車蘇容，張家源，張秋梅，羅元珍，黃澤豪

(福建中醫(yī)藥大學(xué)，福建 福州 350122)

藥材當歸為傘形科當歸屬植物當歸(Angelica sinensis)的干燥根，性溫，味甘、辛，具有補血活血、調(diào)經(jīng)止痛、潤腸通便的功效[1]。獨活與當歸同科同屬，為植物重齒毛當歸(Angelica pubescensf.biserrata)的干燥根，性微溫，味辛、苦，具有祛風除濕、通痹止痛的功效[2]。歐當歸(Levisticum officinale)是與當歸同科不同屬的類似品，性微溫，味辛，微甘，具有活血調(diào)經(jīng)、利尿的功效[3]。三者來源相近，性味功效卻大不相同，臨床上不可混用。

近年來，由于當歸市場價格飛速上漲，在中藥市場中常出現(xiàn)各種偽品及混淆品，其中以在當歸中摻雜價格較低廉的獨活栽培品、生長周期較短(1 年即成)的歐當歸最為常見[4—5]。由于當歸、獨活及歐當歸在性狀及顯微鑒別層面難以區(qū)分[6]，使得當歸用藥質(zhì)量下降。王翰華等[7]運用紫外光譜法對當歸及其偽品東當歸、歐當歸進行鑒別，認為當歸和歐當歸的甲醇提取液無法通過紫外譜線加以區(qū)分。

紫外光譜線組法(Ultraviolet Absorption Spectra Lines Group，UASLG)是通過比較在四種不同極性溶劑(石油醚、氯仿、無水乙醇、水)下得到的多條紫外光譜線，從而鑒別不同藥材的方法[8]。該鑒別方法能夠較全面地反映出藥材所含的不同極性成分分布和含量，因此在藥材鑒別方面應(yīng)用廣泛，如中藥易混淆品鑒別[9]、中藥材不同炮制品鑒別[10]、中成藥鑒別[11]等。本次實驗運用紫外光譜線組法對當歸及其偽品獨活、歐當歸作鑒定學(xué)研究。

1 材料與方法

1.1 儀器

L5S 紫外可見分光光度計(上海儀電分析儀器有限公司)；KH-50A 型超聲清洗儀(昆山禾創(chuàng)超聲儀有限公司)；AR-5120 型電子天平(梅特勒-托利多儀器有限公司，美國)。

1.2 試劑

石油醚60 ℃～90 ℃(分析純，國藥集團化學(xué)試劑有限公司，批號：20150121)；氯仿(分析純，上海聯(lián)試化工試劑有限公司，批號：20131009)；無水乙醇(分析純，國藥集團化學(xué)試劑有限公司，批號：20150121)。

1.3 材料

當歸、獨活、歐當歸藥材是由安徽京皖飲片廠孟武威老師提供，經(jīng)鑒定依次為傘形科植物當歸、重齒毛當歸、歐當歸的干燥根。

1.4 方法

1.4.1 樣品處理

將當歸、獨活及歐當歸剪成粒度約0.5 mm均勻碎末，各稱量4份，每份2.0 g，置于50 mL錐形瓶內(nèi)，根據(jù)提取溶劑不同分成石油醚組、氯仿組、無水乙醇組及蒸餾水組，每組含不同藥材各一份。分別加入相應(yīng)溶劑20 mL，超聲提取30 min，過濾，收集濾液，備用。

各溶劑提取液的紫外掃描濃度確定，應(yīng)以其紫外掃描得到的紫外譜線吸收峰之間分離度較好且吸光度小于3.0為宜，經(jīng)過預(yù)實驗確定各溶劑組的溶液濃度(表1)。

1.4.2 實驗條件

以各溶液溶劑為空白對照校正曲線，再將1.4.1項下各組濾液分別置于石英比色皿中，在已預(yù)熱30 min 的L5S 紫外分光光度計中進行測量。

表1 當歸、獨活及歐當歸各溶劑組的溶液濃度Table 1 Solution concentrations of each solvent group in Angelica sinensis radix,A.pubescens radix and Levisticum officinale radix

掃描范圍190～400 nm；掃描速度中速；掃描間隔1 nm。

2 結(jié)果與分析

2.1 當歸、獨活及歐當歸石油醚提取液的紫外譜線

在石油醚組中，當歸和歐當歸的峰形高度相似，二者在217.0±0.5 nm 和310.0±1.0 nm 處均有一個明顯的吸收峰，在247.0±0.5 nm 處均有明顯的吸收谷，不具有特征鑒別意義；而獨活在248.0 nm 處有一肩峰，且獨活在270.0 nm 處有明顯的吸收谷，同位置處的當歸或歐當歸無吸收谷，與二者存在明顯差異，具有顯著鑒別意義(圖1)。

圖1 當歸、獨活及歐當歸石油醚提取液紫外譜線Fig.1 Ultraviolet spectral lines of petroleum ether extracts in Angelica sinensis radix,A.pubescens radix and Levisticum officinale radix

2.2 當歸、獨活及歐當歸氯仿提取液的紫外譜線

在氯仿組中，當歸和歐當歸的峰形高度相似，二者在242.0±0.5 nm、283.0±1.0 nm、316.5±1.0 nm處均有明顯的吸收峰，不具有鑒別意義；獨活在274.0 nm 處有明顯的吸收谷，與當歸或歐當歸存在明顯差異，具有顯著鑒別意義(圖2)。

圖2 當歸、獨活及歐當歸氯仿提取液紫外譜線Fig.2 Ultraviolet spectral lines of Chloroform extract in Angelica sinensis radix,A.pubescens radix and Levisticum officinale radix

2.3 當歸、獨活及歐當歸無水乙醇提取液的紫外譜線

在無水乙醇組中，當歸和歐當歸的峰形基本相似，在205±0.5 nm、313.0±1.5 nm 處均有明顯的吸收峰，在250.0±1.0 nm 處均有明顯的吸收谷，但當歸的次峰位在270.5 nm 處，而歐當歸的次峰位在280.5 nm 處，二者次峰位值相差10.0 nm，且差異穩(wěn)定存在，具有一定的鑒別意義；獨活在250.0 nm 處有一肩峰，同位置處的當歸或歐當歸則是吸收谷，在271.5 nm 處有明顯的吸收谷，在320.5 nm 處有明顯的吸收峰，與前二者存在明顯差異，具有顯著鑒別意義(圖3)。

圖3 當歸、獨活及歐當歸無水乙醇提取液紫外譜線Fig.3 Ultraviolet spectral lines of absolute alcohol extracts in Angelica sinensis radix,A.pubescens radix and Levisticum officinale radix

2.4 當歸、獨活及歐當歸蒸餾水提取液的紫外譜線

在蒸餾水組中，當歸和歐當歸的峰形較為相似，但當歸在 318.0 nm 處沒有吸收峰，且當歸在249.0 nm 處有1 個吸收谷，在264.0 nm 處有1 個吸收峰，而歐當歸則在258.0 nm 處有1 個吸收谷，在279.0 nm 處有1 個吸收峰，二者谷位值相差9.0 nm，次峰位值相差15.0 nm，且此差異穩(wěn)定存在，具有顯著鑒別意義；獨活在252.0 nm 處有1 個肩峰，與當歸或歐當歸存在明顯差異，有顯著鑒別意義(圖4)。

圖4 當歸、獨活及歐當歸蒸餾水提取液紫外譜線Fig.4 Ultraviolet spectral lines of distilled waterl extract in Angelica sinensis radix,A.pubescens radix and Levisticum officinale radix

3 結(jié)論

當歸和獨活在4 種極性溶劑中均存在明顯差異，在石油醚組中，當歸在248.0 nm 處有1 個吸收谷，同位置處的獨活則是1 個肩峰，且獨活在270.0 nm 處有1 個吸收谷，而當歸則沒有；在氯仿組中，當歸在283.5 nm 處有1 個吸收峰，而獨活在274.0 nm 處有1 個吸收谷；在無水乙醇組中，當歸在250.0 nm 處有1 個吸收谷，同位置處的獨活則是1 個肩峰，當歸在271.0 nm 處有1 個吸收峰，同位置處的獨活則是1 個吸收谷；在蒸餾水組中，當歸在249.0 nm 處有1 個吸收谷，在264.0 nm 處有1 個吸收峰，而獨活在252.0 nm 處有1 個肩峰，在318.0 nm 處有1 個吸收峰。

當歸和歐當歸在石油醚和氯仿組中峰形高度相似，特征吸收峰谷位值高度重合，無法區(qū)分，但在無水乙醇和蒸餾水組中可以鑒別。在無水乙醇組中，當歸的次峰位在270.5 nm 處，而歐當歸的次峰位在280.5 nm 處，二者次峰位值相差10.0 nm，且差異穩(wěn)定存在，具有一定鑒別意義；在蒸餾水組中，當歸在318.0 nm 處沒有吸收峰，而歐當歸在該處有吸收峰，且當歸在249.0 nm 處有1 個吸收谷，在264.0 nm處有1 個吸收峰，而歐當歸則在258.0 nm 處有1 個吸收谷，在279.0 nm 處有1 個吸收峰，二者谷位值相差9.0 nm，次峰位值相差15.0 nm，且此差異穩(wěn)定存在，具有顯著鑒別意義。

當歸、獨活和歐當歸在無水乙醇和蒸餾水組中均存在較為穩(wěn)定的差異，尤其是在蒸餾水提取液中三種藥材的峰谷差異顯著，因此紫外譜線組法可以鑒別當歸及其偽品獨活、歐當歸。