吳旭錦，朱小甫，邢 蕾，張文娟，熊忙利

(咸陽職業(yè)技術(shù)學(xué)院 畜牧獸醫(yī)研究所，咸陽市動物疫病分子生物學(xué)診斷技術(shù)研究重點實驗室，陜西 咸陽 712000)

安卡拉病病原為Ⅰ群禽腺病毒第4血清型(FAdV-4)，又名心包積液-肝炎綜合征，是近年在我國雞群中廣泛流行的一種病毒性傳染病[1]。傳染性喉氣管炎(ILT)是雞群常見的急性上呼吸道傳染病，臨床主要表現(xiàn)為嚴(yán)重的呼吸困難，咳出血凝塊樣滲出物，喉頭、氣管黏膜出血，有的氣管內(nèi)有干酪性壞死物，是雞群重要呼吸道傳染病之一[2]。雞毒支原體(MG)感染臨床表現(xiàn)為流清亮鼻液，咳喘有啰音和腫眼，病程較長，雞只發(fā)育不良[3]。而滑液囊支原體(MS)感染主要引起關(guān)節(jié)腫大、滑膜炎和腱鞘炎，有的病例表現(xiàn)呼吸道感染[4]。2019年9月，筆者在臨床上診斷處理了一起FAdV、ILTV、MG和MS四重混合感染病例，病情復(fù)雜，較為罕見，現(xiàn)總結(jié)分析如下，以供同行參考。

1 發(fā)病情況與臨床表現(xiàn)

西咸新區(qū)某肉雞場，飼養(yǎng)肉雜380雞，同舍飼養(yǎng)兩種日齡雞，中間以尼龍網(wǎng)隔離。大日齡雞群1 500只，未發(fā)病。小日齡雞群1 500只，僅做過兩次新支二聯(lián)疫苗免疫，42日齡開始有零星發(fā)病死亡。臨床表現(xiàn)為，病雞精神差，蜷縮閉眼，食欲減退，部分病雞流鼻液，氣喘，有嚴(yán)重的呼嚕聲，夜晚更為嚴(yán)重，病雞拉黃綠色稀糞。死亡數(shù)逐日上升，發(fā)病一星期后每天死亡30～40只。先后請兩名當(dāng)?shù)孬F醫(yī)診治，第一次診斷為新城疫，用呼吸道藥物治療，未見效。第二次診斷為肝病繼發(fā)傳染性法氏囊病，注射法氏囊高免卵黃治療2 d無效。隨后帶瀕死雞來本實驗室進行診治，至此已經(jīng)傷亡287只，死亡率19.13%。

2 病理剖檢觀察

共剖檢瀕死雞8只，病理變化類似，總結(jié)歸納如下：肝臟顯著腫大，被膜緊張，邊緣鈍圓，體積為正常肝臟的2-3倍，表面濕潤光滑，色澤變淡，有散在的出血斑。從心包外即可發(fā)現(xiàn)心包內(nèi)充滿大量淡黃色液體，剖開心包，淡黃色液體流出，有的已經(jīng)凝固成膠凍狀。脾臟無肉眼可見變化。腎臟腫脹隆起，有白色條紋，呈花斑狀。胃腸道無肉眼可見病變。法氏囊色澤正常，剖開法氏囊褶皺清晰，無可見病變。喉頭、氣管黏膜有大量灰黃色粘液滲出。肺臟充血腫脹。

3 實驗室檢測分析

采集組織病料，將肝臟研磨處理2份，喉頭、氣管和肺組織混合研磨處理2份，法氏囊研磨處理2份，混懸液高速離心5分鐘，收集上清液。肝臟組織上清檢測FAdV-4；喉頭、氣管和肺組織上清檢測NDV、ILTV、H9 AIV、IBV、MG和MS；法氏囊組織上清檢測IBDV。采用本實驗室建立的相應(yīng)病原PCR/RT-PCR檢測方法，進行各個病原目的基因片段擴增[5-7]。檢測結(jié)果表明，F(xiàn)AdV-4(圖1A)、ILTV(圖1B)、MG(圖1C)、MS(圖1D)分別出現(xiàn)了750bp、361bp、139bp、487bp特異性條帶，核酸檢測陽性，而NDV、IBV、H9 AIV和IBDV核酸檢測均為陰性。從組織中分離細菌，未發(fā)現(xiàn)細菌性病原。結(jié)果提示雞群為FAdV、ILTV、MG和MS四重混合感染。

4 措施與效果

依據(jù)檢測結(jié)果，采取了以下措施?？紤]到大日齡雞群已經(jīng)達到出欄體重，為防止疫病蔓延，建議及時出欄清群。用0.1%戊二醛溶液、10%聚維酮碘溶液按1∶500噴霧消毒，每天1次，輪換使用。做好環(huán)境清潔工作，保證雞舍足夠的通風(fēng)量。雞群肌肉注射安卡拉高免卵黃抗體每只2 mL，間隔一天再注射一次。傳喉弱毒疫苗緊急點眼免疫每只1羽份。枝原凈(延胡索酸泰妙菌素)按每噸飼料拌料100 g飼喂，連用10 d。禽用轉(zhuǎn)移因子每瓶1 000羽飲水，兩天一次，連用兩次。禽用復(fù)合維生素溶液按照每1mL兌水5L自由飲用。同時拌料用中藥方劑喉氣散配合治療，組方為黃連30 g，黃柏30 g，黃芪20 g，板藍根30 g，大青葉40 g，穿心蓮50 g，甘草50 g，桔梗50 g，杏仁60 g，麻黃50 g，混勻粉碎為末，按每只1.5 g拌料喂服，連用5 d。通過以上措施，雞群死亡逐漸減少，一周后死亡停止，生產(chǎn)恢復(fù)正常。

5 小結(jié)與分析

在本案例中，第一次基層獸醫(yī)依據(jù)呼吸道癥狀和拉綠色稀糞就診斷為新城疫，沒有進行細致的病理解剖分析造成了誤診。第二次基層獸醫(yī)解剖發(fā)現(xiàn)肝臟不正常，腎臟表現(xiàn)出花斑腎，診斷為肝病和傳染性法氏囊炎，其肝病結(jié)論含糊不清，而僅依據(jù)腎臟病變就判斷為傳染性法氏囊炎，以偏概全，沒有進行綜合分析。兩次誤診和盲目用藥，延誤和加重了病情，浪費了藥物，造成了較大損失。

安卡拉有特征性的肝臟腫大、色澤變淡以及表面有出血斑，心包有大量淡黃色透明積液，通過病理變化不難診斷。本病例中雞只喉頭氣管雖有多量灰黃色粘液，但并無明顯黏膜出血、有血痰或干酪性滲出物，和一般典型的傳喉表現(xiàn)有所不同，難以通過病變診斷。滑液囊支原體一般表現(xiàn)為關(guān)節(jié)炎或胸囊炎，典型雞毒支原體感染引起的氣囊炎，在本病例中均無相應(yīng)表現(xiàn)，病理診斷困難。為了弄清病因，筆者通過PCR/RT-PCR方法檢測了8種病原，確定了該病例為FAdV、ILTV、MG和MS四重混合感染。病因診斷清楚后，針對四種病原采取有針對性的治療措施，輔助以消毒和提高維生素的供應(yīng)，取得了良好效果。由于我國雞群疫病流行形勢復(fù)雜，發(fā)病多見混合感染，臨床診斷與病理診斷難以準(zhǔn)確判定，導(dǎo)致臨床采取的措施不完善，或誤診造成錯誤的用藥方向，給養(yǎng)殖場造成更大的損失。因此，雞場在發(fā)病初期就應(yīng)迅速送檢，通過實驗室診斷盡快確診病因，對癥對因準(zhǔn)確處理，才能收到事半功倍的效果。