王耀輝 ，郭正龍 ，朱永祥 ，徐鋼春 ，孫偵龍

（1.南通龍洋水產(chǎn)有限公司，江蘇 南通 226600；2.中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院淡水漁業(yè)研究中心，江蘇 無錫 214081）

長(zhǎng)江刀鱭，隸屬鯡形目，鳀科，鱭屬，是長(zhǎng)江中下游重要的經(jīng)濟(jì)品種，長(zhǎng)江刀鱭的商品價(jià)值與資源保護(hù)及利用價(jià)值早已引起我國(guó)各級(jí)政府部門及水產(chǎn)界的高度重視，目前已經(jīng)列入長(zhǎng)江魚類重點(diǎn)保護(hù)水生動(dòng)物。目前國(guó)內(nèi)江蘇中洋集團(tuán)、上海市水產(chǎn)研究所、中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院無錫淡水漁業(yè)研究中心等單位均取得了人工繁殖的成功，由于受地理位置限制仿江海洄游人工繁育研究較少，江蘇中洋集團(tuán)南通龍洋水產(chǎn)有限公司通過引進(jìn)海水，模擬長(zhǎng)江刀魚洄游規(guī)律，取得繁殖成功，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

長(zhǎng)江刀鱭親魚為2014年9月在長(zhǎng)江靖江-如皋江段收購(gòu)8～10 cm的野生苗種10萬尾放入專用親魚培育車間，每年2—3月經(jīng)過挑選，進(jìn)入專池培育，經(jīng)過3～4年，最終選擇10 000尾作為親本群體，培育至100～150 g，選擇性腺發(fā)育良好的個(gè)體作為親本。

根據(jù)刀鱭在長(zhǎng)江內(nèi)生殖洄游規(guī)律以及繁育特性建立刀鱭生殖洄游模擬池，模擬池內(nèi)設(shè)置水流調(diào)控系統(tǒng)并建立海水和淡水比例調(diào)控系統(tǒng)，建立控制光照周期和光照強(qiáng)度以及配備最先進(jìn)的溶氧、pH值、水溫在線水質(zhì)監(jiān)控。

表1 刀鱭親本培育調(diào)節(jié)

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 親本培育 根據(jù)長(zhǎng)江刀鱭幼魚進(jìn)入江河支流或湖泊中育肥，至秋季才入海生活，主食為浮游動(dòng)物、小魚蝦等為食，經(jīng)過馴食能吞食配合飼料這些食性特點(diǎn)，不同季節(jié)食量的變化和性腺發(fā)育的規(guī)律性，進(jìn)行科學(xué)飼養(yǎng)管理培育（表1）。

第一步 通過水流流速大小刺激刀鱭性腺發(fā)育，模仿長(zhǎng)江刀鱭進(jìn)入長(zhǎng)江口時(shí)的水流環(huán)境，12月降低水流，經(jīng)過2個(gè)月的育肥之后，于每年3月增大水流讓，刺激性腺發(fā)育，在模擬的過程中要減少性腺發(fā)育過程中的應(yīng)激發(fā)應(yīng)；

第二步 通過模擬刀鱭在長(zhǎng)江內(nèi)生殖洄游路線中的滲透壓變化、水溫變化適時(shí)調(diào)控。在親本培育中嚴(yán)格控制海淡水比例、水溫變化，通過外界條件調(diào)控，以誘發(fā)其性腺發(fā)育成熟；

第三步 營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化，以鮮活餌料為主搭配全價(jià)配合膨化顆粒飼料，飼料投喂通常按照蝦：魚：顆粒料，比例為 5∶3∶1，根據(jù)實(shí)際情況增減。當(dāng)飼料量有明顯的減少時(shí)，此時(shí)性腺發(fā)育基本成熟，成熟系數(shù)大于10%，同時(shí)在親本培育池內(nèi)放養(yǎng)適量的鮮活、適口的河蝦，使其自然攝食。圖1親本培育和繁殖路線。

1.2.2 親本挑選 親本挑選的方法為“看、摸、擠”三個(gè)字，看親魚腹部大小，卵巢在體內(nèi)情況和生殖孔形態(tài)及顏色，卵巢向后延伸的位置；摸，就是摸腹部柔軟程度，腹壁厚度；擠，就是用手?jǐn)D腹部，看生殖孔是否有乳白色精液流出，肛門有否糞便。

1.2.3 親本催產(chǎn) 刀鱭人工繁殖操作要精細(xì)、動(dòng)作要迅速，通常在鹽度為5的海水中操作。當(dāng)卵巢發(fā)育到第Ⅳ期中后期，從體表觀察，卵巢輪廓明顯膨大，充滿體腔，解剖觀察表面血管粗而清晰，呈清祿色或者橙黃色，卵粒大小均勻，成熟系數(shù)為10%～20%。肌肉兩針注射：第一針雌性注射LRH-A23～4 ug+HCG 200～300 IU/kg，雄性減半；24 h 后進(jìn)行第二針注射雌性 LRH-A26～8 ug+HCG 500～600 IU/kg，雄性減半。

1.2.4 人工受精 采用人工濕法受精，先將湯碗內(nèi)加50 mL 0.7%生理鹽水，再將長(zhǎng)江刀鱭的精液和卵子同時(shí)擠到生理鹽水內(nèi)，用柔軟的羽毛輕輕攪動(dòng)，靜置20秒，放入預(yù)先準(zhǔn)備好的錐形孵化桶內(nèi)進(jìn)行流水孵化。整個(gè)操作過程中水溫控制在20～22℃。

1.2.5 受精卵孵化 在孵化桶充氣孵化直到出膜。在孵化過程中將水溫控制在20～22℃，定期觀察胚胎發(fā)育并及時(shí)除掉死胚胎等一些雜質(zhì)，保持水質(zhì)的清新。

2 結(jié)果

2.1 親魚培育結(jié)果

選擇100 g以上魚體健康，活力良好，無傷痕的刀鱭 5 000 組，雌雄比例控制為 1∶1.2～1∶1.5，放養(yǎng)密度1.5～2.0尾/m2。通過營(yíng)養(yǎng)、光照、鹽度、溫度等環(huán)節(jié)對(duì)刀鱭進(jìn)行了3～5個(gè)月的強(qiáng)化親魚培育，3月底有60%以上的親魚達(dá)到性成熟。

2.2 人工催產(chǎn)受精

2019年4月6日優(yōu)選了60組刀鱭進(jìn)行催產(chǎn)，平均體質(zhì)量115 g，產(chǎn)卵約60.5萬粒，放在孵化器中，溶氧控制在7 mg/L以上，靜水孵化。定期用顯微鏡觀察受精卵的發(fā)育情況，采用靜水孵化，孵化水溫為20～22℃，4月4日出膜，孵化率約為92.5%，待刀魚苗平游后，放入苗種培育池培育。

2.3 自然產(chǎn)卵

通過江海洄游條件的調(diào)節(jié)，在南通龍洋水產(chǎn)有限公司養(yǎng)殖基地刀鱭自然產(chǎn)卵一般在4月中上旬開始，親魚培育池水溫在20℃以上開始產(chǎn)卵，每年6月下旬到7月上旬，水溫升到27.5℃，產(chǎn)卵基本結(jié)束。

3 討論

3.1 親魚培育

3.1.1 營(yíng)養(yǎng)條件對(duì)性腺發(fā)育的影響 營(yíng)養(yǎng)條件是影響親魚性腺發(fā)育的主要因素。魚類性腺發(fā)育與魚體的含脂量和維生素E有密切關(guān)系。維生素E對(duì)卵巢的組織組成有較大影響，在魚類繁殖中具有重要生理作用，為此，我們對(duì)親本進(jìn)行培育時(shí)，特別注重了維生素E和脂肪的添加量。刀鱭依靠體內(nèi)積累的脂肪體作為洄游和生存的營(yíng)養(yǎng)來源，我們根據(jù)刀鱭營(yíng)養(yǎng)需求特點(diǎn)，在其卵巢營(yíng)養(yǎng)積累的冬季針對(duì)性的補(bǔ)充餌料中高脂肪成分，通過增加維生素C、維生素E、膽堿，達(dá)到既滿足刀鱭性腺發(fā)育營(yíng)養(yǎng)需求，又減輕了肝膽負(fù)擔(dān)。

3.1.2 水溫條件對(duì)性腺發(fā)育的影響 魚類生理活動(dòng)受水溫的高低直接影響，當(dāng)水溫逐漸升高，刀鱭的生理活動(dòng)就隨著加強(qiáng)，周期性的水溫變化對(duì)于其生長(zhǎng)、發(fā)育起著積極的作用，性腺發(fā)育隨水溫升高而逐步發(fā)育成熟。刀鱭產(chǎn)卵前要經(jīng)過3個(gè)增溫階段，每個(gè)階段增溫值平均在2～3℃。根據(jù)性腺的組織學(xué)分析，處于增溫階段時(shí)的刀鱭卵巢發(fā)育進(jìn)展迅速，尤其是卵巢體積增長(zhǎng)和色澤的變化，因此，水溫的變化對(duì)刀鱭產(chǎn)卵活動(dòng)有著重要作用，增溫是刺激性腺成熟進(jìn)展加快步伐一個(gè)關(guān)鍵。

3.1.3 光照、溶氧條件對(duì)性腺的影響 魚類的生長(zhǎng)發(fā)育與光照、溶氧同樣有密切關(guān)系。試驗(yàn)證明，延長(zhǎng)光照時(shí)間可使魚類性成熟提前，這是因?yàn)楣庥裳劬?jīng)神經(jīng)傳遞到下丘腦的松果體，促使腦垂體分泌性腺激素，從而促進(jìn)了性腺發(fā)育通常在養(yǎng)殖池外設(shè)置黑紗并在內(nèi)安裝日光燈。一般情況下，親魚培育池的溶氧量不低于5 mg/L。

3.1.4 水流對(duì)性腺的影響 水流可以改變水體的生活條件，運(yùn)走代謝產(chǎn)物，使生境中氣體、鹽等周期性更新，使水體中物理化學(xué)因素分布趨于均勻。刀鱭屬于上溯洄游產(chǎn)卵型，必須通過溯河而上在高水平代謝過程中消耗了大量脂肪，能量向性腺轉(zhuǎn)化，逐漸達(dá)到性成熟。刀鱭體型較小，尾部細(xì)長(zhǎng)，肌肉不發(fā)達(dá)，上溯時(shí)克服逆流沖擊能力有限，當(dāng)流速達(dá)到1.0 m/s左右，刀鱭就不容易游上去。因此，刀鱭上溯時(shí)走流速平緩的水域，漁民有句諺語“刀鱭不走大流，走二流”，設(shè)計(jì)親魚培育的水流不易過強(qiáng)。安裝水流控制系統(tǒng)的目的不僅是使池水水質(zhì)保持一定良好狀態(tài)，主要是模擬刀鱭洄游時(shí)生態(tài)狀況，刺激性腺發(fā)育成熟。一般每天注水1～3次，每次注水量為池水的1/4～1/5，應(yīng)視具體條件靈活應(yīng)用。催情后的親魚放入產(chǎn)卵池后，更要用流水刺激。

3.1.5 滲透壓對(duì)性腺的影響 對(duì)于洄游性魚類，鹽度也是影響性腺發(fā)育成熟的重要因子。刀鱭從海洋進(jìn)入長(zhǎng)江，魚體滲透壓需要根據(jù)洄游環(huán)境鹽度變化進(jìn)行調(diào)整，主要是在長(zhǎng)江口受海洋潮汐影響的咸淡水區(qū)域。此時(shí)要充分考慮徑流量的大小和鹽度高低對(duì)刀鱭性腺的影響，鹽度通常為11～18。

3.2 人工催產(chǎn)受精

由于刀鱭具有特殊的生物習(xí)性，性子比較急，應(yīng)急反應(yīng)比較強(qiáng)，對(duì)水的依賴性很強(qiáng)，出水瞬間即死，因此刀鱭繁殖操作要細(xì)致、輕快，通常在海水（5‰）中操作。刀魚優(yōu)選、催產(chǎn)都要在水中操作，在操作過程中既要不能讓刀魚出水，又要謹(jǐn)防應(yīng)急過度產(chǎn)生鱗片掉落，沒等到產(chǎn)卵就產(chǎn)生死亡。當(dāng)卵巢發(fā)育到第Ⅳ期末，外形上卵巢體積擴(kuò)大，充滿體腔，開始注射催產(chǎn)激素，取得了良好的效果。

在22℃水溫下采用人工濕法受精，先將湯碗內(nèi)加10 mL 0.7%生理鹽水，再將刀鱭的精液和卵子同時(shí)擠到生理鹽水內(nèi)，用柔軟的羽毛輕輕攪動(dòng)，靜置20秒，放入預(yù)先準(zhǔn)備好的長(zhǎng)腳盆內(nèi)靜置孵化，人工產(chǎn)卵后的親魚由于受傷過重，病死率比較高，這種人工產(chǎn)卵受精方式還有待于優(yōu)化。

3.3 自然產(chǎn)卵

通過江海洄游條件的調(diào)節(jié)，在南通龍洋水產(chǎn)有限公司養(yǎng)殖基地長(zhǎng)江刀鱭自然產(chǎn)卵都取得了成功.自然產(chǎn)卵在養(yǎng)殖條件下，一般在20℃以上開始產(chǎn)卵，水溫升到27.5℃產(chǎn)卵結(jié)束。經(jīng)過生產(chǎn)實(shí)踐，發(fā)現(xiàn)Ⅲ+齡的刀鱭就可以開始自然產(chǎn)卵，對(duì)于親魚培育過程中親魚營(yíng)養(yǎng)積累要求高，養(yǎng)殖生產(chǎn)中采用配合飼料、餌料魚、浮游生物相結(jié)合的方式，刀鱭的產(chǎn)卵容易獲得成功，單一的投喂方式，產(chǎn)卵量不穩(wěn)定，受精率較低，可能和刀鱭親魚養(yǎng)殖過程中對(duì)于營(yíng)養(yǎng)積累要求較高有關(guān)。