孫留霞，錢 坤，李 嘉

（1.周口職業(yè)技術(shù)學(xué)院，河南周口 466000；2.天津市農(nóng)業(yè)生態(tài)環(huán)境監(jiān)測與農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量檢測中心，天津 300402）

隨著飼料禁抗日程的逐漸到來，對促進(jìn)仔豬生長和健康的潛在抗生素替代品的需求不斷提高。酵母提取物含有各種生物活性化合物，包括核苷酸和細(xì)胞壁多糖，特別是β-葡聚糖和α-木聚糖，其有利于仔豬的生長和腸道健康（Gallois等，2009）。因此，酵母提取物已被認(rèn)為是一種潛在的替抗選擇。有研究表明，碳水化合物酶通過水解復(fù)合非淀粉多糖來增強(qiáng)腸道健康，不僅增加了營養(yǎng)的有效性，而且通過釋放可發(fā)酵的低聚糖來誘導(dǎo)益生菌的益生作用，這些低聚糖被宿主腸道微生物群用作能量來源（Masey-O’Neill等，2014）。本研究比較了添加或不添加復(fù)合酶的酵母提取物日糧與抗生素日糧對感染大腸桿菌仔豬生長性能、免疫狀態(tài)和腸道絨毛結(jié)構(gòu)的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗設(shè)計 試驗選擇24 d斷奶的仔豬360頭，隨機(jī)分為6組，每組60頭豬。試驗處理包括陰性對照組（T1組，基礎(chǔ)日糧，表1）、陽性對照組（T2組，斷奶后7 d進(jìn)行大腸桿菌攻毒）、陽性對照+抗生素組（T3組，75 mg/kg金霉素）、陽性對照+酵母提取物組（T4組，0.5%）、陽性對照+復(fù)合酶組（T5組，200 mg/kg）及陽性對照+酵母提取物（T6組，0.25%）+復(fù)合酶組（100 mg/kg）。試驗用復(fù)合酶由15000 IU/g纖維素、2000 IU/g甘露聚糖酶、3000 IU/g葡聚糖酶、12500 IU/g木聚糖酶和1000 IU/g蛋白酶組成。分別在試驗當(dāng)天、第8和11天早上對各重復(fù)豬進(jìn)行稱重，每天統(tǒng)計飼料用量，用于計算日增重、日采食量和飼料報酬。豬只攻毒方法按照Rakhshandeh和 de Lange（2012）的方法進(jìn)行。

1.2 樣品采集與分析 在第7天（攻毒前和攻毒后 6、48、96 h）取全血（每頭 10 mL），其中 5 mL用于分離血清。試驗結(jié)束后每個重復(fù)屠宰2頭豬，收集十二指腸、空腸和回腸，用于測定絨毛高度、隱窩深度，計算絨毛高度/隱窩深度。血清尿素氮、TNF-α（腫瘤壞死因子-α）、IL-10（白細(xì)胞介素-10）采用試劑盒分析。

1.3 數(shù)據(jù)分析 采用SAS軟件多因素方差分析模型對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析，采用Tukey法進(jìn)行多重比較，P＜0.05表示組間差異顯著。

表1 基礎(chǔ)日糧配方

2.1 生長性能 由表2結(jié)果可以看出，第1～7天（攻毒前）所有仔豬均表現(xiàn)健康，未發(fā)生腹瀉。此外，除了感染組+抗生素豬采食量顯著高于感染組+酵母提取物組外（P＜0.05）。在第7～11天（攻毒后），與陽性對照組相比，陰性對照組日增重、日采食量和飼料效率顯著提高（P＜0.05），而接受大腸桿菌脂多糖攻毒的豬有提高日增重的趨勢（P=0.07）。在1～11 d，與陰性對照相比，陽性對照組豬體重下降13%，日增重下降56%，日采食量下降37%，飼料效率下降26%（P＜0.05）。

表2 酵母提取物和復(fù)合酶對斷奶仔豬生長性能的影響

2.2 血液學(xué)指標(biāo) 由表3可知，各處理組對感染前豬血清尿素氮水平無顯著影響（P＞0.05）。感染后6 h，酵母提取物組血清尿素氮水平顯著高于無酵母提取物組（P＜0.05），陽性對照組血清尿素氮顯著高于陰性對照組和抗生素組（P＜0.05）。攻毒6 h后，酵母提取物血液白細(xì)胞數(shù)量顯著高于未添加酵母提取物組（P＜0.05），而陽性對照組血液白細(xì)胞計數(shù)顯著低于酵母提取物組（P＜0.05），而抗生素組較復(fù)合物組顯著提高了血液白細(xì)胞數(shù)量（P＜0.05）。攻毒6 h后，抗生素組較酵母提取物組顯著降低了紅細(xì)胞計數(shù)（P＜0.05）。攻毒6和96 h后，抗生素組血液血小板計數(shù)最低（P＜0.05）。

表3 酵母提取物和復(fù)合酶對斷奶仔豬血液學(xué)指標(biāo)的影響

2.3 腸絨毛形態(tài) 由表4可知，陰性對照組、復(fù)合酶組及酵母提取物+復(fù)合酶組較抗生素組顯著提高了十二指腸和空腸絨毛高度（P＜0.05），而抗生素組空腸絨毛高度與隱窩深度比值最低（P＜ 0.05）。

2.4 直腸溫度和血清免疫因子 由表5可知，感染后仔豬直腸溫度較感染前有一定的升高。攻毒6 h后，酵母提取物組（加或不加復(fù)合酶）較無酵母提取物組顯著降低了血清TNF-α濃度，顯著提高了血清IL-10濃度（P＜0.05）。與陽性對照組相比，陰性對照組和抗生素組顯著降低了TNF-α濃度（P＜0.05），但陰性對照組血清IL-10濃度顯著降低（P＜0.05），抗生素組血清IL-10濃度顯著提高（P＜0.05）。

表4 酵母提取物和復(fù)合酶對斷奶仔豬絨毛形態(tài)的影響

表5 酵母提取物和復(fù)合酶對斷奶仔豬直腸溫度和血清免疫因子的影響

3 討論

抗生素、酵母提取物和復(fù)合酶對斷奶后第7天仔豬的生產(chǎn)性能無顯著影響，但在第7～11天（攻毒后），陽性對照組日增重、采食量和飼料效率顯著降低，這與Liu等（2003）的研究結(jié)果一致，表明大腸桿菌攻毒對豬的生長性能有負(fù)面影響?？股貙ιL性能的這一有益影響在整個試驗期間（1～11 d）得到了進(jìn)一步體現(xiàn)，說明抗生素通過降低腸道病原體負(fù)荷和宿主與腸道微生物之間對營養(yǎng)物質(zhì)的競爭，改善了仔豬腸道健康和生長性能，這種作用也可能與抗生素免疫調(diào)節(jié)作用有關(guān)（Bode等，2014）。

血小板在凝血中發(fā)揮重要作用，作為血管損傷或病原體入侵的第一個應(yīng)答防線，陽性對照組白細(xì)胞和血小板計數(shù)減少是由于大腸桿菌脂多糖誘導(dǎo)的自身免疫，提示感染發(fā)生率或嚴(yán)重程度增加（Yeaman等，2014）。與未受攻毒的對照組豬相比，未加酶或加酶的豬補(bǔ)充酵母提取物可降低空腸和十二指腸絨毛萎縮，空腸絨毛高度/隱窩深度比也有所降低，效果與添加抗生素相似。絨毛高度和絨毛/隱窩的增加表明營養(yǎng)物質(zhì)消化和吸收得到改善。腸上皮細(xì)胞合成新生核苷酸的能力有限，因此，補(bǔ)充酵母提取物可增加日糧核苷酸水平，促進(jìn)腸組織的生長發(fā)育。

在豬身上注射脂多糖可誘導(dǎo)刺激細(xì)胞因子的生成，如IL-1、TNF-α、IFN-γ，這些因子視為內(nèi)生熱介質(zhì)。在本研究中，與陰性對照組相比，攻毒6 h后陽性對照組豬的直腸體溫明顯升高，這與Pi等（2014）的研究結(jié)果一致。抗生素組、酵母提取物和復(fù)合酶組的血清TNF-α和IL-10濃度高于陽性對照組，這意味著抗生素和酶+酵母提取物改善了豬的免疫功能，降低了大腸桿菌引起的促炎水平。

4 結(jié)論

感染大腸桿菌斷奶仔豬日糧添加酵母提取物對仔豬的影響與抗生素相似，即降低血清尿素氮、十二指腸和回腸絨毛萎縮，下調(diào)血清促炎細(xì)胞因子濃度。