王春梅

（呼和浩特市第二醫(yī)院檢驗科，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010031）

乙型病毒性肝炎也被稱作乙肝，主要是乙型肝炎病毒引起，嚴重的還會發(fā)展成肝硬化或者是肝癌[1]?，F(xiàn)階段，可采用免疫學(xué)方法對HBV血清標志物進行檢測，但容易將隱匿性感染漏檢。而高靈敏乙型肝炎病毒核酸檢測方式具有較高的靈敏度，且特異性可觀，能夠使檢測窗口期縮短，且對機體內(nèi)部病毒的復(fù)制情況予以直接反映，所以被廣泛應(yīng)用于臨床。

1 資料和方法

1.1 基礎(chǔ)資料 選擇我院自2017年5月-2019年10月期間收治的術(shù)前篩查患者血清標本36例。各血清標本均分成三份，其中一份接受血清學(xué)檢測，于當(dāng)天完成。另兩份接受核酸檢測，經(jīng)離心分離血清后放置于溫度為-80oC的環(huán)境下保存以備用，要規(guī)避反復(fù)凍融情況的發(fā)生。

1.2 方法 一方面，兩份接受核酸檢測，普通乙型肝炎病毒核酸檢測法檢測HBV DNA，選擇相應(yīng)試劑盒按照說明書實施測定，從血清中提取HBV DNA將其加入反應(yīng)管，放入Engine型熒光定量PCR擴增儀器（美國MJ公司生產(chǎn)）進行擴增。

高靈敏乙型肝炎病毒核酸檢測HBV DNA，選擇高靈敏HBV DNA檢測試劑盒和核酸提取純化試劑盒（購自中山大學(xué)達安基因股份有限公司），將血清樣本200微升、蛋白酶K20微升、內(nèi)標液4微升等加入試劑封裝孔板中，經(jīng)Smart32型半自動核酸提取儀器（購自中山大學(xué)達安基因股份有限公司）處理后，在PCR反應(yīng)管內(nèi)加入所得核酸。隨后將其放置于Engine型熒光定量PCR擴增儀器內(nèi)進行擴增處理。

另一方面，乙肝兩對半采用酶聯(lián)免疫檢測，應(yīng)用設(shè)備為Spectra Max M5e多功能酶標儀（購自美谷分子儀器有限公司上海分公司），經(jīng)常規(guī)性質(zhì)控后，在免疫分析儀器內(nèi)放置待檢測標本并開展檢測工作，根據(jù)具體試劑說明書進行操作，常規(guī)讀數(shù)和結(jié)果判定。

1.3 觀察指標 分析高靈敏乙型肝炎病毒核酸檢測、普通乙型肝炎病毒核酸檢測法及酶聯(lián)免疫法檢測血清內(nèi)HBV DNA及乙型肝炎五項指標的結(jié)果。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析 采用SPSS 24.0處理數(shù)據(jù)，計數(shù)資料采用［n（%）］表示，χ2檢驗，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 高靈敏與普通乙型肝炎病毒核酸檢測法檢測結(jié)果比較對血清內(nèi)HBV DNA的兩種檢測方法比較發(fā)現(xiàn)，36例患者標本中，高靈敏乙型肝炎病毒核酸檢測陽性率是75.0%，普通乙型肝炎病毒核酸檢測陽性率是52.8%，前者顯著高于普通檢測陽性率，χ2=3.852，P=0.049。

2.2 高靈敏和普通乙型肝炎病毒核酸檢測法與乙肝兩對半檢測結(jié)果比較 高靈敏乙型肝炎病毒核酸檢測的“大三陽”、“小三陽”以及“1、5陽”的陽性率分別為25.0%、38.9%、11.1%，均較普通乙型肝炎病毒核酸檢測結(jié)果提高（表1）。

表1 高靈敏和普通乙型肝炎病毒核酸檢測法與乙肝兩對半檢測結(jié)果比較［n（%）］

3 討論

眾所周知，HBV會經(jīng)過輸注血液、皮膚黏膜破損或者是血制品等多種途徑進行傳播，特別是醫(yī)源性的傳播風(fēng)險系數(shù)偏高，若沒有消毒處理醫(yī)療器械或者是并侵入性操作等，均存在被感染的可能。在臨床實踐研究中發(fā)現(xiàn)，維持性血液透析患者被感染肝炎病毒的幾率遠遠超過普通人，者和血液反復(fù)輸注以及院內(nèi)交叉感染存在緊密關(guān)聯(lián)。為此，要想保證HBV傳播被阻斷，就應(yīng)對血液安全以及術(shù)前篩查等工作進行嚴格化地把控[2]。

在以上研究中，術(shù)前篩查患者的血清樣本接受高靈敏乙型肝炎病毒核酸檢測，漏檢率不高且陽性率高，檢測效果優(yōu)于普通乙型肝炎病毒核酸檢測方法。也就是說，在術(shù)前篩查乙肝患者的過程中，合理應(yīng)用高靈敏乙型肝炎病毒核酸檢測方法，可使患者機體內(nèi)部的HBV復(fù)制狀況以及傳染性準確地反映出來，對隱匿性感染予以發(fā)現(xiàn)，使得醫(yī)源性傳播的情況得到了有效預(yù)防。另外，較之于進口試劑，使用高靈敏乙型肝炎病毒核酸檢測的檢測成本也明顯減少，因而備受患者認可，具有較高的臨床推廣價值。