姜紅巖

當(dāng)前，安徽阜陽(yáng)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)過(guò)程主要使用氨基甲酸酯、有機(jī)磷等農(nóng)藥，部分農(nóng)藥可殘留在蔬果外表。此類(lèi)農(nóng)產(chǎn)品和生物體內(nèi)Ache（全稱(chēng)為“乙酰膽堿酯酶”）結(jié)合，導(dǎo)致酶活性受到抑制，致使人出現(xiàn)中毒癥狀。將蔬菜和Ache之間進(jìn)行萃取反應(yīng)，可檢測(cè)出農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留情況。但是，應(yīng)用此檢測(cè)技術(shù)，可能存在干擾因素，影響檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性，因此，探索出檢測(cè)技術(shù)的問(wèn)題的處理方式十分重要。

1、農(nóng)殘快速檢測(cè)技術(shù)應(yīng)用流程

（1）準(zhǔn)備階段

準(zhǔn)備階段，需要結(jié)合檢測(cè)要求，合理選擇檢測(cè)儀器，對(duì)儀器進(jìn)行自檢，保證其功能良好。同時(shí)檢測(cè)過(guò)程需要利用信息技術(shù)，運(yùn)用檢測(cè)系統(tǒng)，保證信息獲取的真實(shí)性。選擇智云達(dá)ZYD-NP6D檢測(cè)儀，該儀器光源穩(wěn)定，有多個(gè)通道，帶液晶顯示屏，能夠?qū)κ吖械陌被姿狨ヮ?lèi)農(nóng)藥快速檢測(cè)。自檢過(guò)程先預(yù)熱10～15min，保證光源的穩(wěn)定性，同時(shí)登陸農(nóng)殘快檢系統(tǒng)，設(shè)置端口和檢測(cè)儀相連，并將之前檢測(cè)的參數(shù)值、檢測(cè)信息等清除。

（2）制備對(duì)照液并測(cè)試

對(duì)照液的制備過(guò)程，選擇緩沖液2.5mL，酶100uL，將二者加入到比色皿當(dāng)中，待其均勻混合之后，將100uL的顯色劑添加其中，并添加底物20uL。將所有物質(zhì)搖勻之后，放置于比色皿當(dāng)中展開(kāi)對(duì)照測(cè)試，合理的結(jié)果區(qū)間為0.3～0.8，一旦超出此范圍，即代表操作環(huán)節(jié)存在問(wèn)題，或者顯色的時(shí)間較長(zhǎng)，此時(shí)，需要重復(fù)上述準(zhǔn)備流程，重新制備，直到結(jié)果合格。

（3）錄入信息

在檢驗(yàn)環(huán)節(jié)，需要將待檢驗(yàn)產(chǎn)品的名稱(chēng)以及檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)等重點(diǎn)信息全面地錄入到檢測(cè)系統(tǒng)當(dāng)中，保證整個(gè)檢測(cè)過(guò)程具備專(zhuān)業(yè)信息支持，提高結(jié)果的準(zhǔn)確性，保證農(nóng)殘快檢過(guò)程可順利得到預(yù)期效果，為檢測(cè)過(guò)程技術(shù)的順利應(yīng)用提供信息保障。

（4）制備檢測(cè)液

選擇2g待檢樣品，若為蔬菜，可剪成邊長(zhǎng)為1cm的方片，若為瓜果可切成1cm正方體，將其置于三角瓶當(dāng)中，向其中添加10mL的緩沖液，之后振蕩2min，過(guò)濾出清液作為待測(cè)試液。選擇100uL酶放入比色皿當(dāng)中，加入2.5mL待測(cè)液，混合均勻之后靜置10min，向其中添加100uL顯色劑，并加20uL底物。將比色皿蓋上，之后上下顛倒2次，將其置于儀器當(dāng)中測(cè)試。

（5）判定結(jié)果

對(duì)于農(nóng)殘快檢結(jié)果的判定，主要有以下三種情況：第一，當(dāng)樣品抑制率<50%，即可說(shuō)明，被檢測(cè)的農(nóng)產(chǎn)品中存在較少的農(nóng)藥殘留量，即樣品檢測(cè)結(jié)果“合格”。第二，當(dāng)樣品抑制率≥50%時(shí)，此時(shí)說(shuō)明被檢測(cè)的農(nóng)產(chǎn)品中含有較高的農(nóng)藥殘留量，即樣品檢測(cè)結(jié)果“不合格”，需要立即暫停相關(guān)農(nóng)產(chǎn)品的市場(chǎng)交易活動(dòng)，同時(shí)，對(duì)產(chǎn)品進(jìn)行追蹤，向上級(jí)主管部門(mén)進(jìn)行匯報(bào)。第三，當(dāng)樣品抑制率處于40%～50%區(qū)間內(nèi)，此時(shí)代表樣品“疑似農(nóng)藥殘留超標(biāo)”，需要進(jìn)行重復(fù)檢查，進(jìn)一步確認(rèn)。復(fù)檢之后，若抑制率>40%，需要使用色譜儀展開(kāi)分析，確認(rèn)之后停止該農(nóng)產(chǎn)品的市場(chǎng)交易，對(duì)其追蹤，向主管部門(mén)進(jìn)行匯報(bào)。

2、農(nóng)殘快速檢測(cè)中常見(jiàn)問(wèn)題處理方式

（1）處理“假陽(yáng)性”問(wèn)題

在農(nóng)殘的快速檢測(cè)過(guò)程，可能出現(xiàn)“假陽(yáng)性”結(jié)果，對(duì)此主要使用下列三種方式進(jìn)行處理：

第一，復(fù)核整體檢測(cè)過(guò)程，檢測(cè)員需要結(jié)合檢測(cè)過(guò)程，檢查空白對(duì)照值的精準(zhǔn)性，抑制率為檢測(cè)值、空白對(duì)照值之間的比率，因此，空白對(duì)照值是影響檢測(cè)結(jié)果的關(guān)鍵因素。當(dāng)結(jié)果中出現(xiàn)多數(shù)樣品呈“陽(yáng)性”時(shí)，此時(shí)需要核對(duì)對(duì)照值的真實(shí)性，提升檢查結(jié)果準(zhǔn)確度。與此同時(shí)，對(duì)檢查過(guò)程的取樣流程、方法、有效性等進(jìn)行核對(duì)。當(dāng)取樣過(guò)程方法不當(dāng)時(shí)，也會(huì)造成上述結(jié)果。例如：部分蔬菜韭菜、香蔥、香菜等自身對(duì)酶活性影響較大，在檢測(cè)上述農(nóng)產(chǎn)品時(shí)，可先將整株進(jìn)行浸泡，防止浸泡液流出，導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)“假陽(yáng)性”，為檢測(cè)結(jié)果的判定提供依據(jù)，保證整個(gè)檢測(cè)過(guò)程完全符合農(nóng)殘快檢的操作規(guī)范，規(guī)避檢測(cè)中的結(jié)果風(fēng)險(xiǎn)。

第二，重點(diǎn)落實(shí)檢測(cè)環(huán)節(jié)反應(yīng)溫度的一致性檢查，由于農(nóng)殘快檢過(guò)程溫度對(duì)酶穩(wěn)定性、活性等影響程度較高。如果冬季檢測(cè)，實(shí)驗(yàn)室中可能溫度條件難以恒定，可在“水浴鍋”內(nèi)完成10min的酶反應(yīng);在夏季檢測(cè)時(shí)，由于室溫過(guò)高可能抑制酶的活性，因此，可選擇上午時(shí)間將試劑配制好，保證驗(yàn)過(guò)程處于恒溫環(huán)境中進(jìn)行。在具體實(shí)踐過(guò)程，為提高檢測(cè)成功率，需要全面檢查反應(yīng)全程溫度是否恒定，落實(shí)空白對(duì)照組設(shè)計(jì)，保證檢測(cè)結(jié)果的精準(zhǔn)性。

第三，檢查酶受到抑制的反應(yīng)時(shí)間，整個(gè)檢測(cè)過(guò)程，由于酶抑制時(shí)間的不同對(duì)檢測(cè)結(jié)果以及結(jié)果利用等有重要影響。當(dāng)酶受抑制時(shí)間較長(zhǎng)時(shí)，其抑制率也會(huì)提高。當(dāng)待檢樣品中加入底物之后未迅速置于比色池當(dāng)中，就會(huì)將酶的反應(yīng)時(shí)間延長(zhǎng)，導(dǎo)致結(jié)果中有多個(gè)抑制率值呈“假陽(yáng)性”。對(duì)此，為保證檢測(cè)過(guò)程側(cè)科學(xué)性，高效實(shí)施檢測(cè)計(jì)劃，需要保障對(duì)照組、檢測(cè)組等酶抑制的反應(yīng)時(shí)間相一致。

（2）處理無(wú)效數(shù)值問(wèn)題

檢測(cè)環(huán)節(jié)，檢測(cè)結(jié)果中存在負(fù)值，主要因?yàn)闄z測(cè)過(guò)程吸光值比對(duì)照檢測(cè)吸光值高，導(dǎo)致系統(tǒng)出現(xiàn)錯(cuò)誤。此時(shí)，需要重新進(jìn)行對(duì)照試驗(yàn)，檢測(cè)環(huán)節(jié)嚴(yán)格對(duì)移液槍的使用作出規(guī)范，保證農(nóng)殘檢驗(yàn)流程規(guī)范，提高結(jié)果精度。

在檢測(cè)過(guò)程，比色池當(dāng)中產(chǎn)生個(gè)別無(wú)數(shù)值的通道，針對(duì)這一問(wèn)題，主要可對(duì)檢測(cè)儀進(jìn)行檢查，對(duì)紫外光燈的工作狀態(tài)全面檢查，確認(rèn)其是否存在故障。同時(shí)，還需對(duì)酶、顯色劑等添加情況展開(kāi)全方位檢查，為檢測(cè)環(huán)節(jié)提供精準(zhǔn)的參考信息。對(duì)以上無(wú)效數(shù)值的處理可保證后續(xù)檢測(cè)流程順利進(jìn)行，處理上述問(wèn)題時(shí)，相關(guān)人員需要重點(diǎn)積累檢測(cè)經(jīng)驗(yàn)，不斷提高農(nóng)殘快檢工作水平。

總而言之，在農(nóng)殘快檢過(guò)程，需要依靠完善的檢測(cè)流程，針對(duì)檢測(cè)環(huán)節(jié)存在的各類(lèi)問(wèn)題，要找出影響因素，采取針對(duì)性解決措施，提高檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，保證結(jié)果的高效利用。同時(shí)，農(nóng)藥種類(lèi)逐漸多樣化，要求檢測(cè)技術(shù)不斷發(fā)展，將檢測(cè)流程進(jìn)一步優(yōu)化，對(duì)此需要相關(guān)技術(shù)人員深入思考，全面分析檢測(cè)過(guò)程的影響因素，運(yùn)用先進(jìn)的技術(shù)加以解決，提高檢測(cè)結(jié)果質(zhì)量和精度。

（作者單位：236000安徽省阜陽(yáng)市潁州區(qū)農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣中心）