胡彩霞,劉美霞,高 娃,滿都呼,常建軍

(內(nèi)蒙古蒙牛乳業(yè)(集團)股份有限公司,內(nèi)蒙古 呼和浩特 011517)

磷是乳品中的主要營養(yǎng)成分之一，準(zhǔn)確快速測定乳制品中磷含量對保證產(chǎn)品質(zhì)量是非常重要的。在采用國際法的實際檢測中，電熱板加熱消解乳制品是在一個較開放的空間內(nèi)消解，容易帶入干擾物質(zhì)，進而影響檢測結(jié)果。高氯酸加熱分解產(chǎn)生二氧化氯、氯氣等對環(huán)境產(chǎn)生污染，同時在消解后期實驗產(chǎn)生的白煙如遇有機物極易產(chǎn)生威力強大的爆炸現(xiàn)象，而且實驗消解耗時長。

本研究在原有國標(biāo)法基礎(chǔ)上,開發(fā)出一種測定乳制品中磷含量的前處理方法,采用恒溫?zé)嵯庠嚇又杏袡C物,再依據(jù)國標(biāo)方法測定消解液中磷含量。用此前處理方法測定乳制品中磷含量結(jié)果準(zhǔn)確、操作安全簡便,環(huán)境污染小。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

紫外可見分光光度計、恒溫可控干燥箱、鋼化消解管、分析天平。

釩鉬酸銨試劑：A液，25 g 鉬酸銨[(NH4)6Mo7O24·4H2O)]，溶于400 ml水中；B液，1.25 g 偏釩酸銨(NH4VO3)溶于300 ml沸水中，冷卻后加250 ml硝酸。將A液緩緩傾入B 液中，不斷攪勻，并用水稀釋至1 L，貯于棕色瓶中。

濃硝酸、雙氧水、2,6-二硝基酚、氫氧化鈉。

1.2 檢測方法

1.2.1樣品組

稱取乳樣0.5 g(m)于鋼化消解管，再加入8 ml硝酸及2 ml雙氧水，加蓋后置于160℃恒溫烘箱內(nèi)，保溫6 h，得到消化液。

1.2.2空白組

向鋼化消解管中加入8 ml硝酸及2 ml雙氧水，加蓋后置于160℃恒溫烘箱內(nèi)，保溫6 h，得到消化液。

1.2.3冷制標(biāo)準(zhǔn)曲線

分別吸取0、2.5、5.0、7.5、10、15 ml磷的標(biāo)準(zhǔn)儲備液(10 μg/ml)到50 ml容量瓶中，在每個容量瓶中加入10 ml釩鉬酸銨試劑，用水定容至刻度，常溫下靜置15 min后用1 cm比色皿在440 nm波長處測定吸光度，以吸光度為縱坐標(biāo)，以磷的梯度濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.2.4制備符測空白液和試樣液

將消化液轉(zhuǎn)移至容量瓶中并定容至50 ml(V)，吸取10 ml(V1)消化液于50 ml容量瓶中，加10 ml釩鉬酸銨試劑，混合均勻，在25～30℃下顯色15 min，加水定容至50 ml(V2)，得到待測空白液和待測試樣液。

1.2.5計算磷含量

在440 nm波長下，以待測空白液調(diào)零，然后測定待測試樣液的吸光度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查到吸光度對應(yīng)的磷濃度(c)，并按照下列公式來計算磷的含量：

式中，X為樣品中磷的含量，mg/(100 g)；ρ為測定用試樣液中磷的質(zhì)量濃度，μg/ml；ρ0為測定用空白溶液中磷的質(zhì)量濃度，μg/ml；V為試樣消化液定容體積，ml；V2為試樣比色液定容體積，ml；V1為測定用試樣消化液的體積，ml；m為試樣稱樣量，g；1 000為換算系數(shù)；100為換算系數(shù)。

2 結(jié)果與分析

2.1 改進后的前處理方法與國標(biāo)的不同之處

本研究前處理方法與國標(biāo)處理方法的不同之處見表1。

表1 改進后方法與國標(biāo)方法對比

由表1可知,改進后的前處理方法在操作可控性、安全性、等方面要優(yōu)于國標(biāo)方法，且對環(huán)境的污染小。

2.2 檢測結(jié)果對比

取同一樣品分別用改進方法，和國標(biāo)GB 5009.87-2016的第二法釩鉬黃分光光度法測定乳制品中磷含量，檢測結(jié)果如表2所示。

表2 國標(biāo)方法和改進后的方法測定磷含量的比較

國標(biāo)中要求在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的絕對差值不得超過算術(shù)平均值的5%，改進方法與國標(biāo)方法測得結(jié)果相對偏差均在國標(biāo)要求范圍內(nèi)，但是改進方法的測定結(jié)果均高于國標(biāo)方法的測定值，原因主要是國標(biāo)測定時消解是在開放的條件下進行，測定元素會隨消解蒸汽揮發(fā)損失一部分，從而導(dǎo)致檢測結(jié)果偏低。

取國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)質(zhì)控樣品分別用改進方法和國標(biāo)法GB5009.87-2016的第二法釩鉬黃分光光度法測定，檢測結(jié)果如表3所示。

由表3可知，改進方法檢測磷含量與質(zhì)控定值相對偏差小，比國標(biāo)方法檢測更接近定值。

表3 國標(biāo)方法和改進方法測定質(zhì)控定值樣品磷含量結(jié)果比較

2.3 重復(fù)性實驗比對

表4 重復(fù)性檢測

按照改進后前處理方法測定不同乳制品及各乳制品的平行樣進行檢測，結(jié)果如表4所示。

由表4可以看出，平行樣之間的相對偏差在國標(biāo)要求范圍內(nèi)，重復(fù)性較好。

2.4 回收率測定

按照下列方法測定回收率，結(jié)果見表5。

(1)將乳制品與磷標(biāo)準(zhǔn)品溶液進行混合，得到加標(biāo)樣品。

(2)分別測定加標(biāo)樣品及乳制品中的磷含量，并按照下列公式計算回收率。

回收率=(加標(biāo)樣品中磷含量-乳制品中磷含量)×稱樣量÷(磷標(biāo)準(zhǔn)品溶液中磷含量磷標(biāo)準(zhǔn)品溶液體積)×100%。

依據(jù)GB/T 27404-2008中被測組分含量>100 mg/kg時回收率范圍為95%～105%，由表5可知，本研究的方法測得回收率均在國標(biāo)要求范圍內(nèi)。

表5 回收率

3 結(jié)論

采用硝酸加雙氧水恒溫消解作為檢測乳品中磷的前處理方法，檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性好，其檢測操作方便，可在非工作狀態(tài)下完成，環(huán)境污染小，安全性高。