杜丹超，蒲占湑，鹿連明，胡秀榮，黃振東

(浙江省柑橘研究所，浙江 黃巖 318020)

柑橘黑點(diǎn)病是柑橘類植物上嚴(yán)重的真菌性病害，病原菌為有性態(tài)的柑橘間座殼菌(Diaporthecitri)和無性態(tài)的柑橘擬莖點(diǎn)霉菌(Phomopsiscitri)，可為害橘、柑、柚等大多數(shù)品種，其發(fā)生貫穿于整個(gè)柑橘生長期。根據(jù)發(fā)生部位的不同可分為柑橘黑點(diǎn)病、樹脂病和褐色蒂腐病，主要感染植株幼葉、幼梢和幼果。發(fā)病后表面出現(xiàn)黑色或紅褐色突起的小點(diǎn)或斑塊的即為黑點(diǎn)?。桓腥局Ω刹⒃斐芍Ω晌枭踔琳麡淇菟栏癄€的為樹脂病或流膠??；侵染果實(shí)蒂部，貯運(yùn)過程中常從蒂部變褐，周圍呈油漬狀，最后整個(gè)果實(shí)腐爛的為褐色蒂腐病[1-2]。黑點(diǎn)病在柑橘種植區(qū)普遍發(fā)生，嚴(yán)重影響柑橘的產(chǎn)量和品質(zhì)。據(jù)調(diào)查，一般柑橘園枝干發(fā)病率達(dá)0.5%以上，發(fā)病嚴(yán)重的園區(qū)黑點(diǎn)病株發(fā)病率可達(dá)100%，新稍發(fā)病率70%以上，果實(shí)發(fā)病率60%以上，造成部分枝干枯萎，甚至全樹枯死[3]。因此，柑橘黑點(diǎn)病的防治刻不容緩。

目前，化學(xué)防治仍是黑點(diǎn)病防治最經(jīng)濟(jì)有效的手段，我國柑橘產(chǎn)區(qū)主要以二硫代氨基甲酸酯類代森錳鋅和銅制劑類的氫氧化銅來防治柑橘黑點(diǎn)病，貯藏期以咪鮮胺為主防治青綠霉和褐色蒂腐，但這些藥劑的頻繁的使用出現(xiàn)防效降低的現(xiàn)象，這可能與病原菌產(chǎn)生抗性有關(guān)[1，4]。本研究選擇氟啶胺、咪鮮胺和代森錳鋅測定柑橘黑點(diǎn)病的室內(nèi)毒力，以期選出毒力較高的殺菌劑，為進(jìn)一步開發(fā)利用和提高該病害的化學(xué)防治效率提供理論指導(dǎo)。

1 材料與方法

1.1 材料

供試菌種。柑橘黑點(diǎn)病病菌的分離純化，從浙江省臺(tái)州市黃巖、玉環(huán)、臨海、天臺(tái)等柑橘產(chǎn)區(qū)采集病葉，收集病害果實(shí)，采用常規(guī)組織分離法分離，按照科赫氏法回歸驗(yàn)證，分類鑒定后，菌種于4 ℃保存于浙江省柑桔研究所。

藥劑。500 g·L-1氟啶胺懸浮劑(先正達(dá)集團(tuán))；450 g·L-1咪鮮胺乳油(以色列馬克西姆化學(xué)公司，江蘇龍燈化學(xué)有限公司分裝)；代森錳鋅可濕性粉劑(大生-M45，美國陶氏益農(nóng)公司)。

培養(yǎng)基。馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基(PDA)：去皮馬鈴薯200 g，葡萄糖20 g，瓊脂20 g，無菌水1 000 mL。

1.2 方法

采用菌絲生長速率法[5]。將17株柑橘致病菌D.citri在PDA培養(yǎng)基上培養(yǎng)5～7 d后，于菌落邊緣打取直徑5 mm的菌餅，分別接種于帶藥PDA培養(yǎng)基平板上，以不含殺菌劑處理為對(duì)照，每處理重復(fù)3次。將接菌后的平板于28 ℃培養(yǎng)箱內(nèi)倒置培養(yǎng)，待對(duì)照菌落直徑長至培養(yǎng)皿的2/3時(shí)，采用十字交叉法測量菌落直徑，根據(jù)公式計(jì)算殺菌劑對(duì)柑橘病原真菌的菌絲生長抑制率。根據(jù)毒力回歸方程求出殺菌劑的有效抑制中濃度EC50。

2 結(jié)果與分析

由表1可見，氟啶胺對(duì)柑橘黑點(diǎn)病菌絲生長抑制作用最強(qiáng)，其次是咪鮮胺，代森錳鋅的抑菌作用最弱，室內(nèi)毒力表現(xiàn)為氟啶胺>咪鮮胺>代森錳鋅。

表1 氟啶胺、咪鮮胺、代森錳鋅的毒力作用

3 討論

咪鮮胺、代森錳鋅和氟啶胺在中國均有登記用于柑橘黑點(diǎn)病的防治，本試驗(yàn)結(jié)果也表明，3種殺菌劑均對(duì)柑橘黑點(diǎn)病有抑制作用。其中，氟啶胺的抑菌效果最好。咪鮮胺屬于咪唑類殺菌劑，通過作用于細(xì)胞膜甾醇的生物合成來抑制生長[6]。本試驗(yàn)結(jié)果與方天露等[7]的報(bào)道一致，對(duì)柑橘黑點(diǎn)病菌絲生長室內(nèi)毒力較強(qiáng)。二硫代氨基甲酸酯類藥劑代森錳鋅為多作用位點(diǎn)保護(hù)性殺菌劑，對(duì)柑橘黑點(diǎn)病的防效明顯[8-9]。本研究中代森錳鋅對(duì)菌絲生長有一定的抑制作用，但部分菌株有一定耐藥性，其最大值為最小值的174倍，這與劉欣等[8]的研究結(jié)果存在一定差異，是否由于菌種差異或抗性原因造成還需進(jìn)一步試驗(yàn)研究。

柑橘黑點(diǎn)病的黑點(diǎn)是寄主防衛(wèi)反應(yīng)的產(chǎn)物，一旦感染病菌，黑點(diǎn)就會(huì)發(fā)生，故防治的重點(diǎn)是預(yù)防病菌感染，在藥劑選擇上，應(yīng)以保護(hù)性殺菌劑為主。試驗(yàn)結(jié)果表明，咪鮮胺的室內(nèi)抑制效果高于代森錳鋅，但黃振東等[9-10]田間試驗(yàn)剛好相反，認(rèn)為代森錳鋅仍是防治黑點(diǎn)病的最佳藥劑，這可能與保護(hù)性殺菌劑耐雨水沖刷、持效期長等因素有關(guān)。二硝基苯胺類氟啶胺也屬于保護(hù)性殺菌劑，為氧化磷酸化作用的解偶聯(lián)劑[11]，對(duì)交鏈孢屬、疫霉屬等均有效，并有較強(qiáng)的抑制作用，兼有優(yōu)良的控制食植性螨類的作用，且耐雨水沖刷，持效期長[12]。本研究室內(nèi)毒力試驗(yàn)表明，氟啶胺毒力作用遠(yuǎn)高于咪鮮胺和代森錳鋅，可作為柑橘黑點(diǎn)病防治的備選藥劑，但田間實(shí)際應(yīng)用技術(shù)還未完善，田間使用劑量、持效期、農(nóng)藥殘留等還需進(jìn)一步研究。