庫2 808例捐精志愿者的TORCH檢測結(jié)果進行回顧性分析。

對象與方法

一、研究對象

研究對象來源于2016年1月至2018年6月在廣東省人類精子庫接受捐精篩查的2 808例捐精志愿者。入選標準是精液篩查結(jié)果達到人類精子庫捐精標準，后抽血進行傳染病、性傳播性疾病、優(yōu)生四項和遺傳性疾病等檢測。本研究通過醫(yī)院倫理委員會審查后開展。

二、方法

1.TORCH檢測方法：采集志愿者靜脈血5 ml，3000 r/min離心10 min，取血清；未及時檢測的標本置-20℃保存。采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測TORCH相應(yīng)特異性抗體IgM。

2.儀器和試劑：所用儀器為TECAN全自動酶標儀；試劑由亞特斯生物醫(yī)學(xué)技術(shù)(無錫)有限公司生產(chǎn)，實驗步驟均嚴格按照說明書進行操作。

3.志愿者TORCH篩查方案：根據(jù)人類精子庫采集部門相關(guān)SOP，如果捐精志愿者初次TORCH檢查結(jié)果異常，則根據(jù)以下原則進行處理： HSV-IgM抗體陽性的志愿者直接淘汰；其余三項陽性者在不用藥干預(yù)的情況下，一個月后抽血復(fù)查。復(fù)查結(jié)果再次陽性者，一個月后還可再次復(fù)查。針對兩次復(fù)查陽性的志愿者，我們會建議其去男科門診咨詢醫(yī)師。復(fù)查結(jié)果陰性且其他結(jié)果正常者可合格捐精。

4.統(tǒng)計學(xué)分析：采用 SPSS 21.0 軟件進行統(tǒng)計分析。TORCH感染情況計算陽性率，復(fù)查后轉(zhuǎn)陰情況計算自然轉(zhuǎn)陰率。率的比較采用卡方檢驗，P<0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

結(jié) 果

18例HSV陽性志愿者直接淘汰，占比15.3%(18/118)；另有17例TORCH抗體陽性志愿者因G6PD缺乏、肝炎病毒或地中海貧血篩查等結(jié)果異常而淘汰，占比14.4%(17/118)；25例志愿者不愿回來復(fù)查，放棄捐精，占比21.2%(25/118)。其中55例志愿者(TOX 11例、RV 18例、CMV 23例、TOX和RV兩項陽性3例)在規(guī)定時間內(nèi)回來復(fù)查，另外有3例志愿者(TOX 1例、CMV 1例、TOX和CMV兩項陽性1例)在初次抽血檢測半年后回來復(fù)查。

一、志愿者初次TORCH感染情況

共2 808例志愿者抽血檢測了TORCH IgM抗體，118例檢測結(jié)果陽性，陽性率為4.2%。其中有16例兩項同時陽性， TOX、RV、CMV、HSV的感染率分別為0.9%、1.3%、1.9%、0.6%。TORCH各病原體的感染情況見表1，RV、CMV感染率相對較高。

表1 篩選期2 808例志愿者TORCH感染情況Table 1 TORCH infection in 2808 volunteers in the screening period

二、志愿者復(fù)查TORCH感染情況

有58例初次TORCH抗體陽性的志愿者一個月后參加第一次復(fù)查，復(fù)查比例分別為TOX 61.5%、RV 58.3%、CMV 46.3%。志愿者第一次復(fù)查TORCH結(jié)果如表2所示。TOX、RV、CMV抗體的自然轉(zhuǎn)陰率分別為50.0%、42.9%、20.0%。有16例志愿者第一次復(fù)查結(jié)果陽性后進行了第二次復(fù)查。結(jié)果如表2所示，TOX、RV、CMV抗體的轉(zhuǎn)陰率分別為0、16.7%(1/6)、0。

經(jīng)過兩次復(fù)查后，總自然轉(zhuǎn)陰率分別為TOX 50.0%、RV 47.6%、CMV 20.0%。最終有15例志愿者因TORCH陽性淘汰。

表2 初次檢測抗體陽性后復(fù)查情況Table 2 Reexamination after initial antibody test

各項目第二次復(fù)查轉(zhuǎn)陰率與第一次復(fù)查相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

討 論

有研究報道TORCH多為隱性感染，感染時人體常無明顯臨床癥狀。但TORCH病原體可通過胎盤和產(chǎn)道傳染給胎兒和新生兒，可能導(dǎo)致早產(chǎn)、流產(chǎn)、死胎、胎兒畸形、胎兒發(fā)育異常等多種不良妊娠結(jié)局[4,5]。母親孕期感染TORCH后有幸存活下來的新生兒，也常出現(xiàn)生長發(fā)育遲緩、神經(jīng)缺陷、先天性心臟病、視力、聽力障礙、智力發(fā)育不全及皰疹等疾病[6]。TORCH四種常見病原體均可寄宿于孕婦體內(nèi)，通過干擾細胞遺傳物質(zhì)的穩(wěn)定性產(chǎn)生致畸效果[7]。妊娠期婦女由于內(nèi)分泌改變和免疫功能減弱，容易受到病原體感染。另外，對于曾經(jīng)感染過TORCH的孕婦來說，其體內(nèi)潛伏的病毒更容易被激活而導(dǎo)致復(fù)發(fā)感染[8]。CMV可通過各種途徑傳播，在包括精液等多種體液中可檢測到病原體[3]。有研究報道，TORCH感染會使男性患者精液質(zhì)量下降以及損傷精子DNA的完整性[9-11]。TORCH檢測是優(yōu)生優(yōu)育的重要檢測項目之一，在降低胎兒感染率和出生缺陷率等方面具有重要意義[2]。因各地區(qū)的經(jīng)濟、文化和生活環(huán)境不同，TORCH感染率存在地區(qū)差異，文獻報道成都地區(qū)感染率為12.02%[12]，包頭地區(qū)為5.38%[13]，天津地區(qū)為5.84%[14]。作為供精輔助生殖技術(shù)精源的提供者，人類精子庫常規(guī)對志愿者進行TORCH篩查。廣東省人類精子庫捐精志愿者TORCH感染率為4.2%，與江西省人類精子庫報道的3.9%相近[15]。

隨著輔助生殖技術(shù)的不斷發(fā)展，臨床對供精精液的需求不斷增加，但近年不少報道顯示人類精子庫捐精志愿者合格率逐漸降低，志愿者招募困難，出現(xiàn)了供精精液供不應(yīng)求的局面[16-17]。湖南省人類精子庫志愿者精液篩查合格率僅為21.3%[18]。捐精志愿者精液、血液各項檢查均須達到規(guī)定標準才能合格捐精。張欣宗等[19]研究結(jié)果顯示，廣東省人類精子庫精液質(zhì)量篩查合格的志愿者占所有志愿者的32.1%，而本研究結(jié)果顯示TORCH感染占精液質(zhì)量篩查合格志愿者的4.2%，對于僅TOX、RV、CMV等一過性感染的志愿者，在抗體轉(zhuǎn)陰后可捐精。

本研究對廣東省人類精子庫捐精志愿者TORCH IgM抗體檢測結(jié)果進行分析，結(jié)果顯示經(jīng)兩次復(fù)查后TOX、RV、CMV分別有50.0%、47.6%、20.0%自然轉(zhuǎn)陰，總轉(zhuǎn)陰率為37.1%，考慮可能為本研究復(fù)查人數(shù)較少，比劉善忠[20]報道的9.8%高。有研究表明，對TOX感染的病人使用乙酰螺旋霉素，RV感染使用病毒靈，CMV感染使用更昔洛韋治療后，復(fù)查TORCH IgM抗體總轉(zhuǎn)陰率有98.9%[20]，甚至可達100%[21]。用藥治療一療程為7-14d，停藥兩周后復(fù)查，與本精子庫現(xiàn)行復(fù)查方案相比，復(fù)查間隔時間為一個月，兩種方案所需時間一樣，但用藥治療的抗體轉(zhuǎn)陰率比自然轉(zhuǎn)陰率高很多。由此看出，對TORCH感染的患者進行抗病毒治療，可起到很好的效果。

綜上所述，建議人類精子庫可考慮對第一次復(fù)查TORCH IgM抗體陽性的捐精志愿者給予相應(yīng)藥物治療，以提高捐精志愿者的合格率，減少志愿者流失。