郭 翠 李淑萍

臨床上，血小板輸注是惡性腫瘤化療以及血液病者增加其血小板計數(shù)、預(yù)防出血的最有效措施[1]，但患者經(jīng)多次輸注導(dǎo)致機體對外源性血小板產(chǎn)生復(fù)雜的抗原反應(yīng)，即人類白細(xì)胞抗原(HLA)和人血小板特異性抗原(HPA)，導(dǎo)致血小板輸注無效(PTR)，并可能產(chǎn)生不良反應(yīng)[2]。故檢測HLA和HPA抗體對于血小板輸注治療患者至關(guān)重要，同時進行血小板抗體篩查及交叉配型直接影響血小板輸注效果，也十分重要[3]。本研究選擇我院多次血小板輸注血液病患兒78例，旨在合理的應(yīng)用有限的血小板，提高血小板輸注效果，降低不良反應(yīng)，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 研究對象

回顧性分析2016-01—2018-05在我院接收的多次血小板輸注治療的血液病患兒78例，其中男43例，女35例；年齡1-8歲，平均(4.58±1.24)歲；病型：急性髓性白血病患者38例，急性淋巴細(xì)胞性白血病20例，骨髓異常增生綜合征8例，血小板減少性紫癜6例，再生障礙性貧血5例，惡性淋巴瘤1例。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)入選患兒均符合血液病/惡性腫瘤的診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]；(2)所有患兒均進行輸血治療，能積極配合此次治療者；(3)家屬簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)發(fā)熱、脾腫大者；(2)合并嚴(yán)重的重要臟器疾病者；(3)活動性出血、彌散性血管內(nèi)凝者；(4)PTR的非免疫因素導(dǎo)致血小板減少情況者。

1.2 試劑與儀器

美國Baxter公司提供的 CS-3000plus血細(xì)胞分析儀，血小板抗體檢測及交叉配型試劑盒購自北京利德曼生化股份有限公司，西安東瑞科教實驗儀器有限公司提供的TXK4血型卡離心機。

1.3 方法

78例患兒在第3次血小板輸注前1h抽取5ml靜脈血，其中2ml注入EDTA-K2真空抗凝管(山東奧賽特醫(yī)療器械公司)，使用CS-3000plus血細(xì)胞分析儀檢測血小板計數(shù)。另外3ml注入無添加劑真空管，使用TXK4血型卡離心機分離血液凝固后的血清(2 500r/min，離心10min)，采用固相凝集法進行血小板抗體檢測，結(jié)果為陰性者(陰性組)輸注ABO同型血小板10U；陽性者(陽性組)選擇同型機采血小板進行交叉配型，未配型患兒(未配型組，n=13)直接輸注ABO同型血小板10U，已配型患兒(配型組，n=15)輸注相合的血小板10U，分別在輸注1h、24h后檢測患兒外周血小板計數(shù)，計算血小板糾正計數(shù)指數(shù)(CCI)，公式如下：CCI=[(輸注后血小板計數(shù)—輸注前血小板計數(shù))×體表面積(m2)]/輸入血小板總數(shù)，其中體表面積=0.0061×身高(cm)+0.0128×體重(kg)-0.01529。輸注血小板前陽性組與陰性組患兒血小板計數(shù)差異無統(tǒng)計學(xué)意義(17.38±4.03×109vs 17.11±4.21×109，t=0.28，P>0.05)，具有可比性。

1.4 輸注效果的評價

血小板輸注有效[5]：輸注1h CCI>7.50×109或24h CCI>4.50×109。非溶血性輸血反應(yīng)(NHTR)的判斷標(biāo)準(zhǔn)[6]：患兒輸注血小板后4h內(nèi)體溫上升>1℃，伴心悸、皮疹、寒戰(zhàn)等癥狀。

1.5 統(tǒng)計學(xué)處理

2 結(jié) 果

2.1 血液病患兒血小板抗體檢測結(jié)果

78例血小板輸注患兒的血小板抗體陽性為28例(35.89%)、血小板抗體陰性為50例(64.11%)。其中HLA-I抗體陽性23例(82.14%)，HLA-I+HPA抗體陽性4例(14.29%)，HPA抗體陽性1例(3.57%)。其中配型組中有HLA-I抗體陽性者12例(80.00%)，HLA-I+HPA抗體陽性2例(13.33%)，HPA抗體陽性1例(6.67%)；而未配型組中有HLA-I抗體陽性者11例(84.61%)，HLA-I+HPA抗體陽性2例(15.39%)。

2.2 CCI、PTR、NHTR發(fā)生率以及輸注有效率比較

陽性組患兒的血小板輸注后1h、24h的CCI均低于陰性組相同時點(t均>10.09，P<0.05)，且陽性組PTR及NHTR發(fā)生率均明顯高于陰性組患兒(χ2均>8.01，P<0.05)。配型組輸注血小板后1h、12h的CCI均高于同時點未配型組，PTR和NHTR發(fā)生率低于未配型組(P<0.05)。配型組的血小板輸注有效率(86.67%)明顯高于未配型組(0.00)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=21.03，P<0.01)。見表1。

表1 血小板輸注后的CCI值、PTR與NHTR發(fā)生率比較

注：與陰性組比較，1)P<0.05；與未配型組比較，2)P<0.05

3 討 論

血小板輸注無效的原因包括各種臨床因素，如發(fā)熱，敗血癥和脾腫大、感染、彌散性血管內(nèi)凝血等。在接受多次血小板輸注的患者中，導(dǎo)致輸血無效的原因，免疫因素約占20%[8]。人類HLA-I和人血HPA的抗體介導(dǎo)了該過程，導(dǎo)致輸入的血小板被破壞[9]。HLA抗體的產(chǎn)生特別常見，PLT輸注后7%—55%患者可產(chǎn)生HIA抗體，且與患者群體和輸血的數(shù)量和類型有關(guān)[10]，妊娠史或血液成分輸血史的婦女抗體陽性率較高。而血液病患者多次輸血的歷史增加了免疫供體血細(xì)胞抗原和免疫并發(fā)癥發(fā)展的可能性，在再生障礙性貧血，急性白血病，慢性淋巴細(xì)胞白血病和自身免疫性血小板減少癥的患者中進行同種抗體檢測是十分必要的[11]。盡管使用HLA匹配的血小板用于同種免疫接受者，但仍會發(fā)生輸注無效。目前沒有實驗室生化檢驗?zāi)軌蝾A(yù)測血小板輸注的功效。

臨床上血小板輸注無效是指部分患兒在血小板輸注后血液中血小板計數(shù)降低的表現(xiàn)，可能原因是血小板抗體陽性導(dǎo)致的血小板抗原抗體免疫反應(yīng)[12]。楊帆等[13]發(fā)現(xiàn)多次輸血的血小板輸注無效者選擇HPA抗原相匹配的血小板供者，能夠改善血小板輸注效果。鄭元等[14]分析了通過血小板交叉配型后的輸注效果，結(jié)果顯示血小板相關(guān)抗體的產(chǎn)生與妊娠史、輸血史相關(guān)，而在血小板輸注的基礎(chǔ)上對血小板抗體陽性的患者進行血小板交叉配型能夠明顯提高血小板輸注效率，降低血小板輸注無效發(fā)生率。趙菲[15]研究表明血液病患者隨著輸注次數(shù)增加，患者的CCI與PTR越低，且輸注無效率和血小板抗體檢出率明顯上升，同時陽性患者的血小板輸注無效率明顯高于陰性患者(60.87% vs 14.04%)，提示血小板抗體的產(chǎn)生是影響血液病患者輸注效果的主要原因。徐煜等[16]探討了85例血液病反復(fù)輸血(≥3次)者血小板抗體對血小板輸注效果的影響，發(fā)現(xiàn)陰性患者輸注1h后、24h后的CCI明顯高于陽性患者，以及PTR、NHTR發(fā)生率明顯低于陽性患者。以上提示血小板抗體的產(chǎn)生會直接影響血小板輸注效果，值得臨床重視。李志靜[17]研究顯示輸注濾白機采血小板的血液病患者中，特發(fā)性血小板減少性紫癜患者PTR率最高，血小板抗體篩查多次輸注血小板的患者有助于降低PTR。任苓苓等[18]采用固相凝集法檢測血小板抗體并進行血小板配型，有助于改善患者的輸注效果，特別是血小板抗體陽性患者進行交叉配型輸注者的有效率顯著更高。本研究結(jié)果顯示，78例血小板輸注患兒的檢測結(jié)果，血小板抗體陽性率為35.89%、陰性率為64.11%。其中HLA-I抗體者比例最高，為85.72%；同時交叉配型患兒中配型組血小板輸注有效率明顯高于未配型組，以及陽性患兒的血小板輸注后1h、24h的CCI值均明顯低于陰性患兒，且PTR、NHTR發(fā)生率明顯高于陰性患兒，以上提示血液病患兒進行血小板抗體篩查與交叉配型有助于提高血小板輸注效果。

綜上所述，血液病患兒HLA-I抗體陽性者比例最高，且交叉配型患兒的血小板的輸注有效率高，因此對于血液病患兒，依據(jù)血小板交叉配型試驗結(jié)果選擇交叉配型相合的血小板進行輸注，可提高血小板的輸注效果。

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