曾勇波，馬海明

(1 寧鄉(xiāng)市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，湖南 寧鄉(xiāng) 410600；2 湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，湖南 長(zhǎng)沙 410128)

寧鄉(xiāng)豬原產(chǎn)于湖南省寧鄉(xiāng)縣的流沙河及草沖一帶，原名為流沙河豬或草沖豬。寧鄉(xiāng)豬形成的歷史悠久，其體型特征是“絲頸葫蘆肚，耳薄嘴筒齊，稀毛現(xiàn)薄皮，魚(yú)尾后腳直，奶頭一斬齊，四腳要撒蹄”以及“烏云蓋雪銀頸圈”。寧鄉(xiāng)豬體型中等，體質(zhì)疏松細(xì)致，體軀呈圓筒狀，毛色為黑白花，基本色調(diào)是四肢、肋腹及頸下的下部為白色，頭和臀部呈黑色。肌球蛋白6(Myosin 6，Myo6) 屬于肌球蛋白家族，Myo6 基因與肉質(zhì)性狀有密切的關(guān)系。本研究旨在篩選寧鄉(xiāng)豬肉質(zhì)性狀遺傳標(biāo)記，以期為該標(biāo)記應(yīng)用于寧鄉(xiāng)豬的保種選育提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 樣品采集

從196頭寧鄉(xiāng)豬和167頭大白豬(共計(jì)363頭)耳部取小塊組織樣品，以供提取DNA，所采樣品在－20℃下保存。

1.2 DNA提取及聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Polymerase Chain Reaction，PCR)擴(kuò)增

基因組DNA提取按常規(guī)酚-氯仿進(jìn)行。Myo6基因SNP位點(diǎn)PCR-RFLP-XbaI的PCR擴(kuò)增條件為：95℃2 min(預(yù)變性)，95℃30 s(變性)，59℃30 s(退火)，72℃30 s(延伸)，40個(gè)循環(huán)。

2 結(jié)果與分析

Myo6基因A/G位點(diǎn)的基因頻率和基因型頻率見(jiàn)圖1。PCR-RFLP-XbaI多態(tài)性的分布情況如表1所示。

由表2可知，這兩個(gè)豬種的遺傳純合度都在0.5以上，且比較接近。寧鄉(xiāng)豬的有效等位基因數(shù)低于大白豬的。從多態(tài)信息含量上看，這兩個(gè)豬種的多態(tài)信息含量(Polymorphism Information Content，PIC)在0.25～0.5之間，屬于中度多態(tài)。

3 討論與結(jié)論

PCR-RFLP-XbaI多態(tài)性在寧鄉(xiāng)豬和大白豬中G基因均為優(yōu)勢(shì)等位基因，其基因頻率分別為0.576 5和0.691 6；經(jīng)適合性卡方檢驗(yàn)，可知不符合孟德?tīng)栠z傳分離定律，其原因可能與樣本數(shù)有關(guān)。大白豬和寧鄉(xiāng)豬在該基因位點(diǎn)具有遺傳多態(tài)性，并且具有較高的遺傳變異。